经支气管肺冷冻活检(TBLC)用于诊断间质性肺疾病和外周肺部病变,是一种诊断率高且安全的诊疗方法。本文介绍了一种使用可弯曲支气管镜针对上述不同适应证进行TBLC的分步操作方法,可为初次开展TBLC的支气管镜医师提供参考。
经支气管肺冷冻活检(TBLC)用于诊断间质性肺疾病和外周肺部病变,是一种诊断率高且安全的诊疗方法。本文介绍了一种使用可弯曲支气管镜针对上述不同适应证进行TBLC的分步操作方法,可为初次开展TBLC的支气管镜医师提供参考。
经支气管肺冷冻活检(TBLC)是一种侵入性操作,近十年来逐渐被用作视频辅助胸腔镜肺活检(SLB)的替代方法,用于间质性肺疾病(ILDs)的诊断。TBLC的主要适应证是在多学科团队讨论无法确定特定ILD亚型时,进一步对其进行亚分类。尽管SLB被认为是建立组织学诊断的金标准,但由于TBLC与SLB具有相当的诊断率,且在并发症(包括死亡率)方面优于SLB,近年来已逐渐被建议作为未分类ILD患者首选的组织学诊断方法。近年来,针对外周肺部病变,采用径向支气管内超声(R-EBUS)和电磁导航支气管镜(ENB)引导下的TBLC也被证实为安全的操作,其诊断率可能优于钳取活检。然而,TBLC的诊断效能仍依赖于操作实施的质量。本文旨在系统描述使用可弯曲支气管镜进行TBLC的分步操作流程,涵盖上述不同适应证,以期为初次开展TBLC的支气管镜医师提供参考。
间质性肺疾病(ILDs)是一组影响肺间质中一个或多个肺实质成分的急性和慢性肺部疾病,这些成分包括支气管、肺泡、结缔组织以及血管和淋巴管。尽管这类疾病较为罕见,但超过200种不同的ILD亚型构成了一个具有异质性的疾病类别,其临床表现、影像学特征以及细胞-组织学特征各不相同。ILDs通常表现为炎症、纤维化或两者兼有,这些是患者常见症状的根本原因,如干咳、活动后呼吸困难和疲劳1,2。
间质性肺疾病(ILD)可分为特发性间质性肺炎(IIP)、已知病因的间质性肺炎(例如结缔组织病相关间质性肺病、药物诱导的间质性肺病以及职业相关尘肺)、肉芽肿性间质性病变(例如结节病和过敏性肺炎)以及罕见类型的间质性肺病(例如多发性囊性肺疾病和嗜酸性粒细胞性肺炎)1。此类分类及进一步的诊断分型对于确定最佳治疗方案和随访策略至关重要,并有助于预后判断。然而,由于诊断过程可能具有挑战性,建议通过多学科团队讨论(MDD)整合并解读现有的临床资料(包括病史、体质因素及潜在暴露史)以及辅助检查信息,如胸部高分辨率计算机断层扫描(HRCT)、肺功能生理学检测和自身免疫学检查结果3,4,5。若无法通过MDD获得明确诊断6,7,则建议采用经支气管肺冷冻活检(TBLC)获取组织学样本,以提高明确ILD亚型诊断的可能性8,9。在经过严格筛选的患者中,TBLC被认为是一种安全性较高的侵入性操作,其诊断准确性接近于目前仍被视为ILD组织病理学诊断金标准的电视辅助胸腔镜肺活检(SLB)10,11,12,13,14。TBLC操作需按照系统化支气管镜流程进行,使用专用冷冻探针获取组织样本,并建议在透视引导下实施。建议在具备MDD机制的三级ILD诊疗中心开展TBLC操作,由接受过专门培训、熟悉TBLC相关并发症处理的介入性肺科医师执行,且该医师应在具有TBLC专业经验的中心完成过相关培训9,10,11,15,16,17。
最近,经支气管肺活检(TBLC)作为一种可与径向支气管内超声(R-EBUS)联合应用的技术,在间质性肺病(ILD)诊断中受到关注18,19。此外,TBLC 已被联合 R-EBUS 和电磁导航支气管镜(ENB)用于周围型肺病变(PPL)的诊断,相较于传统的经支气管钳活检,可提高诊断率20,21。然而,这种用于 PPL 诊断的相对较新的方法尚未被确立为标准操作流程,因此在该特定领域仍需进一步积累证据。本报告旨在描述在临床环境中使用可弯曲支气管镜进行 TBLC 的逐步操作方法,适用于上述提及的临床指征。
