本文介绍了一种针对易感狂犬病的食肉动物的安全诱捕-疫苗接种-放归(TVR)技术方案。
本文介绍了一种针对易感狂犬病的食肉动物的安全诱捕-疫苗接种-放归(TVR)技术方案。
通过投放含疫苗的诱饵对野生动物进行口服疫苗接种,已在欧洲和北美广泛用作狂犬病防控的管理工具。在过去几十年中,成功的项目已针对多种重要的储存宿主(包括郊狼、狐狸、貉和浣熊)实施了预防与控制。然而,其他物种(例如臭鼬)或特定生境(例如城市环境)可能较难通过口服疫苗接种实现有效防控,因而需要考虑其他补充策略。诱捕-疫苗接种-放归(TVR)是一种替代方法,其操作包括使用活体捕兽笼捕捉目标野生动物。捕兽笼被布设在适宜且可进入的生境中的网格点上。捕获的动物通过标记进行识别,接受灭活商用疫苗的注射免疫,并记录性别、年龄和体重,随后在原捕获地放归。自2001年以来,在美国亚利桑那州弗拉格斯塔夫地区,已检测到狂犬病病毒从蝙蝠跨种传播至中型食肉动物(如臭鼬)的情况。在过去二十年中,TVR已被用作该地区应对此类事件时安全且有效的狂犬病预防与控制手段。
狂犬病病毒(RABV)是一种致命的人畜共患病,对全球人类健康构成严重威胁。世界卫生组织(WHO)报告称,每年约有59,000人死于狂犬病,主要集中在亚洲和非洲国家。此外,每年约有2900万人因被动物咬伤而接受暴露后疫苗接种。狂犬病对野生动物种群的影响难以准确量化,但在适宜的地理空间条件下发生疫情时,野生动物种群可能在疫情暴发期间出现高死亡率。Rosatte 报道称,在一次报告的 RABV 疫情发生后的数月内,124平方公里(48平方英里)范围内的浣熊(Procyon lotor)种群数量下降了约71%1。
控制和管理狂犬病病毒(RABV)对于保护人类健康、家养动物以及易感野生动物种群至关重要。由于所有哺乳动物均易感RABV,随着时间推移,RABV已适应多种不同的哺乳动物宿主,这些宿主现已成为病毒的储存宿主。这些宿主物种及其相关的病毒变异株通常分布于特定的地理区域。在这些区域内,病毒偶尔会溢出至非储存宿主(跨物种传播),但在大多数情况下,感染的非储存宿主个体不会将病毒在种群中进一步传播给其他个体。宿主转换是一种罕见事件,指病毒成功适应了新的宿主物种。这类事件最具危险性,因其可能影响RABV的传播模式,并削弱已实施的任何RABV管理措施2。
在北美,狂犬病病毒(RABV)的防控工作主要针对几种特定的陆生野生动物宿主物种。口服狂犬病疫苗(ORV)项目已被证明在大范围景观尺度上有效控制狂犬病。ORV 通过空中投放和人工分发含有口服 RABV 疫苗的小型饵剂来实现。这些饵剂被散布在野外环境中;当目标野生动物接触到这些饵剂并咬破时,即可口服摄入 RABV 疫苗。ORV 的应用对于控制欧洲的赤狐(Vulpes vulpes)狂犬病3、加拿大的浣熊狂犬病 ,以及美国的郊狼(Canis latrans) 和浣熊狂犬病4起到了关键作用。口服疫苗饵剂已被证实是 RABV 防控项目中的重要工具,因其可在广阔的地理区域实施,并减少防控项目所需的人力资源。然而,ORV 项目的一个缺点是其在成功免疫臭鼬物种方面效果不佳。目前看来,现有 ORV 饵剂在野生臭鼬种群中疫苗摄取不足,是制约 ORV 实际效果的主要障碍5。
诱捕-免疫-放归(TVR)是一种狂犬病管理的替代工具,有时与口服狂犬病疫苗(ORV)同时使用。TVR的目标是增加种群中接种狂犬病疫苗的个体数量。由于该方法需要耗费大量人力进行动物诱捕,且每平方公里的成本高于ORV6,因此TVR的实施规模远小于ORV,通常应用于存在多种ORV实施困难的城市地区7。
