勘误：大鼠常温离体灌注异位心脏移植模型

摘要

已对以下文章发布更正： 大鼠常温离体灌注异位心脏移植模型。已更新“实验方案”部分。

摘要

已发布更正：  常温体外灌注异位心脏移植大鼠模型。已更新“实验方案”部分。

方案第4节已从以下内容更新：

4. 植入

1. 受体准备
   1. 在供体操作结束前30分钟开始受体准备工作 离体 灌注
   2. 使用与步骤2.2中所述相同的方法对受体动物进行麻醉。
   3. 将大鼠仰卧置于加热垫上，并将温度探针插入直肠，以维持体温在37 °C。
   4. 涂抹眼用润滑剂，剃除从耻骨至剑突区域的毛发，并使用含碘消毒液和70%酒精清洁该区域。
2. 药物
   1. 皮下注射2 mL温热生理盐水，以补偿手术期间丢失的体液。皮下注射200 IU肝素。
   2. 皮下或肌内注射0.3 mL生理盐水溶解的头孢唑林（10 mg/kg）进行抗生素预防。
   3. 通过皮下注射20 mg/kg的双氯芬酸进行镇痛处理。
3. 行正中腹切口，插入拉钩以扩大腹腔。使用棉签将受体腹腔器官向左侧移动，为手术操作创造空间。
4. 用温热的湿纱布包裹腹腔器官以防止脱水。术中使用50 mL注射器间歇性地滴加温热的生理盐水。
5. 利用10倍放大倍率的手术显微镜，使用棉签钝性分离十二指肠及近端空肠，暴露腹主动脉（Abd. A.）和下腔静脉（IVC）。为腹主动脉和下腔静脉做好吻合准备，并按照规范系统地植入供体心脏 图3 或已有文献记载的方法¹⁵.
   注意：不要分离腹主动脉（Abd. A.）和下腔静脉（IVC）。
   1. 假设血管吻合口位于肾下，需准备足够长度的主动脉和下腔静脉用于钳夹。
   2. 使用棉签或锐齿镊进行钝性分离，以清除血管周围的脂肪和筋膜。
   3. 用5-0丝线结扎肠系膜分支以及主要血管的头侧和尾侧。抬起腹腔血管，用5-0丝线结扎或电凝腰部分支。注意保留睾丸动脉和静脉，避免夹闭。
   4. 使用结扎线提起血管，并将微血管夹置于肠系膜分支、主要血管的尾侧和头侧，以阻断吻合部位的血流。在放置血管夹前务必关闭加热垫，因为过度加热可能加重肢体缺血。
   5. 使用27 G针头穿刺主动脉，并用显微剪刀将切口延长至等于或略大于供体升主动脉（Asc. A）开口的长度，约5 mm。
   6. 在下腔静脉上做纵行切口，方法与主动脉切开相同，但切口位置较主动脉切口向尾侧偏移3 mm。
   7. 开始吻合时，将供体心脏置于受体腹部右侧，用一根间断单针（9-0聚丙烯）缝线在纵行切口的头侧角处将供体升主动脉与受体腹主动脉相连。
   8. 将心脏移至受体腹腔左侧，使用连续的9-0聚丙烯缝线将供体的升主动脉（Asc. A）与受体的腹主动脉（Abd. A）进行吻合。
   9. 用两针间断缝合线（9-0聚丙烯）将供体肺动脉固定于下腔静脉，缝合位置为纵行切口的尾侧角和头侧角。
   10. 从血管腔内侧开始进行静脉吻合的前半部分，然后从血管外侧完成剩余的后半部分。在收紧结之前，用生理盐水冲洗术区，以防止空气栓塞。
6. 脱气与解除夹闭
   1. 完成吻合后，首先移除肠系膜静脉夹，以使静脉血流入心脏右侧充盈。
   2. 通过逆行冠状动脉灌注数秒，排出冠状动脉循环和升主动脉中的空气。
   3. 在血管两侧各放置一块纱布，然后移除尾侧钳夹和头侧钳夹。
   4. 用棉签轻轻按压1-2分钟。确认止血充分后，移除棉签，并用温盐水冲洗吻合口。
      注意：再灌注后心脏应在1分钟内开始搏动。若受体大鼠体温低于35 °C，待体温升至36 °C时，心律将恢复正常。
7. 以迂回方式将腹腔器官复位，并使用连续的5-0聚丙烯缝线逐层关闭腹部切口。

