更正：小鼠模型中尿路感染和导管相关性尿路感染的建立与表征

摘要

已发布更正： 建立并表征小鼠模型中的尿路感染和导管相关性尿路感染。方法部分已更新。

摘要

已发布更正：《建立并表征小鼠模型中的尿路感染与导尿管相关尿路感染》。实验方案部分已更新。

伦理声明已更新如下：

伦理声明：所有小鼠感染实验和操作均经华盛顿大学动物研究委员会批准，属于编号为20120216的实验方案，该方案于2013年1月11日获批，有效期至2016年1月11日。动物的整体护理符合美国国家研究委员会发布的《实验动物护理与使用指南》以及美国农业部动物护理资源指南的要求。安乐死操作程序符合《美国兽医协会动物安乐死指南（2013年版）》的规定。

至：

伦理声明：华盛顿大学动物研究委员会已批准本研究中所有小鼠感染实验及相关操作，批准编号为20150226，有效期至2018年12月10日。动物的整体护理符合美国国家研究委员会颁布的《实验动物护理与使用指南》以及美国农业部《动物护理资源指南》的要求。安乐死操作遵循《美国兽医协会动物安乐死指南（2013年版）》的规定。

第 3 步已从以下内容更新：

3. 细菌接种

1. 使用70%乙醇清洁工作台，并用吸水纸覆盖操作区域（或使用无菌超净台）。
2. 将最多0.9 ml的制备好的细菌接种物吸入1 ml（TB）注射器中（去除气泡）。将已准备好的无菌接种针（连接PE10导管）安装到含有接种物的注射器上，然后无菌修剪聚乙烯导管。
   注意：在针尖上方保留1 mm导管，以避免刺穿膀胱。
3. 剪下一英寸见方的Parafilm膜，在其表面涂上一滴外科润滑剂（约硬币大小）。
4. 将雌性C3H/HeN小鼠放入一个32盎司的玻璃罐中，罐内放置一个装有浸透3 ml异氟烷的棉球的茶包球，或使用麻醉机蒸发室（遵循制造商的操作规程），直至小鼠失去意识但仍保持正常呼吸（每秒1次呼吸）。
   注意：部分IACUC委员会不批准使用玻璃罐或蒸发室。请遵循您所在机构IACUC委员会的规定。
   注意：若使用装有茶包球的玻璃罐和/或带有浸有异氟烷棉球的鼻罩，必须密切观察动物，防止麻醉过量导致死亡。使用麻醉机和麻醉室的优势在于可精确控制异氟烷剂量，避免意外过量。警告：异氟烷为吸入性麻醉剂，应在通风良好的环境中使用，并尽量减少吸入。
5. 将小鼠从玻璃罐或麻醉室中取出，仰卧置于纸巾上，双腿分开。
6. 用鼻罩（连接至麻醉机、可提供受控异氟烷剂量的导管，部分麻醉机配备）或装有少量异氟烷（约1–2 ml）浸润棉球的50 ml锥形管覆盖小鼠鼻部。
7. 轻柔按压膀胱以诱导排尿，确保膀胱排空。用100%乙醇棉片擦拭尿道周围区域。将接种针/注射器针尖朝下轻蘸外科润滑剂。
8. 通过经尿道插入接种针约12 mm，向每只小鼠接种50 µl细菌溶液，缓慢推动注射器活塞，以约10 µl/秒的速度将接种物轻柔注入膀胱。接种完成后将接种针从小鼠体内取出。
   注意：开始接种时若立即在尿道口观察到接种物流出，表明接种针插入不当或未完全插入。
9. 移除鼻罩，将小鼠放回笼中。对每只小鼠重复步骤3.3–3.8。当更换接种物条件或菌株时，应将注射器和接种针丢弃至经批准的锐器容器中，并重新执行步骤3.2。
   注意：使用尿路致病菌接种通常不会引起严重疼痛症状。然而在极少数情况下，高剂量病原体可能导致发热、摄食饮水减少及异常行为。实验期间应持续监测动物健康状况。若出现明显疼痛症状，可给予镇痛剂（如皮下注射布托啡诺，剂量0.05−0.1 mg/kg）。所有操作应符合各机构IACUC的规定。