在美国,诱捕-免疫-放归(TVR)策略在亚利桑那州弗拉格斯塔夫市多次成功应用于臭鼬种群的狂犬病防控。自2001年以来,弗拉格斯塔夫市多次发生大棕蝠(Eptesicus fuscus)狂犬病毒变种在条纹臭鼬(Mephitis mephitis)种群中的跨物种传播事件8。在2001年至2011年期间(由美国农业部动植物卫生检验局野生动物服务处主导的多次独立TVR行动中),共诱捕、免疫并放归了842只动物,其中包括753只条纹臭鼬(野生动物服务处捕获数据)。每一次行动均成功遏制了臭鼬种群中的蝙蝠源狂犬病暴发。2021年,这一跨物种传播现象再次出现,当时在弗拉格斯塔夫市两个高度城市化的区域确认发现患狂犬病的条纹臭鼬。野生动物服务处立即与科科尼诺县卫生服务部门及多个州级机构合作,在相关区域协调并启动了TVR项目以控制疫情扩散。本论文旨在安全地展示针对臭鼬实施TVR项目的各个操作步骤。
所需用于捕获和疫苗接种的设备如下:
TVR 现场设备
所有所用设备的详细清单见随附的材料表文件。然而,对于所使用的"木制活塞",需作一些说明。这些是手工制作的装置,其手柄部分为一根木销。在木销末端固定有一块胶合板,其尺寸与捕鼠器开口相匹配。由于我们使用了三种不同尺寸的捕鼠器,因此制作了以下尺寸的活塞(6 英寸 × 6 英寸、8 英寸 × 8 英寸、10 英寸 × 10 英寸)(图 1)。此外,仅在处理臭鼬时才需要使用捕鼠器盖。捕鼠器覆盖材料可以是帆布、旧防水布,或像我们所使用的那种一次性塑料薄膜。
个人防护装备(PPE)
参与任何TVR项目之前,野外工作人员必须已完成暴露前狂犬病疫苗接种。TVR工作所需的个人防护装备包括眼部防护,例如一次性防护面罩、实验室护目镜或安全眼镜。一次性防护连体服可有效防护臭鼬喷雾中所含的多种挥发性化合物,是最佳选择。(注意:在处理浣熊或狐狸时无需穿戴防护服)。一次性丁腈手套可防止接触各种化学品和液体,同时能防护来自被捕获动物的含有病原体的唾液和体液。
捕鼠笼的准备与布设
我们使用三种尺寸的活体捕获笼:小型(7英寸 × 7英寸 × 24英寸)、中型(9英寸 × 9英寸 × 26英寸)和大型(10英寸 × 12英寸 × 32英寸)(图1)。在将捕鼠笼投放到野外之前,应使用肥皂和水彻底清洗。捕鼠笼应在开放空气中放置数周至数月,以消除异味。在布设前,应测试并根据需要修复触发机制。每个捕鼠笼需用铁丝固定标有“"Rabies Vector"”字样的警示标签。此外,在每个捕鼠笼周围显著位置设置额外的狂犬病警告标识;该次级警示牌提供基本的捕获信息及项目联系人信息。捕鼠笼应放置在动物活动路径或其附近,以及觅食区域。选址时应尽量减少动物受到的压力,包括天气因素和人类活动的干扰。每个确定的捕鼠地点应赋予唯一名称,并使用手持GPS设备记录其位置。
本方案中展示的动物安全操作与护理符合APHIS野生动物服务部门制定的标准。
1. 疫苗接种方案
我们实施了一种名为TVR的基于地面的RABV管理技术,以应对美国亚利桑那州弗拉格斯塔夫市的RABV疫情(图2)。本项目的目的并非评估TVR的有效性,而是作为紧急应对措施,在RABV隔离区内对中型食肉动物进行疫苗接种,以最大限度降低对公共健康的威胁。从2021年8月至2021年12月,弗拉格斯塔夫警察局和弗拉格斯塔夫动物控制部门陆续接到多起行为异常的条纹臭鼬报告;这些臭鼬随后被实施安乐死并进行RABV检测。公众在此期间报告的死亡臭鼬也被送检。总计有16只条纹臭鼬RABV检测呈阳性,其中4只来自弗拉格斯塔夫西部,12只来自东部。对此,我们于2021年12月初启动TVR行动,并记录了以下疫苗接种成果:在弗拉格斯塔夫西部,我们为27只条纹臭鼬、3只灰狐和4只浣熊接种了疫苗,并在37次机会中重新捕获了条纹臭鼬。在弗拉格斯塔夫东部,我们为106只条纹臭鼬和2只浣熊接种了疫苗,并在110次机会中重新捕获了条纹臭鼬。捕获工作在整个2022年持续进行。在此期间,两个捕获区域均未再检测到RABV阳性的臭鼬。2022年7月和8月,弗拉格斯塔夫南部的一个社区中发现3只患狂犬病的臭鼬(图3)。我们立即协调并在该新区域启动TVR行动,共为22只条纹臭鼬、1只宽鼻臭鼬和10只浣熊接种疫苗。重新捕获的动物包括34只条纹臭鼬和1只宽鼻臭鼬。弗拉格斯塔夫南部的捕获工作始于7月下旬,并持续至2022年底。在随后的几个月中,该地区未再发现新的患狂犬病臭鼬。此外,当地害虫控制公司在TVR区域外还捕获了另外15只臭鼬。我们与这些害虫控制公司协调,在动物被释放前为其接种疫苗。
