更正：O9-1 神经嵴细胞的培养与操作

摘要

已对以下文章发布更正： O9-1 神经嵴细胞的培养与操作。更新了实验方案部分。

摘要

已发布更正：《O9-1 神经嵴细胞的培养与操作》。实验方案部分已更新。

步骤 2.1 已从以下内容更新：

通过在DMEM中添加以下成分来配制O9-1细胞培养的基础培养基（括号内为终浓度）：15% 胎牛血清（FBS）、0.1 mM 最小必需培养基（MEM）非必需氨基酸、1 mM 丙酮酸钠、55 mM β-巯基乙醇、100 U/mL 青霉素、100 U/mL 链霉素、2 mM L-谷氨酰胺、10³ 单位/mL 白血病抑制因子（LIF；使用前立即加入，不可加入储备液中）以及 25 ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子（bFGF；使用前立即加入，不可加入储备液中）。

至：

通过在DMEM中添加以下成分来制备O9-1细胞培养的基础培养基（括号内为终浓度）：15% 胎牛血清（FBS）、0.1 mM 最小必需培养基（MEM）非必需氨基酸、1 mM 丙酮酸钠、55 µM β-巯基乙醇、100 U/mL 青霉素、100 µg/mL 链霉素、2 mM L-谷氨酰胺、10³ 单位/mL 白血病抑制因子（LIF；使用前立即加入，不可加入储备液中）以及 25 ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子（bFGF；使用前立即加入，不可加入储备液中）。

步骤 5.1.1 已从以下内容更新：

制备成骨分化培养基时，将以下成分稀释于α-MEM中（括号内为终浓度）：0.1 mM 地塞米松、100 ng/mL 骨形态发生蛋白2（BMP2）、50 µg/mL 抗坏血酸、10 mM β-甘油磷酸钠、10% 胎牛血清（FBS）、100 U/mL 青霉素和100 mg/mL 链霉素。

至：

配制成骨分化培养基时，将以下成分加入α-MEM中进行稀释（括号内为终浓度）：0.1 µM 地塞米松、100 ng/mL 骨形态发生蛋白2（BMP2）、50 µg/mL 抗坏血酸、10 mM β-甘油磷酸钠、10% 胎牛血清（FBS）、100 U/mL 青霉素和100 µg/mL 链霉素。

第 5.2.1 步已从以下内容更新：

制备软骨细胞分化培养基时，将以下成分加入α-MEM中进行稀释（括号内为终浓度）：5% 胎牛血清（FCS）、1% 胰岛素-转铁蛋白-硒（ITS）、100 U/mL 青霉素、100 mg/mL 链霉素、10 ng/mL 转化生长因子β（TGF-β3）、50 mg/mL 抗坏血酸、10 ng/mL BMP2、0.1 mM 地塞米松和 1 mM 丙酮酸钠。

至：

制备软骨细胞分化培养基时，将以下成分加入α-MEM中稀释（括号内为终浓度）：5% 胎牛血清（FCS）、1% 胰岛素-转铁蛋白-硒（ITS）、100 U/mL 青霉素、100 µg/mL 链霉素、10 ng/mL 转化生长因子β（TGF-β3）、50 µg/mL 抗坏血酸、10 ng/mL BMP2、0.1 µM 地塞米松和 1 mM 丙酮酸钠。

第 5.4.1 步已更新，原内容为：

配制胶质细胞分化培养基时，将以下成分加入 DMEM/F12 中进行稀释（括号内为终浓度）：1× B-27 添加剂、2 mM L-谷氨酰胺、50 ng/mL BMP2、100 U/mL 青霉素、100 mg/mL 链霉素、50 ng/mL LIF 和 1% 热灭活 FBS。

至：

配制胶质细胞分化培养基时，将以下成分加入 DMEM/F12 中进行稀释（括号内为终浓度）：1× B-27 添加剂、2 mM L-谷氨酰胺、50 ng/mL BMP2、100 U/mL 青霉素、100 µg/mL 链霉素、50 ng/mL 白血病抑制因子（LIF）和 1% 热灭活胎牛血清（FBS）。

