讨论的文章：
青松，A.等人。一种缺血性肾损伤小鼠模型肾脏中microRNA的定量检测方法。 可视化实验杂志。（163），E61378 （2020）。
Bauer， S.， Pauli， J.， Pelisek， J. 从福尔马林固定石蜡包埋的人动脉粥样硬化病变中优化高质量 DNA 提取。 可视化实验杂志。（168），e61452 （2021）。
Suárez-Cuenca， J. A. 等人。使用局部循环单核祖细胞预测接受血管成形术治疗的严重肢体缺血患者的截肢。可视化实验杂志。（163），e61503 （2020）。
佐利，M. 等人。弥散 MRI 纤维束造影在内窥镜鼻内颅底手术中的作用。 可视化实验杂志。 （173），e61724 （2021）。
本合集的主要目的是为读者提供有关新方法的最新知识，以研究血管疾病在 体内 和 体外、人体或小鼠模型中的细胞、蛋白质和 mRNA 水平。这包括新的成像和人工智能模式，以及扩展到困难组织检索1（如钙化动脉）的组织病理学分析。该系列提出了四种方法，充分回答了这些问题，为如何从现代和技术的角度处理旧问题提供了非常有趣的线索，展示了该领域的快速技术演变。
缺血再灌注损伤 （IRI） 是急性肾损伤 （AKI） 的主要危险因素2。尽管 miRNA 是极好的候选者，但尚未建立特定的诊断生物标志物3。 青松等人。4 开发了一种有趣的 AKI 小鼠模型，通过 qRT-PCR 纯化和定量 miRNA。他们鉴定出 17 个由缺血再灌注损伤诱导的 AKI 上调 miRNA。该方法允许以动态范围、准确定量和高特异性研究AKI肾脏中miRNA的谱。此外，该模型有助于在 IRI 前后给药。该协议还向读者描述了PCR后需要注意的关键点和非特异性反应。一些关键点是均质化、内源对照的选择以及纯化的miRNA的质量。该方法非常有用，因为它为研究人肾脏中的 IRI 提供了 AKI 的动物模型，这对于 miRNA 以外的进一步研究可能是可行的。
Bauer等人5 建立了一种半自动方法，用于从少量福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）动脉粥样硬化斑块中提取DNA。这是另一个有趣的话题，因为它可能提供一种标准化方法来研究非常困难的组织的病理生物学，例如弥漫性钙化动脉粥样硬化1。这使得组织检索变得困难，因为它包括使用改变核酸和其他细胞内容的脱钙方案1。与两种基于手动柱的方法相比，作者获得了更高的 DNA 浓度和更好的 DNA 质量（稳定性和重现性），DNA 片段化没有显着差异。重要的方案修改包括脱蜡的孵育步骤（试剂毒性较小）、过夜蛋白酶 K 消化、在 65 °C 下加入裂解缓冲液后的进一步孵育时间以及洗脱体积的增加。该协议对于未来的高通量分析无疑是有希望的。
Suarez-Cuenca 等人 6 提出了一种用于定量血管成形术部位附近血管的循环单核祖细胞 （MPC） 的方案，以预测严重肢体缺血 （CLI） 患者截肢的风险。这是另一个有趣的话题，因为现在 CLI 中截肢的风险仍然很高7，并且严重缺乏可用的预测模型8。识别循环生物标志物的可能性在临床实践中非常有前途，为改变 CLI 患者的病史和管理提供了可行的视角。
在 Zoli 等人 9 的工作下，成像技术纤维束造影用于研究垂体间脑和颅底肿瘤的扩展。术前神经影像学评估在颅底手术前至关重要，由于技术问题，迄今为止，颅底手术中很少采用纤维束造影术10。除了实施用于管理这些肿瘤的 MRI 协议外，作者的目标也是描述神经外科医生和神经影像学团队之间的转化合作。这种合作为这些患者提供了有效的综合多轴方法提供了多学科方案。实施的协议包括快速序列（扩散加权图像的反相编码扫描）作为高级后处理校正的新方法。这为这些难治肿瘤的术前研究开辟了一条新方法。
血管动脉粥样硬化疾病仍然是世界范围内的一个主要健康问题，越来越需要新的方法来研究这些患者的不同层面，从影像学、血液到组织。本合集揭示了克服血管疾病研究中一些问题的技巧，包括：（1）研究斑块细胞、蛋白质和mRNA含量的新方法，（2）组织病理学分析扩展到困难的组织检索（例如，钙化区域），以及（3）血管生成的量化。当然，与组织分析相关的新方法的开发和披露与广泛的病理相关，并可能影响各级诊断的临床指南。
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