诸如TVR之类的管理项目在控制RABV方面是有效的,因为它们减少了野生动物种群中易感个体的数量。此处展示的结果(表1)表明了该方案在对野生动物接种RABV疫苗方面的高效性和成功性。如前所述,TVR实施后我们未观察到新的RABV病例。(图4)TVR具有对捕获动物直接接种疫苗的明显优势。相比之下,口服疫苗(ORV)无法保证目标野生动物会摄取随机分布的饵料。TVR可确保每只被捕获的动物都接种疫苗。评估这些已接种动物在阻断RABV传播方面的有效性较为困难,但当我们尝试主观分析这些结果时,可以确定在这些城市地区存在190只完全接种疫苗的中型食肉动物,已显著降低了对公共健康的威胁。
| 年份 | 诱捕夜数 | 总捕获数 | 条纹臭鼬 | 浣熊 | 灰狐 | 猪鼻臭鼬 |
| 捕获数(个体数) | 捕获数(个体数) | 捕获数(个体数) | 捕获数(个体数) | |||
| 2021(12月) | 180 | 4 | 4 (4) | 0 (0) | 0 (0) | 0(0) |
| 2022 | 5,343 | 367 | 346 (166) | 16 (16) | 3 (3) | 2 (1) |
| 总计 | 5,523 | 371 | 350 (170) | 16 (16) | 3 (3) | 2 (1) |
表1:2021-2022年在亚利桑那州弗拉格斯塔夫进行TVR操作期间接种RABV疫苗的中型食肉动物。 T = 捕获动物总数,V = 成功接种疫苗并释放的不同个体数量。

图1:陷阱和活塞的尺寸。(左)最小型陷阱为 7 英寸 × 7 英寸 × 24 英寸,(中)中型为 9 英寸 × 9 英寸 × 26 英寸,(右)大型为 10 英寸 × 12 英寸 × 32 英寸。请点击此处查看此图的放大版本。

图2:2021-2022年美国亚利桑那州弗拉格斯塔夫市RABV阳性臭鼬分布情况。 2021年至2022年间在美国亚利桑那州弗拉格斯塔夫市检测到的RABV阳性臭鼬分布地图。红色圆点表示检测到RABV阳性臭鼬的地点。蓝色多边形表示城市范围内的TVR捕获区域。请点击此处查看此图的放大版本。

图3:美国亚利桑那州弗拉格斯塔夫南部TVR区域。2021年亚利桑那州弗拉格斯塔夫南部一条已建立的诱捕线的航拍地图。红点表示检测到狂犬病阳性动物的位置。绿点表示尚未捕获任何动物的陷阱位置。蓝点表示已成功捕获动物、实施疫苗接种并放归的陷阱位置。蓝点附近的白色数字表示在该陷阱点接种疫苗的动物数量。橙色点表示仅重新捕获了先前已接种过疫苗的动物的陷阱点。数据表显示了在此条诱捕线上捕获并接种疫苗的不同物种数量。请点击此处查看此图的放大版本。

图4:2021-2022年弗拉格斯塔夫地区每月检测出的RABV阳性臭鼬数量与TVR疫苗接种数量。 红线表示2021年7月至2022年12月期间在弗拉格斯塔夫检测出的RABV阳性动物数量。蓝线表示2021年12月至2022年12月期间接种疫苗的动物数量。蓝线上方的数字表示在相应月份接种疫苗的中型食肉动物数量。请点击此处查看该图的放大版本。
