方法文章

Rhodiola crenulata 的野外采集与实验室常规鉴定

DOI:

10.3791/65947

2023年10月27日

* These authors contributed equally

本文内容

摘要

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本文介绍了红景天(Rhodiola Crenulata)的生境分布、植物形态、药用特性、显微特征及薄层色谱鉴别方法。

摘要

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药材鉴定是保障用药安全的前提和基础。大多数科研人员必然倾向于选择简便、快速、有效且成本低廉的中药材鉴定方法。Rhodiola crenulata 是一种生长在高海拔地区的传统藏药,主要分布在中国西藏、云南和四川地区。Rhodiola crenulata 具有多种生物活性,如抗炎、抗缺氧和抗氧化作用,具有广阔的发展潜力。随着市场需求的增加和资源储量的迅速减少,大量混淆品给Rhodiola crenulata的鉴定带来了困扰。因此,本实验方案介绍了一种结合常规实验室检测的野外Rhodiola crenulata鉴定标准流程。通过生境特征、显微结构与薄层色谱相结合的方法,无疑能够快速、高效且经济地鉴定Rhodiola crenulata,从而促进藏药的可持续发展以及药材的质量控制。

引言

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中药在中国具有悠久的历史和丰富的应用经验,最早在《神农本草经》中进行了系统记载1。青蒿素的发现及其在疟疾治疗中的应用,推动了中药发展进入新阶段1。利用现代科学技术揭示中药的确切作用机制,提高了中药的利用率和需求量,为其开拓了新的国际市场2,3,4。然而,这也引发了一系列负面影响。非专业人士对中药特性的认识模糊,导致中药的使用面临巨大的安全风险5

红景天,一种属于 红景天 物种主要分布于中国西藏、云南西北部和四川西部。图1)6,7. 红景天 包含红景天苷、酪醇、没食子酸及其他化合物,通过其功能用于治疗缺氧相关疾病 "益气活血,通脉平喘"8,9,

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方案

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Rhodiola crenulata 采自中国四川省甘孜藏族自治州甘孜县卓达雪山(北纬31.44570°,东经99.96086°,海拔4892米)。该植物由成都中医药大学民族医药学院张毅教授鉴定为正品。

1. 样品采集 红景天

  1. 拍摄Rhodiola crenulata的生境图。
  2. 拍摄Rhodiola crenulata的全株、叶片、花萼和根茎。
  3. 使用铁锹清理Rhodiola crenulata周围1米范围内的杂草和碎石,以确保后续采挖顺利进行。
  4. 用锄头挖掘土壤,直至整个根际区域显露,然后采集主根。
    注意:药用部位所用的Rhodiola crenulata根及根茎应在秋季采集,此时花茎已枯萎。

2. 特征鉴定

  1. 用肉眼观察Rhodiola crenulata的外观特征:主根和根茎呈短圆柱形,表面为棕色,具膜质黄色表皮并带有粉红色纹理,断面呈橙红色或酒红色。
  2. 通过气味鉴别:靠近鼻部闻时,具有芳香气味。
  3. 通过味道鉴别:取少量根放入嘴中,先含化后咀嚼,味微苦,随后转甜....

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结果

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本实验方案描述了在野外识别和采集Rhodiola crenulata的方法。Rhodiola crenulata通常生长于高海拔地区的高山流石带、冲沟坡地及岩石缝隙中。Rhodiola crenulata的生境、全株、花和叶片见图2Rhodiola crenulata具有红棕色的根茎(图3A),其药材粉末的代表性图像见图3B。根据上述实验方案,显微观察结果可归纳如下:1)木栓细胞呈淡黄棕色或无色,细胞较大,多角形或长多角形,细胞壁略增厚(图3C);2)淀粉粒为单粒或复粒,脐点呈人字形或裂缝状(图3D);3)导管主要为螺纹导管,排列紧密(图3E);4)木质部薄壁细胞无色,椭圆形,成片分布,内含草酸钙砂晶(

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讨论

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有90多种 红景天 世界上的植物,其中超过60%的物种分布在中国,常见的包括 红景天,玫瑰红景天,无鳞红景天Rhodiola algida17. 红景天 收录于《中华人民共和国药典》(2020年版)一部,是一种生长在高海拔地区的传统藏药。市场对该药材的需求 红景天 每年都在增加,因此确保正确使用该来源是保障安全使用的关键。特别是从田间采集到简单快速的实验室常规鉴定的标准化流程不容忽视。已有报道称,高效液相色谱、质谱以及简单序列重复间区分析可准确鉴定 Rhodiola crenulata 来自其他 红景天 物种,这一过程耗时、复杂且成本高昂18,19,20同时,我们建立了多维度感官识别评价方法(电子鼻和颜色分析)以及高效液相色谱法,以进行区分 Rhodiola cren.......

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披露

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作者无任何利益冲突需要披露。

致谢

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本工作得到国家自然科学基金(81973569、82274207 和 82104533)、成都中医药大学杏林学者科研提升项目(XKTD2022013)以及宁夏回族自治区重点研发计划(2023BEG02012)的资助。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
0.22 μm 微孔滤膜MilliporeSLGP033RB
自动采样机CAMAGATS 4
水合氯醛福建文莱科技有限公司ST1002
色谱的 样本 瓶子浙江艾力特生命科学仪器有限公司C0000008
锥形瓶四川硕博有限公司1121
盖玻片Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd10211818c
解剖针上海冰禹流体技术有限公司BY-5026
电子天平SHIMADZUATX124
乙酸乙酯成都科龙化工试剂有限公司2022120901
甲酸成都科龙化工试剂有限公司2021110801
没食子酸成都赫柏匹瑞有限公司M-017
甘油国药集团化学试剂有限公司10010618
高速  破碎机北京中兴伟业仪器有限公司FW-100
甲醇成都科龙化工试剂公司20230108
显微镜重庆奥普瑞仪器有限公司  有限公司B203
显微镜载玻片Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd7105P-G
烘箱上海跃进医疗器械有限公司DHG-8145
药典筛杭州兴润筛网厂572423281330
移液器常德碧凯美生物科技有限公司120302008
红景天苷成都赫柏普瑞生物有限公司H-040
饱和水箱 Yancheng Liegu Technology Co., Ltd10*20 P-1
硅胶板烟台江友硅胶开发  有限公司HSG20211227
三氯甲烷成都科龙化工试剂公司有限公司20221013-1
镊子 常德碧凯曼生物科技有限公司130302027
酪醇成都Herbpurify有限公司L-042
超声设备宁波新艺超声波设备有限公司SB-8200DTS
移液管常德碧凯曼生物科技有限公司120301006

参考文献

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  1. Zhang, J., et al. Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health. Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964(2021).
  2. Yin, R., et al.

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