作者来自两家丹麦经支气管肺活检(TBLC)中心(欧登塞大学医院和奥胡斯大学医院),这两家中心均依据《赫尔辛基宣言》的原则开展研究。由于本研究为观察性研究,无需伦理审批。所有纳入研究的患者均签署了书面知情同意书。需要强调的是,所述TBLC操作的逐步方法适用于使用可弯曲支气管镜的情况,其依据为国际指南、专家声明、前沿综述以及两家TBLC中心经验的综合结果9,10,11,15,16,17,22,23,24,25。
1. 预先考虑TBLC相关事项
| 相对禁忌证 | 绝对禁忌证 |
| 用力肺活量(FVC)< 预测值的50% | 血小板减少症 < 50 × 109/L 或国际标准化比值(INR)> 1.5 |
| 肺一氧化碳弥散量(DLCO)< 预测值的35% | 未纠正的出血倾向 |
| 收缩期肺动脉压 > 50 mmHg(例如基于超声心动图的估算) | 因肺功能受损患者发生并发症的风险增加,导致进行性临床恶化 |
| 体重指数 > 35 kg/m2 |
表1:经支气管肺冷冻活检(TBLC)的禁忌证。 TBLC操作的相对禁忌证和绝对禁忌证。缩写:TBLC = 经支气管肺冷冻活检。
2. PreTBLC 的制备

图1:冰球作为可用TBLC设备的指示标志。 脚踏开关可启动气罐中CO2气体的扩散并引发冷冻。该功能可通过在水中测试验证:若冷冻探针工作正常,其尖端将形成一个冰球。缩写:TBLC = 经支气管肺冷冻活检。 请点击此处查看该图的放大版本。
3. TBLC 电导

图 2:透视成像。在冷冻前,使用透视成像以确保冷冻探针的正确放置。 冷冻探针的尖端呈现为鼓槌头部的形状(黑色箭头)。 请点击此处查看该图的放大版本。

图3:气管插管。双腔气管插管(绿色箭头)可允许支气管镜进入气道,同时通过侧管引入球囊导管(红色箭头)以控制出血。请点击此处查看该图的放大版本。

图4:球囊导管的扩张。 在完成经支气管肺冷冻活检后,扩张球囊导管以确保阻塞,并防止球囊远端可能的出血扩散至肺叶其他部位。请点击此处查看该图的放大版本。

图 5:活检样本。 经支气管肺冷冻活检样本在固定于甲醛之前需置于冷生理盐水中。 请点击此处查看该图的放大版本。
4. TBLC 后续操作步骤

图6:轻微出血。 在进行经支气管肺冷冻活检后若观察到出血,例如本例中的轻微出血,应将球囊导管保持充气数分钟,然后再尝试放气。请点击此处查看该图的放大版本。
5. TBLC 联合 R-EBUS 和 ENB 用于 PPL 诊断
根据来自两个TBLC中心的作者观察,采用可弯曲支气管镜进行TBLC的逐步操作流程,使得经过先前多学科讨论(MDD)后仍未明确间质性肺疾病(ILD)亚型诊断的精选丹麦患者能够成功获取组织学样本。这两个队列的详细观察结果已在近期发表的两项研究中报告23,25,其中第一作者所在中心的数据总结于表2中。
| 活检部位 | |
| 中叶 (ML),n (%) | 2 (14.2) |
| 右下叶 (RLL),n (%) | 125 (88.7) |
| 左下叶 (LLL),n (%) | 15 (10.6) |
| 出血 | 141 (100.0) |
| 轻度,n (%) | 118 (83.7) |
| 中度,n (%) | 23 (16.3) |
| 重度,n (%) | 0 (0.0) |
| 气胸,n (%) | 21 (14.9) |
| 需胸腔引流,n (%) | 14 (9.9) |
| 30天死亡率,n (%) | 2 (1.4) |
| 组织学诊断,n (%) | 101 (75.2) |
