已发布更正: 小鼠左肺门夹闭型肺缺血再灌注损伤模型。已更新“实验方案”和“代表性结果”部分。
方案第1节已从以下内容更新:
1. 麻醉与插管
- 选择一只体重至少为 25 g 的小鼠。由于声带之间的开口较大,这将有助于更顺利地进行气管插管。
- 通过腹腔注射给予小鼠氯胺酮(剂量为 100 mg/kg 体重)和赛拉嗪(剂量为 10 mg/kg 体重)的混合物。该混合物应装入带有½英寸 29G 针头的½ cc 注射器中。等待约 5 分钟使氯胺酮起效——小鼠应无自发运动,且对脚趾夹捏无反应,表明麻醉深度足够。
- 在手术前皮下注射布托啡诺(剂量为 0.05 mg/kg 体重),以提供额外的镇痛作用。
- 在双眼上涂抹非药物性眼膏,以防止手术期间角膜干燥。
- 使用剃毛器剃除小鼠左侧胸部和背部的毛发(见图 1A),若计划进行剖腹手术,则剃毛区域应延伸至腹部(见步骤 5.3)。
- 小鼠麻醉后,在显微镜下进行插管及后续操作,并将其置于约 37 °C 的加热垫上(以维持正常体温)。
- 用无创钳夹住小鼠舌尖,将其垂直悬吊,背部朝向术者。小鼠臀部可置于加热垫上(见图 1B 和 补充图 1A)。
- 牵拉胡须以暴露口咽部。使用弯头蚊式钳的钳齿压下舌头,并沿前后方向撑开口咽腔。当口咽部充分打开后,应能通过显微镜物镜清晰看到声带。麻醉状态下的小鼠声带仍应保持自主开闭运动。
- 将自制引导器(见补充图 1B)插入一根 1 英寸 20G 血管套管(作为气管导管,ETT),引导器末端应带有弯曲。用非优势手使用弯头蚊式钳保持口咽部开放(见图 1C)。在清晰看到声带的前提下,用优势手引导引导器尖端,随后将 ETT 经声带之间送入气管。
注意:必须观察到 ETT 穿过声带,以避免误入食管。插管过程中应避免损伤声带(即插管尝试次数应限制在 5 次以内,若遇到阻力则不应继续推进 ETT)。
- 插入 ETT 后,撤出引导器,并将 ETT 连接至小型动物呼吸机。观察胸廓是否对称起伏,以确认气管插管位置正确。呼吸机参数设置为:呼吸频率 100–105 次/分钟,吸入氧浓度 100%。潮气量为 0.35 mL,呼气末正压为 1 cm H2O。
注意:应确保是胸部而非腹部起伏,因为误入食管若未及时纠正将导致死亡。
- 确认位置正确后,使用一条 5 cm 长、1 英寸宽的丝质胶带绕过小鼠鼻部固定 ETT,确保胶带与 ETT 及鼻部充分贴合,防止 ETT 滑出口腔(见图 1E)。
- 为在整个手术过程中维持足够的麻醉深度,应在氧气气路中持续给予 1%–1.5% 的异氟烷。
至:
1. 麻醉与插管
- 选择一只体重至少为 25 g 的小鼠。由于声带之间的开口较大,这将有助于更顺利地进行气管插管。
- 通过腹腔注射给予小鼠氯胺酮(剂量为 100 mg/kg 体重)和赛拉嗪(剂量为 10 mg/kg 体重)的混合物。该混合物应装入带有½英寸 29G 针头的½ cc 注射器中。等待约 5 分钟使氯胺酮起效——小鼠应无自发运动,且对脚趾夹捏无反应,以确认麻醉充分。
- 在手术前皮下注射布托啡诺(剂量为 0.05 mg/kg 体重),以提供额外的镇痛作用。
- 在双眼上涂抹非药物性眼膏,以防止手术期间角膜干燥。
- 使用剪毛器剃除小鼠左侧胸部和背部的毛发(见图1A);若计划进行剖腹手术,则剃毛范围应延伸至腹部(见步骤 5.3)。
- 待小鼠麻醉后,在显微镜下、置于约 37 °C 的加热垫上进行气管插管,并继续后续操作(以维持小鼠正常体温)。
- 在清晰观察到声带后,将自制引导器(见补充图1)插入一根1英寸 20G 血管套管中(该套管用作气管导管,ETT),引导器末端带有一定的弯曲度。先引导引导器尖端,随后引导 ETT 穿过声门裂并进入气管。
注意:必须观察到 ETT 穿过声带,以避免误插入食管。插管过程中应避免损伤声带(即插管尝试次数应限制在5次以内,若遇到阻力则不应继续推进 ETT)。
- 插入 ETT 后,撤出引导器,并将 ETT 连接到小型动物呼吸机。观察胸部是否对称起伏,以确认气管插管位置正确。呼吸机参数设置为:呼吸频率 100–105 次/分钟,吸入氧浓度 100%。潮气量为 0.35 mL,呼气末正压为 1 cm H2O。
注意:应确保是胸部而非腹部起伏,因为误将导管插入食管若未及时纠正,将导致动物死亡。
- 确认导管位置正确后,使用一条 5 cm 长、1 英寸宽的丝质胶带围绕小鼠鼻部固定 ETT,确保胶带与 ETT 及鼻部充分贴合,防止 ETT 滑出口腔(见图1B-C)。
- 为在整个手术过程中维持足够的麻醉深度,应在氧气气路中持续给予 1%–1.5% 的异氟烷。
代表性结果中的图1已更新为:

图1:小鼠插管。(A)左侧胸部和腹部脱毛的小鼠。(B)连接至呼吸机管路的气管内插管。(C)确认插管成功后,用胶带将插管沿周向固定于小鼠鼻部。(D)已插管的小鼠,其流入和流出管路分别连接至小型动物呼吸机。请点击此处查看该图的放大版本。
代表性结果中的补充图1已从以下内容更新:
补充图 1: (A)插管用的夹具装置。(B)气管插管导引器。请点击此处下载该文件。
至:
补充图1:气管插管用导引器。请点击此处下载该文件。