本方案结合近红外光谱技术(NIRS),用于评估心肺运动测试期间前额叶皮层、呼吸肌(m.Intercostales)和运动肌(m.Vastus Lateralis)部位的局部血液学及氧合状态变化,从而识别影响运动表现的中枢性和外周性限制因素。
方法文章
* These authors contributed equally
本方案结合近红外光谱技术(NIRS),用于评估心肺运动测试期间前额叶皮层、呼吸肌(m.Intercostales)和运动肌(m.Vastus Lateralis)部位的局部血液学及氧合状态变化,从而识别影响运动表现的中枢性和外周性限制因素。
评估身体活动人群和运动员有氧能力的金标准是最大摄氧量测试(VO2–max),该测试通过在递增负荷运动期间使用运动心肺仪,采用逐次呼吸法分析呼出气体及心肺功能变量。然而,该方法无法阐明肌肉层面的代谢变化。近红外光谱技术(NIRS)作为一种有价值的工具,可通过定量组织微血管中氧合血红蛋白(O2-Hb)和脱氧血红蛋白(H-Hb)的浓度,来评估局部氧合水平(组织饱和度指数,TSI)。NIRS的应用已扩展至呼吸肌和运动肌,分别用于评估与呼吸做功代价(COB)和外周负荷相关的代谢变化。此外,研究还利用NIRS技术探索大脑区域(如前额叶皮层),以评估与运动任务规划或构想等认知需求相关的生理变化,这些认知需求与运动表现密切相关。因此,通过分析运动诱导的O2-Hb、H-Hb和TSI的变化(D),可以识别中枢性和外周性运动限制因素,尤其是在耐力训练为主要体能构成要素的运动项目中(例如跑步、自行车、铁人三项等)。明确这些因素对于教练员和运动生理学家优化运动员表现至关重要,有助于制定针对主要运动限制因素的训练策略。本研究提出了一项利用配备NIRS技术的可穿戴设备的实验方案,用于同步分析TSI、O2-Hb和H-Hb在运动中的变化,以及在运动员进行VO2–max测试时通常记录的心肺功能变量。该方法为全面识别影响运动能力提升及运动终止的主要生理系统提供了有效途径。
耐力运动员依赖于氧气输送与摄取之间的高效平衡,以维持高强度运动并提升运动表现1,2。最大摄氧量测试(VO2-max)是一种重要的生理学评估方法,通过分析递增负荷运动过程中的呼出气体及心肺功能变量来评定运动能力1。该评估又称作运动肺量测定法或心肺运动测试(CPET),可反映心血管系统、呼吸系统和肌肉系统对运动的反应3。在此基础上,呼吸所增加的能量消耗,即呼吸功耗(COB),会提高周围组织对营养物质和氧气的需求。已有研究指出,这一现象可能减少参与主动运动的肌肉的血流量,导致机体对体力活动的耐受性下降,并因代谢反射而提前终止运动进程4。
在进行 VO2–max 测试时,还可以识别通气阈值(VTs),这些阈值对应于从有氧代谢向无氧代谢过渡的特定运动强度(有氧阈值或通气阈值1 [VT1],以及无氧阈值或呼吸代偿点 [RCP] 或通气阈值2 [VT2])5。通气阈值反映了机体为补偿递增运动过程中代谢变化而产生的通气反应6。通过识别这些阈值, cardiopulmonary exercise testing(CPET)能够整合高强度运动期间关键参与的多个生物系统的反应,从而提供全面的评估。
然而,尽管心肺运动试验中的气体代谢分析被广泛视为评估CPET的金标准,但它无法捕捉肌肉层面发生的代谢变化。这些变化对于理解耐力运动员在高强度运动中无法持续进步的生理限制因素至关重要。在此背景下,近红外光谱技术(NIRS)已成为运动科学中一种有价值的工具,有助于分析肌肉微血管水平的血流动力学变量7。
近年来,运动专业人员和研究人员使用了多种配备近红外光谱(NIRS)技术的商用可穿戴设备,以探索运动过程中肌肉的非侵入性变化,并利用该技术确定第一通气阈值(VT1)和第二通气阈值(VT2)8。因此,结合NIRS与 cardiopulmonary exercise testing(CPET)的数据进行整合分析,可全面深入地理解机体对运动的生理反应。