| 基于多学科讨论的诊断,n (%) | 124 (87.9) |
表2: 来自丹麦一家经支气管冷冻肺活检中心的观察结果。 总计141例,部分患者因在多个肺叶接受了经支气管冷冻肺活检。数据以数字(n 和 N)及百分比(%)表示。观察结果摘自 Davidsen 等人23,并符合知识共享许可协议(https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/)。缩写:LLL = 左下叶;ML = 中叶;RLL = 右下叶;OUH = 奥登塞大学医院;TBLC = 经支气管冷冻肺活检;MDD = 多学科团队讨论。
我们采用全身麻醉和肌肉松弛来减轻患者对操作的不耐受性(例如咳嗽),更重要的是,这有助于介入性支气管镜医师更顺利地进行经支气管肺活检(TBLC),并允许插入双腔气管插管。通过回顾高分辨率CT(HRCT),我们能够可靠地了解间质性肺病(ILD)的影像学表现,并确定适宜进行TBLC的部位,以期从TBLC中获得最高的诊断率。在两项TBLC队列研究23,25中,约88.0–88.7%的病例主要在右下叶进行活检。借助透视引导,我们在放置探头时特别注意其与胸膜及肺血管的接近程度,以降低操作相关并发症的风险。
此外,使用 Fogarty 球囊可帮助我们管理和控制活检部位可能发生的出血,确保出血不会扩散至其他体腔。在欧登塞(Odense)和奥胡斯(Aarhus)队列中,中度出血(定义为需要使用冷生理盐水和/或 Fogarty 球囊超过 2 分钟和/或需追加使用氨甲环酸)的发生率分别为 16.3% 和 21.0%。作为常规操作,我们至少进行四次活检,从而基于欧登塞和奥胡斯队列中 87.9% 和 82.0% 的 MDD(最大诊断深度)实现了可接受的高诊断率。TBLC 术后采用 FLUS 检查以识别潜在的气胸(PTX),在欧登塞队列的 19 例患者中检出 4 例(21%),在奥胡斯队列的 70 例患者中检出 19 例(27%)24。欧登塞和奥胡斯队列中需置管引流的气胸发生率分别为 14.9% 和 20.0%。欧登塞和奥胡斯队列的 90 天死亡率分别为 1.5% 和 0.4%。
按照第5节方案中所述步骤,在不取出支气管镜或重复导航过程的情况下,从PPL患者的靶病变部位获取了组织样本。使用1.1 mm冷冻探针采集的活检样本小于间质性肺疾病(ILD)诊断所需的活检样本。然而,较小的活检样本使得在经扩展工作通道回撤探针及活检组织的同时,能够保持支气管镜的位置不变。由于活检体积较小,出血风险预期较低,且在支气管镜仍位于支气管腔(BS)内时,更易于安全地处理出血情况。该操作流程使我们能够在无需全身麻醉(GA)、气管插管(ETT)或使用支气管内阻塞器的情况下完成经支气管肺活检(TBLC)。
无论TBLC的适应证如何,其诊断性能均依赖于操作实施的质量以及患者选择标准。这凸显了应实施正式且经认证的培训项目,以获得执行标准化TBLC操作所需能力的建议。尽管目前尚无官方的TBLC教育培训项目可供获取,但近期欧洲呼吸学会发布的关于间质性肺病(ILD)TBLC的指南建议,实施TBLC的介入性肺科医师应接受正式培训,以提高诊断率并降低并发症风险,同时具备处理相关并发症的能力,例如出血和医源性气胸9。目前,由于缺乏证据,此类培训项目尚未被明确定义或开发。然而,多位TBLC领域专家一致建议,该操作应在具备间质性肺病知识、掌握TBLC技术细节(包括并发症管理)、并可获得多学科讨论(MDD)及胸外科专业支持的专科中心进行8,11,17,26,27。
