已发布更正： 清醒大鼠锁骨下静脉采血。讨论部分已 更新。
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本研究中，采血失败主要发生在第4天，可能与反复穿刺导致静脉损伤有关。首次采血时，针头刺入血管可明显感觉到穿透感；随着采血次数增加，这种感觉逐渐减弱，导致采血时间延长，失败率上升。因此，每次采血后必须进行局部压迫止血，以促进血管修复并防止局部血肿形成。同时建议尝试使用更细的针头（如胰岛素针头）进行采血。若一侧穿刺失败，应立即对穿刺部位施加压迫，并让大鼠休息数分钟后，再换至对侧进行采血。对于药代动力学实验所需的密集采血，最好交替从左右两侧锁骨下静脉采集血液。在确实无法实施的情况下，可辅以其他采血方法。
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在本研究中，采血失败主要发生在第4天，可能与反复穿刺造成的静脉损伤有关。反复穿刺可导致血管壁损伤并引发炎症反应，使血管壁增厚、硬化，甚至引起血管狭窄。若穿刺后止血不充分，外渗的血液会进一步导致组织水肿和炎症，继而形成瘢痕组织。这些瘢痕组织质地坚韧，难以穿透，还可能牵拉导致血管移位，从而使血管更难定位和穿刺。在本研究中，采血使用的是26G注射器（0.45 mm），虽然相对于人类静脉较细，但仍会对大鼠静脉造成明显损伤。这一点可通过首次采血时针头穿过血管壁时明显的穿透感得到印证，随着采血次数增加，这种穿透感逐渐减弱，采血时间延长，失败率升高。因此，我们建议使用更细的胰岛素针头进行采血，采血后应施加充分压力以防止血肿形成，并采用交替采血方式，以利于静脉充分修复。根据我们的经验，经过良好培训的技术人员可在24小时内使用26G针头对同一只大鼠双侧锁骨下静脉交替采血8–10次，每次采血间隔平均为2–3小时。然而，大鼠可耐受的最大采血次数、恢复周期及采血频率可能受到针头规格、不同实验所需的采血间隔以及操作人员熟练程度的影响，这些因素有待未来研究进一步探讨。对于药代动力学实验所需的密集采血，最好交替采集左右侧锁骨下静脉血液。在确实无法实施的情况下，可辅以其他采血方法。