美国疾病控制与预防中心估计,每年约有55,000名美国人接受暴露后预防治疗(PEP),每次暴露的平均费用约为3,600美元9。与狂犬病相关的主要经济影响包括疾病管理成本以及暴露后预防人类死亡的治疗费用。减少健康问题和经济负担的关键在于成功对陆地储存宿主物种进行疫苗接种10。目标性疫苗接种与移除(TVR)项目是一种用于干预威胁人类健康、家养动物和野生动物疫情的管理工具。TVR在应对小规模狂犬病暴发时最为有效,因为在更大范围的地理区域实施该措施成本高昂且劳动密集6。尽管存在这些局限性,TVR仍是一种有价值的狂犬病管理工具,已多次被证明可通过为储存宿主物种接种疫苗有效阻止疾病传播11,12。本文所展示的TVR方案是针对亚利桑那州弗拉格斯塔夫市狂犬病暴发而制定的,该市自2001年以来在条纹臭鼬种群中反复发生大型棕褐色狂犬病毒(RABV)暴发8。该TVR项目基于Rosatte开展的一项研究,该研究在安大略省大都市区对臭鼬和浣熊进行了肌肉注射式狂犬病疫苗接种13。本方案阐述了如何安全且成功地为捕获的条纹臭鼬及其他中型食肉动物进行疫苗接种。
该方案中最重要的步骤之一是牢固地固定动物。动物必须被稳妥固定,但固定力度不应以任何方式对动物造成伤害。适当的固定可防止动物在注射过程中挣脱,从而确保其接受到完整的疫苗剂量(1 mL)。此外,固定良好的动物无法咬伤或抓挠用于安装耳标的操作工具。这有助于缩短每只动物的处理时间,从而降低动物所承受的应激程度。
我们遇到的一个挑战是在大型(10英寸×12英寸×32英寸)捕鼠笼中对捕获的臭鼬进行疫苗接种和耳标标记。这一过程可能较为困难,因为较大的空间使臭鼬更容易远离笼壁,导致工具难以触及。当捕获的是幼年臭鼬时,这一问题尤为明显。这些情况要求我们对处理技术进行一些调整。在此类情况下,我们会使用小型捕鼠笼的木质推杆,将臭鼬限制在笼子的角落,然后通过笼门开口从上方进行操作。这种方法使得处理臭鼬成为可能,但仍然具有挑战性。
我们在所有三种尺寸的捕兽笼中均记录到了臭鼬的捕获情况。浣熊仅在中型和大型捕兽笼中被捕获,而灰狐则仅在大型捕兽笼中被捕获。部分动物倾向于逐渐适应捕兽笼,导致被频繁重复捕获。持续将捕兽笼移动至新的地点有助于减少重复捕获,并为在更大范围内捕获和免疫新的个体提供机会。
TVR 的一个局限性是其能够有效处理的区域范围较小。在大规模狂犬病管理行动中,通常将 TVR 与 ORV 结合使用,以覆盖更广阔的地理区域。TVR 本身覆盖的面积要小得多,最适合用于城市地区作为快速应急响应,或如本例中用于控制臭鼬种群中的狂犬病暴发。TVR 的实施成本也可能较高,据估计每处理 1 km2 的费用为 625.00 美元12。由于较大区域需要更多人员和设备,成本会随之显著增加。
既往研究确定,接种1 mL狂犬病疫苗可有效刺激中型食肉动物产生狂犬病抗体14。已有若干基于TVR的研究论文提及动物疫苗接种1,12,13,14,但我们未能找到任何公开发表的文献对疫苗接种方案提供详细说明。因此,无法将本文所提供的方案与现有方法进行比较。本文分享的材料与方法将使野外工作团队能够向野生动物种群实施精确且有效的疫苗接种。该方案已被证实有效,将在当前及未来的TVR工作中持续使用。
作者无任何利益冲突需要披露。本网站提及任何特定的商业产品、工艺或服务,或使用任何商号、公司或企业名称,仅为公众提供信息和方便之用,并不构成美国农业部的 endorsement、推荐或偏袒。
作者谨此感谢科科尼诺县卫生服务部门,特别是萨布丽娜·凯利(Sabrina Kelley),为狂犬病隔离措施的实施提供了支持。此外,作者还感谢丹尼斯·斯莱特(Dennis Slate)和理查德·奇普曼(Richard Chipman)对电视口服疫苗(TVR)项目的推动,以及塔德·赛默(Tad Theimer)在捕获技术方面的建议。本项目完全由美国农业部动植物卫生检验局野生动物服务处及国家狂犬病项目资助。
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| #8 x 1-1/2 英寸 R4 多用途星形驱动平头螺钉(每包 110 个) | Home Depot | 96085 | 用于将底座固定到活塞推杆上 |