近红外光谱技术(NIRS)利用修正的比尔-朗伯定律来量化运动过程中氧合血红蛋白(O2-Hb)和脱氧血红蛋白(H-Hb)浓度的变化(D)7。在局部组织水平上,O2-Hb的减少反映了局部代谢需求的增加,而H-Hb的增加则反映了氧提取的增强。总血红蛋白(tHb)是O2-Hb与H-Hb之和,可作为局部组织血流量的指标。相反,O2-Hb与H-Hb之间的差值(Hbdiff)可反映组织氧提取程度9。组织饱和度指数(TSI)定义为O2-Hb与tHb的比值,反映组织的氧饱和水平,指示局部氧输送与摄取之间的平衡状态10,11。因此,NIRS数据可提供关于微血管水平生理状态的重要信息,有助于深入理解组织氧合与血流动力学,从而补充 cardiopulmonary exercise testing(CPET)所获得的信息。
近红外光谱技术(NIRS)提供的这一深入理解可延伸至多种实际应用。近期研究凸显了NIRS的多功能性,并展示了其在监测呼吸12,13和运动肌肉7,以及参与运动意图相关脑区(如前额叶皮层(PFC))中的实际应用14,15。这种广泛的适用性凸显了NIRS在全面揭示生理反应方面的潜力,适用于各种类型的肌肉收缩(向心收缩、离心收缩或等长收缩)及运动过程。
通过分析运动诱导的肌肉和大脑水平的DTSI,近红外光谱技术(NIRS)在识别影响运动能力进展的外周与中枢限制因素之间的关联方面展现出重要的潜在价值16,17。例如,在中枢限制因素中,高强度运动期间由于无氧代谢导致氢离子水平升高以及血液乳酸增加,引发代偿性过度通气,进而引起脑血管收缩,导致脑血流量减少,这是前额叶皮层TSI下降的重要原因17,18。相比之下,外周限制因素则表现为运动肌群中氧气供应与需求之间的失衡19。局部氧气输送减少和氧气消耗增加可导致组织脱氧,表现为TSI降低20。这一区别凸显了高强度运动中表现受限的多因素本质,其中中枢和外周机制均至关重要。这一认识提示,延迟这些限制因素在运动过程中的出现可能有助于提升运动表现。
为了充分挖掘近红外光谱(NIRS)技术在识别这些限制因素方面的潜力,必须建立标准化的操作流程,以确保高质量的数据采集与分析。本文档概述了利用NIRS技术进行最大耐力运动测试的方法,用于收集生理数据,并阐明耐力运动员在高强度运动期间中心性与外周性限制因素之间的关系。所提出的方案提供了一种标准化的方法,以确保对这些限制因素背后生理现象的评估具有一致性和准确性。
该方案已获得智利天主教大学机构审查委员会批准(项目编号º 210525001 和 220608010),研究实施遵循《赫尔辛基宣言》。所有参与者在参加所述测试前均签署了书面知情同意书。
1. NIRS可穿戴设备的放置与设置
注意:可使用多种近红外光谱可穿戴设备及数据采集软件。研究人员应仔细查阅制造商提供的说明书和指南,以确保正确设置和使用设备。本研究采用使用连续波记录近红外光谱信号的设备。这些商用设备操作简便,但仅能检测相对于参考状态或基线阶段的光衰减变化,无法检测绝对浓度,而采用时间域记录近红外光谱的其他设备则可检测绝对浓度。
2. 代谢当量测定仪的校准与设置
3. 心电图电极放置(12导联)
4. 递增性最大运动试验(心肺运动试验,CPET)
在完成心肺运动试验(CPET)期间,所有受试者均报告出现呼吸困难、腿部疲劳及自感用力程度(RPE)。联合使用近红外光谱(NIRS)设备并未增加受试者在感觉评估中的任何不适。此外,我们未因与过度生理应激相关的任何风险事件而中止CPET评估。
我们研究了两名来自国家自行车俱乐部的男性竞技自行车运动员。本研究的纳入标准为身体活动量达到一定水平的参与者(每周至少进行150分钟中等强度或至少75分钟高强度体力活动),且体重指数正常(20–25 kg·m-2)。排除标准包括:有呼吸系统、心血管系统、代谢性、肌肉骨骼系统或肿瘤性疾病病史,或在研究评估前至少2周内存在感染或炎症过程。