至：

3. 细菌接种

1. 使用70%乙醇清洁工作台，并用吸水纸覆盖操作区域（或使用无菌操作台）。
2. 将最多0.9 ml的制备好的细菌接种物吸入1 ml（TB）注射器中（去除气泡）。将已准备好的无菌接种针通过PE10导管连接至含有接种物的注射器，然后无菌修剪聚乙烯导管。
   注意：在针尖上方保留1 mm导管，以避免刺穿膀胱。
3. 剪下一英寸见方的Parafilm膜，在其表面涂上一滴外科润滑剂（约硬币大小）。
4. 将雌性C3H/HeN小鼠放入麻醉蒸发器舱内（按照仪器制造商的方案）进行麻醉，直至小鼠失去意识但仍保持正常呼吸（每秒1次呼吸）。
   注意：部分IACUC委员会不批准使用蒸发器麻醉。请遵循您所在机构IACUC委员会的规定。
   警告：异氟烷为吸入性麻醉剂，应在通风良好的环境中使用，并尽量减少吸入。
5. 将小鼠从蒸发器中取出，仰卧置于纸巾上，分开四肢。
6. 将鼻罩（连接至蒸发器、可提供受控异氟烷剂量的导管，部分蒸发器设备配备此装置）覆盖于小鼠鼻部，以维持麻醉状态。
7. 轻柔按压膀胱以诱导排尿，确保膀胱排空。用100%乙醇棉片擦拭尿道周围区域。将接种针/注射器针尖朝下轻蘸外科润滑剂。
8. 通过经尿道插入接种针约12 mm，向每只小鼠接种50 µl细菌溶液，缓慢推动注射器活塞，以约10 µl/sec的速度将接种物轻柔注入膀胱。接种完成后将接种针从小鼠体内取出。
   注意：若开始接种时即在尿道口观察到接种液返流，提示接种针插入不当或未完全插入。
9. 将小鼠移离鼻罩并放回笼中。对每只小鼠重复步骤3.3–3.8。当更换接种物条件或菌株时，应将注射器和接种针丢弃至经批准的锐器容器中，并重新执行步骤3.2。
   注意：使用尿路致病菌接种通常不会引起严重疼痛症状。然而在极少数情况下，给予高剂量病原体可能导致发热、摄食和饮水减少以及异常行为。实验期间应持续监测动物健康状况。若出现明显疼痛症状，可给予镇痛剂（如皮下注射布托啡诺，剂量0.05−0.1 mg/kg）。所有操作应符合各机构IACUC的规定。

方案

已发布更正：《建立并表征小鼠模型中的尿路感染与导管相关性尿路感染》。方法部分已更新。

伦理声明已从以下内容更新：

伦理声明：所有小鼠感染实验和操作均经华盛顿大学动物研究委员会批准，属于编号为20120216的实验方案，该方案于2013年1月11日获批，有效期至2016年1月11日。动物的整体护理符合美国国家研究委员会《实验动物护理与使用指南》以及美国农业部动物护理资源指南的要求。安乐死操作符合《美国兽医协会动物安乐死指南（2013年版）》的规定。

至：

伦理声明：华盛顿大学动物研究委员会已批准本研究中所有小鼠感染实验及相关操作，批准编号为20150226，有效期至2018年12月10日。动物的整体护理符合美国国家研究委员会颁布的《实验动物护理与使用指南》以及美国农业部《动物护理资源指南》的要求。安乐死操作程序遵循《美国兽医协会动物安乐死指南（2013年版）》。