该操作假定需考虑某些术前标准,以确保以最安全的方式进行组织学取样,并降低与操作相关的潜在并发症风险17。然而,不同医疗中心对经支气管肺活检(TBLC)的选择标准可能略有差异(例如,一氧化碳弥散量(DLCO)占预计值的35%至40%),导致某些队列对轻微并发症的易感性高于其他队列23,25。此外,在比较不同研究队列时,与操作相关的变量选择(如麻醉方式、探头尺寸和冷冻时间)的差异可能影响对并发症和死亡率相关观察结果的解释。因此,亟需实现操作的标准化。
患者的肺部解剖结构存在差异,在支气管和段支气管弯曲较明显的患者中,可能难以根据术前选定的活检部位准确放置探头。在此类情况下,可能需要多次尝试放置探头,有时不得不选择其他活检部位。这一众所周知的问题源于探头相对较为僵硬。相反,尽管球囊导管配有可拆卸的导丝,但其本身较为柔软,操控和导航较为困难。此时,可单独使用支气管镜,或使冷冻探头从支气管镜前端略微伸出,用以引导或推动球囊进入选定的支气管段(BS)。在困难病例中,有时可使用活检钳轻柔地引导支气管阻滞器进入正确的支气管段,或在插入前轻柔弯曲导管,尤其是在目标为上叶时。推进冷冻探头时必须格外小心,因为若将探头较硬的尖端过度向远端推进,存在发生气胸(PTX)的风险。若推进过程中遇到阻力,应立即停止操作,建议在直接X线透视引导下引入冷冻探头,以避免穿透脏层胸膜。然而,也必须高度重视出血的预防,尤其因为探头尺寸增大以及活检次数增多均会增加气胸的发生风险28。
尽管外科肺活检(SLB)被认为是间质性肺病(ILD)诊断的金标准,但近期研究已提供一致证据,表明经支气管肺活检(TBLC)是一种安全且具有成本效益的门诊干预措施,在出血和气胸(PTX)等并发症方面风险较低,且在ILD评估中,TBLC与SLB之间的诊断一致性较高13,27,29,30,31。这一结论也在一项系统综述中得到证实,并促使在近期更新的特发性肺纤维化(IPF)临床指南中推荐TBLC作为SLB的替代性ILD诊断方法27,32。此外,在术后30天死亡率方面,TBLC优于SLB(TBLC为0.6%,SLB为1.7%)8。因此,在具备TBLC技术专长和ILD多学科讨论会(MDD)支持的三级ILD中心,TBLC正越来越多地被视为对经过严格筛选的无法分类ILD患者的首选组织学取样方法8,12,13,23,25,31,33。这些适应证也与我们两个TBLC中心的实践经验相符,我们在并发症、死亡率和诊断效能方面的观察结果与近期一项纳入43项研究的系统综述和荟萃分析结果相一致8。为进一步支持TBLC的应用,一些研究提出将径向支气管内超声(R-EBUS)引导下的TBLC作为额外工具,特别用于针对疑似ILD患者中磨玻璃影病变的取样19。尽管在ILD诊断中联合使用这两种技术可能比单独使用TBLC更耗时,但观察结果表明,同时使用R-EBUS不仅能显著降低出血风险,还可作为支气管镜医师获取代表性活检标本的有力辅助手段,其诊断准确率据报道可达92.5%18,19,34。尽管将R-EBUS联合TBLC的应用前景良好,但仍需在比较性临床试验中进一步验证34。
由于人口结构的变化,间质性肺病(ILD)的发病率已呈现上升趋势,这要求在诊断过程中扩大经支气管肺活检(TBLC)的可及性并增加其使用需求35,但这也进一步削弱了对TBLC适应证的正确把握以及对TBLC操作流程及其系统实施所需知识的掌握9,17,26。在一项初步研究中,Kronborg-White等人此前已证实,将电磁导航支气管镜(ENB)与TBLC联合用于ILD诊断是可行的;然而,目前尚缺乏确凿证据表明该联合策略可提高诊断率或减少后续侵入性检查的需求36。共聚焦激光显微内镜(CLE)是一种高分辨率成像技术,可通过支气管镜应用,用于可视化符合纤维化性ILD特征的纤维化区域,未来可能取代 fluoroscopy。一项研究得出结论认为,CLE在TBLC过程中可作为fluoroscopy的一种有前景的实时替代方案,但这一结论尚未在前瞻性研究中进一步验证,特别是在提高活检质量及降低并发症发生率方面的效果仍需深入探讨37。