| #8 x 1-1/4 英寸 #2 菲利普斯平头木螺钉(100 个装) | Home Depot | SD8X1.25-R | 用于将捕获警示牌固定在桩上 |
| 2 英寸 x 2 英寸 x 8 英尺 条状板木材 | Home Depot | 75800593 | 活塞的推杆 |
| 20 G x 1.5 " 针头 | Kendall monoject | 8881 | 用于动物疫苗接种 |
| 3 mL 注射器 | Kendall monoject | 513934 | 用于动物疫苗接种 |
| 48 盎司 钢制钻锤 | Home Depot | MRF3LB | 用于将捕获警示牌的桩打入地面 |
| 7-1/4 英寸 x 140 齿 OSB/胶合板圆锯片 | Home Depot | A07140A | 圆锯切割胶合板所需的锯片 |
| 铝制文件夹 - 顶部开口,信纸尺寸 | ULINE | S-20173 | 用于记录和保存数据表 |
| 圆锯 | Home Depot | CSB144LZK | 用于切割木材以制作活塞 |
| 冷敷包 - 6 盎司 | ULINE | S-9902 | 用于调节疫苗温度 |
| 洗洁精 | ULINE | S-9975 | 用于清洁捕获装置 |
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| 手持式 GPS 设备 | Garmin | ETrex 32X | 用于记录捕获装置及捕获动物的位置 |
| 手持镜 6 英寸 x 7 英寸 | Walmart | Equate | 用于判断动物性别 |
| 头灯 | Home Depot | HDB32EH | 用于日出前检查捕获装置 |
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| 臭鼬及其他食肉动物活体捕获装置 | Tomahawk | 205; 602 | 用于捕捉臭鼬及其他食肉动物 |
| 丁腈手套 | ULINE | S-14179 | 用于保护工作人员免受病原体感染。有粉或无粉手套的尺寸和类型由工作人员自行选择。 |
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| 狂犬病捕获警示牌 9 英寸 x 12 英寸 | FedEx Office | NA | 固定在捕获装置附近的桩上 |
| 狂犬病疫苗 | Boehringer Ingelheim | Imrab® | 每只动物 1 mL;https://www.boehringer-ingelheim.com/animal-health/companion-animals-products/rabisin-imrab#:~:text=Rabisin%C2%AE%20%2F%20Imrab%C2%AE%20is,signs%20due%20to%20rabies%20infection. |
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| 浣熊和狐狸耳标 | 国家耳标公司(National Band and Tag Company) | 1005-3 | 用于浣熊和狐狸的耳标 |
| 浣熊和狐狸耳标 | 国家耳标公司(National Band and Tag Company) | 1005s3 | 用于为浣熊和狐狸安装耳标的耳标钳 |
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