第3步已更新为：

3. 细菌接种

1. 使用70%乙醇清洁工作台，并用吸水纸覆盖操作区域（或使用无菌超净台）。
2. 将最多0.9 ml的制备好的细菌接种物吸入1 ml（TB）注射器中（去除气泡）。将已准备好的无菌接种针（连接PE10导管）安装到含有接种物的注射器上，然后无菌修剪聚乙烯导管。
   注意：保留针尖上方约1 mm的导管，以避免刺穿膀胱。
3. 剪下一寸见方的Parafilm膜，在其表面涂上一小滴外科润滑剂（约硬币大小）。
4. 将雌性C3H/HeN小鼠放入一个32盎司的玻璃罐中，罐内放置一个装有浸透3 ml异氟烷的棉球的茶包球，或使用麻醉机蒸发室（遵循制造商的操作规程），直至小鼠失去意识但仍保持正常呼吸（每秒1次呼吸）。
   注意：部分IACUC委员会不批准使用玻璃罐或蒸发室。请遵循您所在机构IACUC委员会的规定。
   注意：若使用装有茶包球的玻璃罐和/或带有浸有异氟烷棉球的鼻罩，必须密切观察动物，以防麻醉过量导致死亡。使用麻醉机和麻醉舱的优势在于可精确控制异氟烷剂量，避免意外过量。警告：异氟烷为吸入性麻醉剂，应在通风良好的环境中使用，并尽量减少吸入。
5. 将小鼠从玻璃罐或麻醉舱中取出，仰卧置于纸巾上，展开四肢。
6. 用鼻罩（连接至麻醉机、可提供受控异氟烷剂量的管道，部分麻醉机配备此装置）或装有少量异氟烷（约1–2 ml）浸润棉球的50 ml锥形管覆盖小鼠鼻部。
7. 轻柔按压膀胱以诱导排尿，确保膀胱排空。用100%乙醇棉片擦拭尿道周围区域。将接种针/注射器的针尖部分轻蘸至外科润滑剂中。
8. 通过经尿道插入接种针约12 mm，向每只小鼠接种50 µl细菌溶液，缓慢推动注射器活塞，以约10 µl/秒的速度将接种物轻柔注入膀胱。接种完成后将接种针从小鼠体内取出。
   注意：开始接种时若立即在尿道口出现接种液回流，表明接种针插入不当或未完全插入。
9. 将小鼠从鼻罩移开并放回笼中。对每只小鼠重复步骤3.3–3.8。当更换接种物条件或菌株时，应将注射器和接种针丢弃至经批准的锐器盒中，并重新执行步骤3.2。
   注意：使用尿路致病菌接种通常不会引起严重疼痛症状。然而在极少数情况下，高剂量病原体可能导致发热、摄食和饮水减少以及异常行为。实验期间应持续监测动物健康状况。若出现明显疼痛症状，可给予镇痛剂（如皮下注射布托啡诺，剂量0.05−0.1 mg/kg）。所有操作应符合各机构IACUC的规定。

至：

3. 细菌接种

1. 使用70%乙醇清洁工作台，并用吸水纸覆盖操作区域（或使用无菌超净工作台）。
2. 将最多0.9 ml的制备好的细菌接种物吸入1 ml（TB）注射器中（去除气泡）。将已准备好的无菌接种针通过PE10导管连接至含有接种物的注射器，然后无菌修剪聚乙烯导管。
   注意：在针尖上方保留1 mm导管，以避免刺破膀胱。
3. 剪取一块1英寸见方的Parafilm膜，在其表面涂抹一小滴外科润滑剂（约硬币大小）。
4. 将雌性C3H/HeN小鼠放入麻醉蒸发器舱室中（按照制造商的操作说明），直至小鼠失去意识但仍保持正常呼吸（每秒1次呼吸）。
   注意：部分IACUC委员会不批准使用蒸发器麻醉。请遵循您所在机构IACUC委员会的规定。
   警告：异氟烷为吸入性麻醉剂，应在通风良好的环境中使用，并尽量减少吸入。
5. 将小鼠从蒸发器中取出，仰卧置于纸巾上，并展开四肢。
6. 用鼻罩（连接至蒸发器、可提供受控异氟烷剂量的导管，部分蒸发器设备配备此装置）覆盖小鼠鼻部，以维持麻醉状态。
7. 轻柔按压膀胱以诱导排尿，确保膀胱排空。用100%乙醇棉片擦拭尿道周围区域。将接种针/注射器的针尖部分轻轻蘸入外科润滑剂中。
8. 通过经尿道插入接种针约12 mm，向每只小鼠接种50 µl细菌溶液，缓慢推动注射器活塞，以约10 µl/sec的速度将接种物轻柔注入膀胱。接种完成后将接种针从小鼠体内取出。
   注意：开始接种时若立即在尿道口观察到接种物流出，提示接种针插入不当或未完全插入。
9. 将小鼠移离鼻罩并放回笼中。对每只小鼠重复步骤3.3–3.8。当更换接种物条件或菌株时，应将注射器和接种针丢弃至经批准的锐器容器中，并重新执行步骤3.2。
   注意：使用尿路致病性微生物接种通常不会引起严重疼痛症状。然而在极少数情况下，给予高剂量病原体可能导致发热、摄食和饮水减少以及异常行为。实验期间应持续监测动物健康状况。若出现明显疼痛症状，可给予镇痛剂（如皮下注射布托啡诺，剂量0.05−0.1 mg/kg）。所有操作应符合各机构IACUC的规定。