至：

4. 植入

1. 受体准备
   1. 在供体手术结束前30分钟开始受体准备工作 离体 灌注
   2. 使用与步骤2.2中所述相同的方法对受体动物进行麻醉。
   3. 将大鼠仰卧置于加热垫上，并将温度探针插入直肠，以维持体温在 37 °C。
   4. 涂抹眼用润滑剂，剃除从会阴至剑突区域的毛发，并使用含碘消毒液和70%酒精清洁该区域。
2. 药物
   1. 皮下注射2 mL温热生理盐水，以补偿手术期间丢失的体液。皮下注射200 IU肝素。
   2. 皮下或肌内注射每公斤体重10 mg头孢唑林，溶于0.3 mL生理盐水中，以实施抗生素预防。
   3. 皮下注射20 mg/kg的双氯芬酸以进行疼痛控制。
3. 行正中腹切口，插入拉钩以扩大腹腔。使用棉签将受体腹腔器官向左侧移动，为手术操作创造空间。
4. 用温热的湿纱布包裹腹腔器官以防止脱水。术中使用50 mL注射器间歇性地喷洒温热的生理盐水。
5. 利用10倍放大倍率的手术显微镜，使用棉签钝性分离十二指肠及近端空肠，暴露腹主动脉（Abd. A.）和下腔静脉（IVC）。为腹主动脉和下腔静脉做好吻合准备，并按照规范系统地植入供体心脏 图3 或已有文献记载的方法¹⁵.
   注意：不要分离腹主动脉和下腔静脉。
   1. 假设血管吻合部位位于肾下，需准备足够长度的主动脉和下腔静脉用于钳夹。
   2. 使用棉签或锐齿镊进行钝性分离，以清除血管周围的脂肪和筋膜。
   3. 在肠系膜分支以及主要血管的头侧和尾侧放置5-0丝线结扎。抬起腹侧血管，用5-0丝线缝合结扎或电凝腰部分支。注意保留睾丸动脉和静脉，避免对其进行夹闭。
   4. 使用结扎线提起血管，并将微型夹子放置在主要血管吻合部位的肠系膜分支、尾侧和头侧，以阻断吻合处的血流。放置夹子前应关闭加热垫，因为过度加热可能加重肢体缺血。在移除血管夹子后，应及时打开加热垫，以防止低体温。
   5. 使用27 G针头穿刺主动脉，并用显微剪刀将切口延长至等于或略大于供体升主动脉（Asc. A）开口的长度，约5 mm。
   6. 以与主动脉切开相同的方式在下腔静脉上做一纵行切口，但位置较主动脉切口向尾侧偏移3 mm。
   7. 开始吻合时，将供体心脏置于受体腹部右侧，用一根间断单针（9-0聚丙烯缝线）在纵行切口的头侧角处将供体升主动脉与受体腹主动脉相连。
   8. 将心脏移至受体腹腔左侧，使用连续的9-0聚丙烯缝线将供体的升主动脉（Asc. A）与受体的腹主动脉（Abd. A）进行吻合。
   9. 用两针间断缝线（9-0聚丙烯）将供体肺动脉固定于下腔静脉，缝合位置为纵行切口的尾侧角和头侧角。
   10. 从血管管腔内侧开始进行静脉吻合的前半部分，然后从血管外侧完成剩余的后半部分。在收紧结之前，用生理盐水冲洗术区，以防止空气栓塞。
6. 脱气与解除夹闭
   1. 完成吻合后，首先移除肠系膜静脉夹，以使静脉血流入心脏右侧充盈。
   2. 通过逆行冠状动脉灌注数秒，排出冠状动脉循环和升主动脉中的空气。
   3. 在血管两侧各放置一块纱布，然后移除尾侧钳和头侧钳。
   4. 用棉签轻轻按压1-2分钟。确认止血充分后，移除棉签，并用温盐水冲洗吻合口。
      注意：再灌注后1分钟内心脏应开始搏动。若受体大鼠体温低于35 °C，待体温升至36 °C时，心律将恢复正常。
7. 以迂回方式将腹腔器官复位，并使用连续的5-0聚丙烯缝线逐层关闭腹部切口。
8. 手术后，将麻醉的动物置于加热垫上的清洁区域，直至体温恢复至37°C。 
   注意：体温未达到37°C前，不得开始术后检查。实验结束前，维持2-2.5%异氟烷麻醉。
9. 监测移植供体心脏的心电图3小时。随后在深度麻醉下取出心脏，用于组织学研究。
   注意：在切除心脏前，需通过检查足底反射是否消失来确认麻醉深度。手术操作和心电图监测全过程耗时少于6小时。围手术期给予双氯芬酸（步骤4.2.3）可实现整个操作过程中的有效镇痛。镇痛方案可根据各机构的动物使用指南进行调整。