通过完成 cardiopulmonary exercise testing(CPET),并使用配备近红外光谱技术(NIRS)的设备无创记录由运动强度增加所引起的代谢变化导致的血流动力学和组织氧合变化,可以识别与脑区变化相关的中心限制因素,以及与呼吸系统或肌肉骨骼系统对运动强度增加反应相关的外周限制因素。该测试方案包括一系列步骤,如受试者准备、运动测试的实施以及相关生理数据的采集。
成功实施 CPET–NIRS 方案的标志是在多个参数上获得清晰且一致的数据。在初始静息阶段,记录心率(HR)、脉搏血氧饱和度(SpO2)和 NIRS 读数,以建立基线值。热身阶段以低负荷踏车运动为特征,使受试者为递增负荷运动阶段做好准备,后一阶段的运动负荷逐步增加(见图1)。

图1:运动实验方案的设计示意图。 本研究中所采用的运动实验方案各阶段的示意图,突出显示了关键事件,如静息(R)、热身(W)、运动(E)、结束(F)和停止(S),这些阶段对应于心肺运动测试方案的流程。请点击此处查看该图的放大版本。
在受控的实验室环境条件(空气温度约20 ± 2 °C,相对湿度约40% ± 5%)下,对两名男性运动员进行评估,其 cardiopulmonary exercise testing(CPET)(图2)和近红外光谱(NIRS)(图3 和 图4)数据的代表性结果如下所示:(i)受试者1(图2A 和 图3)(年龄:33岁,体重:80 kg,身高:178 cm,最大负荷:300 W,VO2-max:46 mL·kg-1·min-1,VE:177 L·min-1,HR-max(占预测值百分比,220-年龄):100%,PetCO2:27 mmHg);(ii)受试者2(图2B 和 图4)(年龄:26岁,体重:67 kg,身高:178 cm,最大负荷:300 W,VO2-max:51 mL·kg-1·min-1,VE:131 L·min-1,HR-max(占预测值百分比,220-年龄):93%,PetCO2:33 mmHg)。
在两名受试者中,随着运动强度的增加,VO2(氧气消耗量)、VCO2(二氧化碳产生量)、RQ(呼吸商,VCO2·VO2-1)、HR(心率)、VE(肺通气量)和RR(呼吸频率)持续上升,直至达到VO2的最大值(见图2)。

图2: CPET期间评估的生理变量变化。图中显示了在心肺运动测试期间测量的生理变量的变化过程,包括氧气消耗量(VO2)、每分钟通气量(VE)、呼气末二氧化碳分压(PetCO2)和功率输出(Watts)。通气阈值1和2(VT1和VT2)之间的过渡在运动阶段中标出。(A) 受试者1 和 (B) 受试者2。 请点击此处查看该图的放大版本。
近红外光谱(NIRS)数据为 cardiopulmonary exercise testing(CPET)期间局部组织的代谢需求提供了深入见解。在目标组织(肌肉与脑组织)中观察到的运动诱导变化,取决于所分析的特定组织类型及运动强度。因此,一个用于解读运动诱导NIRS数据的有效生理学框架是Skinner和McLellan提出的运动强度三分期模型34。该模型中,作者根据通气阈值(VTs)界定了三个阶段:I期(有氧阶段)、II期(有氧-无氧过渡阶段)和III期(“代谢不稳定”阶段)。