方案

已发布更正： O9-1 神经嵴细胞的培养与操作。已更新实验方案部分。

步骤 2.1 已从以下内容更新：

通过在DMEM中添加以下成分来配制O9-1细胞培养的基础培养基（括号内为终浓度）：15% 胎牛血清（FBS）、0.1 mM 最低必需培养基（MEM）非必需氨基酸、1 mM 丙酮酸钠、55 mM β-巯基乙醇、100 U/mL 青霉素、100 U/mL 链霉素、2 mM L-谷氨酰胺、10³ 单位/mL 白血病抑制因子（LIF；使用前立即加入，切勿加入储备液中）以及 25 ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子（bFGF；使用前立即加入，切勿加入储备液中）。

至：

通过在DMEM中添加以下成分来制备O9-1细胞培养的基础培养基（括号内为终浓度）：15% 胎牛血清（FBS）、0.1 mM 最小必需培养基（MEM）非必需氨基酸、1 mM 丙酮酸钠、55 µM β-巯基乙醇、100 U/mL 青霉素、100 µg/mL 链霉素、2 mM L-谷氨酰胺、10³ 单位/mL 白血病抑制因子（LIF；使用前立即加入，不可加入储备液中）以及 25 ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子（bFGF；使用前立即加入，不可加入储备液中）。

步骤 5.1.1 已从以下内容更新：

配制成骨分化培养基时，将以下成分加入α-MEM培养基中进行稀释（括号内为终浓度）：0.1 mM 地塞米松、100 ng/mL 骨形态发生蛋白2（BMP2）、50 µg/mL 抗坏血酸、10 mM β-甘油磷酸钠、10% 胎牛血清（FBS）、100 U/mL 青霉素和100 mg/mL 链霉素。

至：

制备成骨分化培养基时，将以下成分加入α-MEM中进行稀释（括号内为终浓度）：0.1 µM 地塞米松、100 ng/mL 骨形态发生蛋白2（BMP2）、50 µg/mL 抗坏血酸、10 mM β-甘油磷酸钠、10% 胎牛血清（FBS）、100 U/mL 青霉素和100 µg/mL 链霉素。

第 5.2.1 步已从以下内容更新：

制备软骨细胞分化培养基时，将以下成分加入α-MEM中稀释（括号内为终浓度）：5% 胎牛血清（FCS）、1% 胰岛素-转铁蛋白-硒（ITS）、100 U/mL 青霉素、100 mg/mL 链霉素、10 ng/mL 转化生长因子β（TGF-β3）、50 mg/mL 抗坏血酸、10 ng/mL BMP2、0.1 mM 地塞米松和 1 mM 丙酮酸钠。

至：

制备软骨细胞分化培养基时，将以下成分加入α-MEM中进行稀释（括号内为终浓度）：5% 胎牛血清（FCS）、1% 胰岛素-转铁蛋白-硒（ITS）、100 U/mL 青霉素、100 µg/mL 链霉素、10 ng/mL 转化生长因子β（TGF-β3）、50 µg/mL 抗坏血酸、10 ng/mL BMP2、0.1 µM 地塞米松和 1 mM 丙酮酸钠。

第 5.4.1 步已从：

配制胶质细胞分化培养基时，将以下成分加入 DMEM/F12 中进行稀释（括号内为终浓度）：1× B-27 补充剂、2 mM L-谷氨酰胺、50 ng/mL BMP2、100 U/mL 青霉素、100 mg/mL 链霉素、50 ng/mL LIF 以及 1% 热灭活 FBS。

至：

配制胶质细胞分化培养基时，将以下成分加入 DMEM/F12 中稀释（括号内为终浓度）：1× B-27 添加剂、2 mM L-谷氨酰胺、50 ng/mL BMP2、100 U/mL 青霉素、100 µg/mL 链霉素、50 ng/mL 白血病抑制因子（LIF）以及 1% 热灭活胎牛血清（FBS）。