更正:利用高分辨率测氧法评估人类精子线粒体功能

2023年9月26日

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已发布更正:针对 利用高分辨率呼吸测定法评估人类精子线粒体功能。已更新“实验方案”和“代表性结果” 部分 。

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已发布更正:针对利用高分辨率呼吸测定法评估人类精子线粒体功能。已更新“实验方案”和“代表性结果”部分。

方案第 2.4.12 步已从以下内容更新:

最后,加入1 µL的5 mM抗霉素A(终浓度为2.5 µM)。这是一种复合体II抑制剂,用于区分线粒体耗氧与残余耗氧(非线粒体呼吸)。若分析复合体I,则改用1 µL的1 mM鱼藤酮(终浓度为0.5 µM),该物质为该复合体的抑制剂,代替抗霉素A。持续检测耗氧量,直至信号下降并趋于稳定。

至:

最后,加入1 µL的5 mM抗霉素A(终浓度为2.5 µM)。这是一种复合体III抑制剂,用于区分线粒体氧消耗与残余氧消耗(非线粒体呼吸)。若分析复合体I,则用1 µL的1 mM鱼藤酮(终浓度为0.5 µM)替代抗霉素A,该试剂为该复合体的抑制剂。持续检测氧消耗,直至信号下降并趋于稳定。

代表结果部分的图3已从以下内容更新:

氧浓度分析;显示 O₂ 水平随时间变化及皂苷作用的图表;数据图表。
图 3:确定用于人精子细胞透化的最佳皂苷浓度。 在含有谷氨酸、苹果酸和二磷酸腺苷的 MRM 培养基中,于 37 °C 下测定呼吸速率。(A) 典型呼吸曲线。蓝色线表示 O2 浓度,红线表示单位体积的 O2 流量相关值。(B) 线粒体呼吸速率均值 ± 标准误差,n = 4。红色箭头表示最佳浓度。缩写:dig = digitonin。 请点击此处查看该图的放大版本。

至:

氧气消耗分析;图表显示O₂浓度和通量(A)以及速率与二氢digitonin的关系(B)
图3:确定用于人精子细胞透化处理的最优digitonin浓度。 呼吸速率在MRM培养基中,以谷氨酸、苹果酸和二磷酸腺苷为底物,在37 °C下测定。(A)代表性呼吸轨迹图。蓝色线表示O2浓度,红线表示单位体积的O2通量。(B)线粒体呼吸速率的平均值±标准误,n = 4。红色箭头表示最优浓度。缩写:dig = digitonin。 请点击此处查看本图的放大版本。

方案

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

已发布更正:针对利用高分辨率呼吸测定法评估人类精子线粒体功能。已更新“实验方案”和“代表性结果”部分。

方案第 2.4.12 步已从以下内容更新:

最后,加入1 µL的5 mM抗霉素A(终浓度为2.5 µM)。这是一种复合体II抑制剂,用于区分线粒体耗氧与残余耗氧(非线粒体呼吸)。若分析复合体I,则改用1 µL的1 mM鱼藤酮(终浓度为0.5 µM),该物质为该复合体的抑制剂,代替抗霉素A。持续检测耗氧量,直至信号下降并趋于稳定。

至:

最后,加入1 µL的5 mM抗霉素A(终浓度为2.5 µM)。这是一种复合体III抑制剂,用于区分线粒体耗氧与残余耗氧(非线粒体呼吸)。若分析复合体I,则用1 µL的1 mM鱼藤酮(终浓度为0.5 µM)替代抗霉素A,该物质为该复合体的抑制剂。持续检测耗氧量,直至信号下降并稳定。

代表结果部分的图3已从以下内容更新:

氧浓度分析;显示 O₂ 水平随时间变化及皂苷作用的图表;数据图表。
图 3:确定用于人精子细胞透化的皂苷最佳浓度。 在含有谷氨酸、苹果酸和二磷酸腺苷的 MRM 培养基中,于 37 °C 下测定呼吸速率。(A)代表性呼吸曲线。蓝色线表示 O2 浓度,红线表示单位体积的 O2 流速。(B)线粒体呼吸速率的平均值 ± 标准误差,n = 4。红色箭头表示最佳浓度。缩写:dig = digitonin。请点击此处查看该图的放大版本。

至:

氧气消耗分析;图表显示 O₂ 浓度和通量(A)以及呼吸速率与皂苷浓度的关系(B)
图 3:确定用于人精子细胞透化的最佳皂苷浓度。 在含有谷氨酸、苹果酸和二磷酸腺苷的 MRM 培养基中,于 37 °C 下测定呼吸速率。(A)代表性呼吸轨迹。蓝色线表示 O2 浓度,红线表示单位体积的 O2 流量。(B)线粒体呼吸速率的平均值 ± 标准误差,n = 4。红色箭头表示最佳浓度。缩写:dig = digitonin。请点击此处查看该图的放大版本。

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