在运动强度低于VT2(阶段I和II)时,若局部血流量的参数T-Hb无显著变化,则肌肉水平将出现O2-Hb下降和H-Hb上升的现象。我们的CPET-NIRS方案采用周期性运动,伴随重复的肌肉收缩与放松,因此预期T-Hb变化极小。然而,运动引起的变化因所评估的目标肌肉组织而异。在运动肌如m.Vastus Lateralis中,随着运动强度逐步增加,NIRS数据的变化与负荷同步发生(见图3A)。相反,在辅助呼吸肌如m.Intercostales中,变化更多与通气变化同步,而非负荷本身(见图3B)。在PFC中,由于血流量超过运动引起的局部需求,可观察到O2-Hb、H-Hb和T-Hb均增加;同时可能伴有TSI轻微下降(见图3C)。在所有被评估的组织中,随着运动强度增加,TSI参数均呈下降趋势,其中m.Vastus Lateralis的变化较m.Intercostales和PFC更为显著(见图3D)。

图3: 中心性限制示例(受试者1)。CPET测试过程中的NIRS数据(事件:W = 热身,E = 运动,VT1 = 通气阈值1或有氧通气阈值,VT2 = 通气阈值2或无氧通气阈值,F = 运动结束或VO2-max)。(A) m.Vastus Lateralis,(B) m.Intercostales,以及(C) 前额叶皮层(PFC)。 请点击此处查看此图的放大版本。
随着运动引起的代谢需求增加,特别是在超过VT2强度时(第三阶段或“代谢不稳定”阶段),在肌肉(运动肌和呼吸肌)以及前额皮层(PFC)水平上均会出现值得研究的生理反应。这些反应表现为氧合血红蛋白(O2-Hb)和总血红蛋白(tHb)显著减少,同时脱氧血红蛋白(H-Hb)明显增加,这些变化共同支持了组织饱和度指数(TSI)的显著下降。
在高强度运动期间通气需求较高的受试者中,由于“代谢来源”的CO2增加,VE和RR呈指数上升,导致过度通气加剧。这种过度通气可引起明显的脑血管收缩,从而通过中枢限制作用限制运动表现,如本代表性受试者所示。理论上,NIRS数据中观察到的变化是由于脑血管收缩所致,而脑血管收缩是由呼气末CO2分压(PetCO2)在CPET期间急剧下降所提示的低碳酸血症引起的(见图2)。已有研究表明,这些生理变化与运动诱发的呼吸困难加重密切相关,呼吸困难程度通过改良Borg量表进行评估35,36。
另一方面,运动需求较高但呼吸需求不高的受试者不会因低碳酸血症而出现脑血管收缩。因此,这些受试者的近红外光谱(NIRS)数据可能继续反映与中等运动强度下所观察到的类似变化。在这些受试者中,运动表现受限于外周而非中枢限制因素(见图4)。研究表明,这些生理变化与运动诱发的腿部疲劳增加具有高度相关性。

图4:外周限制示例(参与者2)。CPET方案期间的近红外光谱(NIRS)数据(事件:W = 热身,E = 运动,VT1 = 通气阈值1或有氧通气阈值,VT2 = 通气阈值2或无氧通气阈值,F = 运动结束或VO2–max)。(A) m.Vastus Lateralis,(B) m.Intercostales,以及(C) 前额叶皮层(PFC)。请点击此处查看此图的放大版本。
鉴于近红外光谱(NIRS)技术已证实可用于评估大脑和肌肉区域的微血管血流动力学,具有良好的有效性和可靠性,因此将NIRS可穿戴设备作为心肺运动试验(CPET)的补充工具,用于评估运动员表现并识别有氧或耐力运动员的中枢性和外周性运动限制因素,具有重要意义37,38。然而,为了最大限度地发挥该技术的优势,必须考虑若干因素,以确保测量结果的准确性。
近红外光谱(NIRS)可穿戴设备放置的一般原则包括根据目标组织调整设备位置,并确保设备牢固地贴附于受试者皮肤,因为在运动过程中发生的移动可能会影响NIRS信号(产生伪影)7。为实现有效测量,设备应与皮肤完全接触,并使用双面胶带固定,确保光源发射器和探测器未被遮挡。为增强稳定性,可在设备外部覆盖弹性治疗胶带。当设备置于运动过程中会主动参与的肢体部位(如股外侧肌 m.Vastus Lateralis)时,可使用弹性绷带缠绕以在骑行等活动中提供额外固定。然而,必须避免对NIRS光学探头周围施加过度压迫,因为这可能改变局部血流,进而影响NIRS测量结果的准确性(压力不应超过毛细血管灌注压,约25 mm Hg)7。建议覆盖在NIRS设备上的任何胶带或绷带均应为黑色,以防止环境光干扰39,40。 此外,测试环境中调暗照明可最大限度减少对NIRS信号准确性的潜在干扰。
