本文详细介绍了通过基于细胞成像的筛选来监测自噬流,以鉴定新的分子。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 100 mm 细胞培养板 | Corning | 430167 | 细胞培养板 |
| 12 孔多孔板 | Corning | 353043 | 细胞培养板 |
| 15 mL 离心锥形管 | Falcon-Corning | 352095 | 离心锥形管 |
| 24 孔多孔板 | Corning | 351147 | 细胞培养板 |
| 25 cm² 细胞培养瓶 | Falcon-Corning | 353014 | 细胞培养瓶 |
| 384 孔多孔板细胞载体 | Perkin Elmer | 6007550 | 细胞培养板 |
| 6 孔多孔板 | Corning | 351146 | 细胞培养板 |
| 96 孔多孔板 | Corning | 353077 | 细胞培养板 |
| 声波液体处理技术 | Labcyte | − | https://www.labcyte.com |
| 氯喹 | Sigma-Aldrich | C6628 | 自噬流抑制剂 |
| 二甲基亚砜 (DMSO) | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO | D2650 | 溶剂 |
| 杜氏改良伊格尔培养基 (DMEM) | Lonza, Basel, Switzerland | BE-604F | T/C28a2 细胞生长培养基 |
| 伊格尔最低必需培养基 (EMEM) | ATCC | 30–2003 | HEK 293-T17 细胞生长培养基 |
| FACScalibur 流式细胞仪 | Becton Dickinson, CA | − | https://www.bdbiosciences.com/en-eu |
| 胎牛血清 (FBS) | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO | F9665 | HEK 293-T17 细胞用血清 |
| 新生牛血清 (FCS) | Gibco by Life Technologies, CA | 26010–074 | 血清 |
| FuGene | Promega | E2691 | 一种非脂质体脂质混合物,用于质粒递送以构建自噬报告细胞系 |
| 手持式电子 384 通道移液器 | Integra | − | https://www.integra-biosciences.com/united-states/en/electronic-pipettes/viaflo-96384#downloads |
| Hank's 平衡盐溶液 (HBSS) | Sigma-Aldrich | H6648 | 缓冲液 |
| HEK 293-T17 | ATCC | CRL-11268 | 肾细胞系。用于辅助逆转录病毒包装 |
| 高内涵筛选系统 | Perkin Elmer | − | https://www.perkinelmer.com/es/product/operetta-cls-system-hh16000000 |
| Hoechst 33342 | Thermo Fisher Scientific | 62249 | DNA 染色剂 |
| 图像分析软件 | Perkin Elmer | − | https://www.perkinelmer.com/es/product/harmony-4-9-office-license-hh17000010 |
| 液体处理工作站 | Perkin Elmer | − | https://www.perkinelmer.com/es/category/janus-liquid-handler-workstations |
| 微孔板洗板机器人 | Biotek | − | https://go.biotek.com/405tradein |
| Opti-MEM® (1x) | Thermo Fisher Scientific | 11058 | 转染培养基 |
| 多聚甲醛 (PFA) | Sigma-Aldrich | 158127 | 固定剂 |
| pBABE-puro mCherry-EGFP-LC3B | Addgene, Cambridge, MA | 22418 | 质粒 |
| pCL-Eco | Addgene, Cambridge, MA | 12371 | 质粒 |
| 青霉素-链霉素 (P/S) | Sigma-Aldrich | P0781 | 抗生素 |
| 磷酸盐缓冲液 (PBS) | MP Biomedicals | 2810305 | 缓冲液 |
| 嘌呤霉素 | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO | P8833 | 抗生素 |
| 雷帕霉素 | Calbiochem, Germany | 5053210 | 自噬流激活剂 |
| CellQuestPro 软件 | Becton Dickinson | − | https://www.bdbiosciences.com/en-eu |
| 0.45 μm 注射器滤器 | Corning | CLS431220 | 无菌滤器 |
| T/C28a2 | − | − | 人软骨细胞系 |
| 胰蛋白酶 | Gibco by Life Technologies, CA | 15400054 | 用于 T/C28a2 细胞的胰蛋白酶 |
| 胰蛋白酶 | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO | SM-2002-C | 用于 HEK 293-T17 细胞的胰蛋白酶 |
| VSV.G | Addgene, Cambridge, MA | 14888 | 质粒 |
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