方案

已发布更正：  常温体外灌注异位心脏移植大鼠模型。已更新“实验方案”部分。

方案第4节已从以下内容更新：

4. 植入

1. 受体准备
   1. 在供体手术结束前30分钟开始受体准备工作 离体 灌注
   2. 使用与步骤2.2中所述相同的方法对受体动物进行麻醉。
   3. 将大鼠仰卧置于加热垫上，并将温度探针插入直肠，以维持体温在 37 °C。
   4. 涂抹眼用润滑剂，剃除从耻骨至剑突区域的毛发，并使用含碘消毒液和70%酒精清洁该区域。
2. 药物
   1. 皮下注射2 mL温热生理盐水，以补偿手术期间丢失的体液。皮下注射200 IU肝素。
   2. 皮下或肌内注射0.3 mL生理盐水溶解的10 mg/kg头孢唑林进行抗生素预防。
   3. 通过皮下注射给予双氯芬酸20 mg/kg以进行疼痛控制。
3. 行正中腹切口，插入拉钩以扩大腹腔。使用棉签将受体腹腔器官向左侧移动，为手术操作创造空间。
4. 用温热的湿纱布包裹腹腔器官以防止脱水。术中使用50 mL注射器间歇性地喷洒温热的生理盐水。
5. 使用10倍放大倍率的手术显微镜，以棉签进行钝性分离，游离十二指肠及近端空肠，暴露腹主动脉（Abd. A.）和下腔静脉（IVC）。为腹主动脉和下腔静脉进行吻合做准备，并按照规范系统地植入供体心脏， 图3 或已有文献记载的方法¹⁵.
   注意：不要分离腹主动脉（Abd. A.）和下腔静脉（IVC）。
   1. 假设血管吻合部位位于肾下，需准备足够长度的主动脉和下腔静脉用于钳夹。
   2. 使用棉签或锐齿镊进行钝性分离，以清除血管周围的脂肪和筋膜。
   3. 用5-0丝线结扎肠系膜分支以及主要血管的头侧和尾侧。抬起腹腔血管，用5-0丝线结扎或电凝腰部分支。注意保留睾丸动脉和静脉，避免夹闭。
   4. 使用结扎线提起血管，并将微血管夹放置于主要血管吻合部位的肠系膜分支、尾侧和头侧，以阻断吻合部位的血流。放置血管夹前务必关闭加热垫，因为过度加热可能加重肢体缺血。
   5. 使用27 G针头穿刺主动脉，并用显微剪刀将切口延长至等于或略大于供体升主动脉（Asc. A）开口的长度，约5 mm。
   6. 在下腔静脉上做一纵行切口，方法与主动脉切开相同，但切口位置较主动脉切口向尾侧偏移3 mm。
   7. 开始吻合时，将供体心脏置于受体腹部右侧，用一根间断单针（9-0聚丙烯缝线）在纵行切口的头侧角处将供体升主动脉与受体腹主动脉固定。
   8. 将心脏移至受体腹腔左侧，使用连续的9-0聚丙烯缝线将供体的升主动脉（Asc. A）与受体的腹主动脉（Abd. A）进行吻合。
   9. 用两针间断缝合线（9-0聚丙烯）将供体肺动脉固定于下腔静脉，缝合位置为纵行切口的尾侧角和头侧角。
   10. 从血管腔内侧开始进行静脉吻合的前半部分，然后从血管外侧完成剩余的后半部分。在收紧结之前，用生理盐水冲洗术区，以防止空气栓塞。
6. 脱气与松夹
   1. 完成吻合后，先移除肠系膜静脉夹，以使静脉血流入心脏右侧充盈。
   2. 通过逆行冠状动脉灌注数秒，排出冠状动脉循环和升主动脉中的空气。
   3. 在血管两侧各放置一块纱布，然后移除尾侧钳和头侧钳。
   4. 用棉签轻轻按压 1-2 分钟。确认止血充分后，移除棉签，并用温盐水冲洗吻合口。
      注意：再灌注后1分钟内心脏应开始搏动。若受体大鼠体温低于35 °C，待体温升至36 °C时，心律将恢复正常。
7. 以迂回方式将腹腔器官复位，并使用连续的5-0聚丙烯缝线逐层关闭腹部切口。