此外,在TBLC基础上结合组织转录组RNA测序进行免疫组织化学和基因组分类器(GC)检测,已显示出良好的应用前景,能够以高特异性区分组织学上的普通型间质性肺炎(UIP)与非UIP类型38,39,40。GC在UIP表征与预测方面的可用性似乎有助于提高对进展性纤维化性ILD(如特发性肺纤维化IPF)的诊断信心39,41。因此,未来有望进一步发展此类新型组织学技术与检测手段,以提升ILD的诊断率42,43。
针对PPL的定位,R-EBUS和ENB引导下的TBLC最近被描述为一种安全的诊疗方法。尽管相关文献较少,但已有研究表明,与单独使用活检钳相比,使用TBLC可提高诊断率20,21,44。目前关于安全性的数据仍然有限,但一项采用本文所述方法的研究报道未发生气胸(PTX),仅出现轻微出血且无需干预治疗20。总体而言,由于证据尚不充分,该领域仍处于起步阶段,有待进一步深入研究。
总之,对于经过严格筛选且基于先前临床和辅助检查信息仍无法获得明确诊断的患者,经支气管肺活检(TBLC)正逐渐被建议作为间质性肺病(ILD)亚型诊断的首选组织学方法。这一建议主要基于TBLC较高的诊断率以及良好的安全性,其并发症发生率和死亡率明显低于外科肺活检(SLB)。该操作应由经过认证并具备TBLC操作经验的介入性肺科医生实施。然而截至目前,尚未建立标准化的TBLC认证培训项目。关于使用TBLC对肺周围性病变(PPL)进行取样的证据仍十分有限。但目前已发表的少数研究表明,与传统活检钳相比,TBLC具有更高的诊断率且安全性良好。本中心有限且尚未发表的经验提示,在无全身麻醉条件的支气管镜检查环境中,TBLC具有可行性,并可与现有的导航技术(如电磁导航支气管镜ENB和径向超声支气管镜R-EBUS)联合应用以定位PPL。然而,该技术仍处于探索阶段,亟需更多关于其诊断率和安全性的证据支持。
作者声明无利益冲突。
作者谨此感谢丹麦欧登塞大学医院支气管镜病房胸外科和麻醉科的工作人员,感谢他们在准备本文插图过程中提供的帮助。
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| "导管“烟囱”装置" | |||
| CO2 气瓶适配器 | |||
| CO2 气罐 | Erbe | ||
| 内镜柱 | |||
| 气管插管,7.5–8.5 mm | Erbe | ||
| Erbecryo 脚踏开关 | Erbe | ||
| Erbecryo2 工作站 | Erbe | ||
| 可弯曲支气管镜 | |||
| 可弯曲气体软管 | Mediland | ||
| 一次性可弯曲冷冻探针,外径 1.1 mm | Erbe | ||
| 一次性可弯曲冷冻探针,外径 1.7 mm | Erbe | ||
| 一次性可弯曲冷冻探针,外径 2.4 mm | |||
| 荧光透视机 | |||
| Fogarty 球囊导管 | |||
| 密闭系统中的福尔马林玻璃瓶 | |||
| 氯化钠溶液(含低温氯化钠溶液) | |||
| 用于固定 Fogarty 球囊的止血钳 | |||
| 无菌一次性杯 | |||
| 无菌吸痰管 | |||
| 无菌镊子 | |||
| 用于 Fogarty 球囊充气/放气的注射器 | |||
| 荧光透视机用台袋 | |||
| Fogarty 球囊注射器用三通阀 | |||
| 气管吸痰装置 | |||
| 超声设备 | Erbe | ||
| 活检通道用阀 | |||
| 吸气管路用阀 |
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