更正：用于大规模并行单核RNA测序的成年脊髓核的分离

摘要

已发布更正：《成年脊髓细胞核的分离用于大规模并行单细胞核RNA测序》。方法部分已更新。

摘要

已发布更正：《成年脊髓细胞核的分离用于大规模并行单细胞核RNA测序》。方法部分已更新。

步骤 3.1 已从以下内容更新：

将腰段脊髓置于预冷的Dounce匀浆器中，并加入500 mL预冷的去垢剂裂解缓冲液。

至：

将腰段脊髓置于预冷的Dounce匀浆器中，并加入500 μL预冷的去垢剂裂解缓冲液。

第 3.6 步已更新，原内容为：

再将1 mL低蔗糖缓冲液通过40 mm滤网，使低蔗糖缓冲液的最终体积达到3 mL，裂解缓冲液的最终体积达到500 mL。

至：

再将1 mL低蔗糖缓冲液通过40 mm滤网，使低蔗糖缓冲液的最终体积达到3 mL，并含有500 μL裂解缓冲液。

第 5.5 步已从以下内容更新：

离心完成后，立即以轻弹的方式倾倒上清液。
注意：如果希望获得体积更小且更纯净的终样品，可根据需要弃去残留的蔗糖缓冲液体积（小于400 mL）；但此残留液体中仍含有细胞核，可予以保留以最大化细胞核得率。

至：

离心完成后，立即以轻弹的方式倾倒上清液。
注意：如果希望获得体积更小且更纯净的终末样品，可根据需要弃去残留的少量蔗糖缓冲液（少于400 μL）；但此残留液体中仍含有细胞核，为最大化细胞核得率，可予以保留。

第 5.6 步已更新，原内容为：

使用 100 mL - 1 mL 重悬液，重悬附着在管壁上的细胞核。避免接触基于去污剂制备方法中残留的髓鞘“皱褶”。

至：

使用 100 μL - 1 mL 重悬液，重悬附着在管壁上的细胞核。避免含有去污剂制备方法中残留的髓鞘“皱褶”。

步骤 6.1.1 - 6.1.4 已 更新自：

1. 将细胞核调整至终浓度为每毫升225个细胞核。
2. 将条形码磁珠配制为每毫升250个磁珠的浓度。
3. 用含0.7% Sarkosyl的裂解缓冲液进行配制。
4. 调节流速，使磁珠流速为每分钟35毫升，细胞核流速为每分钟35毫升，油相流速为每分钟200毫升。

至：

1. 调整细胞核浓度至每微升225个细胞核 μL.
2. 以每微升250个微珠的浓度制备条形码微珠 μL.
3. 使用0.7% Sarkosyl配制裂解缓冲液。
4. 调节流速至35 μ每分钟升数（L/min）用于珠子，35 μL 每分钟用于细胞核，以及 200 μ升/分钟（用于油）

方案

已发布更正：《成年脊髓细胞核的分离用于大规模并行单细胞核RNA测序》。方法部分已更新。

步骤 3.1 已从以下内容更新：

将腰段脊髓置于预冷的Dounce匀浆器中，并加入500 mL预冷的去垢剂裂解缓冲液。

至：

将腰段脊髓置于预冷的Dounce匀浆器中，并加入500 μL预冷的去垢剂裂解缓冲液。

第 3.6 步已更新，原内容为：

再将1 mL低蔗糖缓冲液通过40 mm滤网，使低蔗糖缓冲液的最终体积达到3 mL，裂解缓冲液的最终体积达到500 mL。

至：

再将1 mL低蔗糖缓冲液通过40 mm滤网，使低蔗糖缓冲液的最终体积达到3 mL，并含有500 μL裂解缓冲液。

第 5.5 步已从以下内容更新：

离心完成后，立即以轻弹的方式倾倒上清液。
注意：如果希望获得体积更小且更纯净的终样品，可根据需要弃去残留的蔗糖缓冲液体积（小于400 mL）；但此残留液体中仍含有细胞核，可予以保留以最大化细胞核得率。

至：

离心完成后，立即以轻弹的方式倾倒上清液。
注意：如果希望获得体积更小且更纯净的终末样品，可根据需要弃去残留的少量蔗糖缓冲液（少于400 μL）；但此残留液体中仍含有细胞核，为最大化细胞核得率，可予以保留。

第 5.6 步已更新，原内容为：

使用 100 mL - 1 mL 重悬液，重悬附着在管壁上的细胞核。避免接触基于去污剂制备方法中残留的髓鞘“皱褶”。

至：

使用 100 μL - 1 mL 重悬液，重悬附着在管壁上的细胞核。避免含有去污剂制备方法中残留的髓鞘“皱褶”。

步骤 6.1.1 - 6.1.4 已 更新自：

1. 将细胞核调整至终浓度为每毫升225个细胞核。
2. 将条形码磁珠配制为每毫升250个磁珠的浓度。
3. 用含0.7% Sarkosyl的裂解缓冲液进行配制。
4. 调节流速，使磁珠流速为每分钟35毫升，细胞核流速为每分钟35毫升，油相流速为每分钟200毫升。

至：

1. 调整细胞核浓度至每微升225个细胞核 μL.
2. 以每微升250个微珠的浓度制备条形码微珠 μL.
3. 使用0.7% Sarkosyl配制裂解缓冲液。
4. 调节流速至35 μ每分钟升数（L/min）用于珠子，35 μL 每分钟用于细胞核，以及 200 μ升/分钟（用于油）