至：

4. 植入

1. 受体准备
   1. 在供体手术结束前30分钟开始受体准备工作 离体 灌注
   2. 使用与步骤2.2中所述相同的方法对受体动物进行麻醉。
   3. 将大鼠仰卧置于加热垫上，并将温度探针插入直肠，以维持体温在 37 °C。
   4. 涂抹眼用润滑剂，从会阴部到上腹部剃毛，并使用含碘消毒液和70%酒精清洁该区域。
2. 药物
   1. 皮下注射2 mL温热生理盐水，以补偿手术期间丢失的体液。皮下注射200 IU肝素。
   2. 皮下或肌内注射0.3 mL生理盐水溶解的头孢唑林（10 mg/kg）进行抗生素预防。
   3. 通过皮下注射20 mg/kg的双氯芬酸进行镇痛处理。
3. 行正中腹切口，插入拉钩以扩大腹腔。使用棉签将受体腹腔器官向左侧移动，为手术操作创造空间。
4. 用温热的湿纱布包裹腹腔器官以防止脱水。术中使用50 mL注射器间歇性地滴加温热的生理盐水。
5. 利用10倍放大倍率的手术显微镜，使用棉签钝性分离十二指肠及近端空肠，暴露腹主动脉（Abd. A.）和下腔静脉（IVC）。为腹主动脉和下腔静脉做好吻合准备，并按照既定步骤系统地植入供体心脏。 图3 或已有文献记载的方法¹⁵.
   注意：不要分离腹主动脉（Abd. A.）和下腔静脉（IVC）。
   1. 假设血管吻合口位于肾下，需准备足够长度的主动脉和下腔静脉用于钳夹。
   2. 使用棉签或锐齿镊进行钝性分离，以清除血管周围的脂肪和筋膜。
   3. 用5-0丝线结扎肠系膜分支以及主要血管的头侧和尾侧。抬起腹腔血管，用5-0丝线电凝或结扎腰部分支。注意保留睾丸动脉和静脉，避免夹闭。
   4. 使用结扎线提起血管，并将微型夹子放置在主要血管吻合部位的肠系膜分支、尾侧和头侧，以阻断吻合处的血流。放置夹子前应关闭加热垫，因为过度加热可能加重肢体缺血。在移除血管夹子后，应及时打开加热垫，以防止低体温。
   5. 使用27 G针头穿刺主动脉，并用显微剪刀将切口延长至等于或略大于供体升主动脉（Asc. A）开口的长度，约5 mm。
   6. 以与主动脉切开相同的方式在下腔静脉（IVC）上做一纵行切口，但位置较主动脉切口向尾侧偏移3 mm。
   7. 开始吻合时，将供体心脏置于受体腹部右侧，用一根间断缝线（9-0聚丙烯）在纵行切口的头侧角处将供体升主动脉与受体腹主动脉连接。
   8. 将心脏移至受体腹腔左侧，使用连续的9-0聚丙烯缝线将供体的升主动脉（Asc. A）与受体的腹主动脉（Abd. A）进行吻合。
   9. 用两针间断缝合线（9-0聚丙烯）将供体肺动脉固定于下腔静脉，缝合位置为纵行切口的尾侧和头侧角。
   10. 从血管腔内侧开始进行静脉吻合的前半部分，然后从血管外侧完成后半部分。在收紧结之前，用生理盐水冲洗术区，以防止空气栓塞。
6. 脱气与去夹
   1. 完成吻合后，先移除肠系膜静脉钳，以使静脉血流入右心。
   2. 通过逆行冠状动脉灌注数秒，排出冠状动脉循环和升主动脉中的空气。
   3. 在血管两侧各放置一块纱布，然后移除尾侧钳和头侧钳。
   4. 用棉签轻轻按压1-2分钟。确认止血充分后，移除棉签，并用温盐水冲洗吻合口。
      注意：再灌注后1分钟内心脏应开始搏动。若受体大鼠体温低于35 °C，待体温升至36 °C时，心律将恢复正常。
7. 以迂回方式将腹腔器官复位，并使用连续的5-0聚丙烯缝线逐层关闭腹部切口。
8. 手术后，将麻醉的动物置于加热垫上的清洁区域，直至体温恢复至37°C。 
   注意：体温未达到37°C前，不得开始术后检查。实验结束前，维持2-2.5%异氟烷麻醉。
9. 监测移植供体心脏的心电图3小时。随后在深度麻醉下取出心脏，用于组织学研究。
   注意：切除心脏前，需通过检查足底反射消失确认麻醉深度。手术操作及心电图监测全过程耗时少于6小时。围手术期给予双氯芬酸（步骤4.2.3）可实现整个操作期间的有效镇痛。镇痛方案可根据各机构的动物使用指南进行调整。