关节液分析用于识别骨关节炎

摘要

通过透射光、偏振光和补偿光显微镜对滑膜液进行分析，可利用简单的步骤评估样本的炎症性或非炎症性特征。该方法在骨关节炎中尤为有用，可用于检测钙盐结晶，并识别出更严重的骨关节炎亚型。

摘要

关节液（SF）分析在骨关节炎（OA）的诊断中具有重要意义。宏观和微观特征，包括白细胞（WBC）总数及分类计数，有助于界定关节液的非炎症性特征，这是OA的典型标志。在OA患者中，关节液样本中的白细胞计数通常不超过每微升2000个细胞，且中性粒细胞等炎症细胞的比例极低或缺如。钙盐结晶在OA患者的关节液中较为常见。尽管其在OA发病机制中的作用尚不明确，但已发现其与轻度炎症过程及更严重的疾病进展相关。近期研究发现，钙盐结晶可出现在OA的早期和晚期阶段，提示其可能在诊断OA不同临床亚型及指导药物治疗方面发挥重要作用。总体而言，OA中关节液分析的目标有两个：一是确定关节液的非炎症程度，二是明确是否存在钙盐结晶。

引言

骨关节炎（OA）是一种复杂且多因素的慢性关节疾病，在15岁及以上人群中全球汇总患病率估计为16%，在40岁及以上人群中则为23%¹。由于人口老龄化以及肥胖和代谢综合征等危险因素的增加，OA的发病率预计将进一步上升²。

骨关节炎（OA）的主要问题包括早期诊断困难，以及目前可用的治疗手段仅限于疼痛管理和症状缓解性慢作用药物（SYSADOAs），例如氨基葡萄糖。OA的诊断依赖于临床症状和影像学检查结果。然而，这两种评估方法之间缺乏相关性，可能导致OA诊断和治疗启动延迟数年²。OA的特征是退行性过程和低度炎症，这些可通过滑膜液（SF）分析进行有效研究。via 滑膜液分析。滑膜液是一种富含透明质酸的黏稠血浆渗出液，可润滑关节腔，为软骨提供营养和氧气，并清除代谢废物。滑膜液还具有减震功能，可在关节承受压力和张力时起到保护作用³。

滑膜液分析是一种简单且可靠的检测方法，在对出现肌肉骨骼症状和关节积液的患者进行初次评估时，必须始终执行该检查³。美国风湿病学会、英国风湿病学会及其他机构发布的指南均建议，将滑膜液分析作为风湿性疾病诊断检测的一部分，尤其在评估急性单关节炎时必须开展

方案

本方案符合帕多瓦大学医院伦理委员会的指导原则。滑膜液（SF）是在患者初次就诊或因关节炎发作而接受治疗性关节穿刺时，经患者知情同意后从膝关节采集的。该操作的禁忌症包括：凝血功能障碍、使用抗凝药物、关节区域皮肤病变、皮炎或蜂窝织炎。所有滑膜液样本均已去标识化。

1. 滑膜液制备

1. 转移关节穿刺术中采集的肿胀关节滑液样本¹⁵ 加入含有抗凝剂（首选EDTA；参见 材料表）以及另一管不含添加剂的（图1).
2. 在疑似感染的情况下，无菌操作将部分关节液样本（约 1 mL）转移至培养瓶中，用于微生物学检测。
   注意：感染可通过临床特征（严重肿胀、疼痛、发热、功能障碍，有时伴有发热）和关节液（SF）的肉眼外观（浑浊、颜色改变）怀疑。在此情况下，医生会开具微生物学分析医嘱，由微生物学实验室进行检测。
3. 样本采集后应立即进行SF分析（步骤2-5）。

2. 宏观检查

注意：滑膜液样本的宏观评估包括主观、定性及半定量评估。目前尚无参考标准量表，且不使用对照样本。

1. 记录关节滑液（S....

结果

受骨关节炎（OA）影响的大关节常出现肿胀，并产生大量滑膜液（SF），可通过关节穿刺术引流via arthrocentesis¹⁵。关节穿刺术后应立即评估滑膜液的宏观特征，主要包括量、颜色、透明度和黏稠度¹⁷。尽管这些特征特异性较低，但可提供有关炎症程度的初步信息。滑膜液的颜色取决于其细胞含量以及细胞外基质大分子的降解程度。来自OA患者的滑膜液呈淡黄色，这种色调通常与非炎性样本相关，而深黄色则提示炎性渗出物（图2）。若样本中含有少量血液（例如由于毛细血管破裂所致），则可能呈现微橙色。血性渗出物需谨慎评估，因其可能提示潜在的关节积血。透明度是OA患者滑膜液的一个显著特征。事实上，非炎性滑膜液中细胞、碎片、透明质酸和纤维蛋白片段含量较少，因此通常清澈透明，与炎性滑膜液的浑浊外观形成对比（图2）。

黏度是反映炎症的良好指标，因为它与基质大分子（主要是透明质酸）.......

讨论

在骨关节炎中，滑液分析通过以下简单步骤帮助定义疾病特征：总白细胞计数和分类白细胞计数，以及检测晶体（包括焦磷酸钙和碱性磷酸钙）。此外，尿酸钠晶体的检出可能提示重要的共病情况。

尽管成本较低且操作简单，但由于操作人员经验不足——尤其是晶体鉴定方面——可能会影响检测的敏感性和结果的可靠性。操作人员的培训和经验对于区分焦磷酸钙（CPP）和单水尿酸钠（MSU）晶体的形态及其双折射特性，并将晶体形态与其双折射程度相对应至关重要。一些研究报道了不同实验室之间在晶体鉴定上存在差异；因此，对实验室技术人员进行培训对于获得可靠且一致的结果至关重要¹⁴。晶体鉴定还可能受到对双折射颗粒误判的影响，这些颗粒可能被误认为致病性晶体。这些颗粒可能来源于外部（如灰尘或纤维），也可能存在于关节腔内（如皮质类固醇或脂质）。对载玻片进行彻底清洁可解决前者问题，而后者则只能通过培训和经验来克服¹⁴。

SF 分析的另一项局限性涉及使用茜素红染色来鉴定碱性钙盐（BCP）。如.......

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
茜素红 S	Merck	A5533	用于 BCP 结晶检测
Burker 计数板	Merck	BR718905	用于白细胞总数计数
盖玻片	Merck	C7931	用于显微镜检查
EDTA 采血管	BD	368861	用于滑膜液采集
载玻片	Merck	S8902	用于结晶检测
λ滤光片（补偿器）	任意	请参考显微镜厂商说明	用于结晶鉴定
Malassez-Potain 血细胞计数器	Artiglass	54830000	用于滑膜液稀释
亚甲蓝溶液	Merck	3978	用于白细胞总数计数
偏光显微镜	Leica、Nikon 或其他厂商	根据型号和厂商而定	用于完整的滑膜液分析
偏振镜片	任意	请参考显微镜厂商说明	用于结晶鉴定
Testsimplet	Waldeck	14386	活体染色用于细胞分类