尽管设备的正确放置和固定至关重要, 但同样重要的是需考虑可能影响近红外光谱(NIRS)测量结果的个体解剖学特征。其中一个主要局限在于,NIRS测量的准确性可能受到脂肪组织厚度(ATT)等因素的影响41,42。NIRS的最大穿透深度约为光源与探测器之间距离的一半43。随着ATT增加,来自深层骨骼肌的NIRS信号比例会降低11。这种信号贡献的减少会导致氧合血红蛋白(O2-Hb)、脱氧血红蛋白(H-Hb)及其他发色团的检测水平下降42。因此,建议测量ATT,以确保光能够充分穿透至肌肉组织。可使用卡尺或超声设备进行测量,这两种方法均可准确评估运动员的身体成分;但后者准确性更高,可能更受推荐44。
除了组织光学衰减系数(ATT)外,近红外光谱(NIRS)测量的准确性还受到差分路径长度因子(DPF)的影响,该因子用于通过修正的比尔-朗伯定律计算O2–Hb和H–Hb的浓度45。大多数商用NIRS设备采用连续波系统,以恒定强度发射光,并假设DPF为常数11。然而,DPF并非固定值,其会因个体解剖学差异(包括颅骨和ATT)而变化41,46。此外,个体间DPF的变异性以及性别间解剖特征的差异(如骨骼、肌肉质量和脂肪组织分布的不同)也可能影响测量的准确性28。由于假设DPF恒定,这些设备只能测量O2-Hb和H-Hb相对于基线的相对变化,而无法提供绝对值11。因此,尽管NIRS技术在监测组织氧合趋势方面具有重要价值,但在解读这些测量结果时必须谨慎。未来的研究应着重于开发准确估算脑组织和肌肉组织中DPF的方法。在现阶段,建议在研究中记录所使用的DPF数值,以提高结果的可重复性。
另一个可能影响近红外光谱(NIRS)测量的解剖学特征是皮肤黑色素浓度。黑色素与血红蛋白一样,是皮肤中的主要发色团47。皮肤色素较深的个体具有更大且更密集的黑色素体,可能导致光吸收增加,从而引起信号衰减加剧7。检测到的信号强度取决于发色团对光的吸收、组织的光散射特性以及光源与探测器之间的距离47。因此,较高的黑色素浓度可能干扰NIRS信号质量,导致组织氧饱和度读数降低,尤其是在肌肉层面48,49。为了校正这些差异并提高NIRS数据在不同人群中的可解释性,建议使用Fitzpatrick皮肤类型分类法报告皮肤色素沉着情况7。
关于本方案在运动处方中的适用性,近红外光谱(NIRS)技术主要用于评估耐力运动期间的肌肉代谢,特别是在以底物氧化作为ATP再合成主要能量来源的运动方案中。目前关于其在抗阻训练中应用的证据较为有限,但文献综述表明,力量训练对组织饱和度指数(TSI)的急性影响取决于肌肉纤维的组成。具体而言,在相同运动强度下,Ⅰ型肌纤维比例较高的肌肉(如股外侧肌 m.Vastus Lateralis)相较于其他肌群表现出更大的ΔTSI。然而,由于现有研究方法存在较大异质性,限制了研究结果的普遍适用性。本研究的初步结果,以及未来标准化方案的发表,将有助于推动该技术在不同情境下用于运动强度处方的更广泛应用50。
总之,近红外光谱(NIRS)可穿戴设备代表了在运动过程中无创监测微血管水平血流动力学反应的重要进展,可补充 cardiopulmonary exercise testing(CPET)所评估的心肺变量。与侵入性方法不同,NIRS 能够在不干扰运动员自然动作的情况下,实时提供氧输送与氧消耗之间平衡的数据。该技术通过检测不同组织和运动强度下 O2-Hb、H-Hb 和 TSI 的变化,有效识别中心性和外周性运动限制因素。对代谢需求和生理反应变化的深入洞察,凸显了 NIRS 在优化训练方案和提升运动表现方面的潜力。此外,NIRS 对脑部和肌肉微血管血流动力学的评估能力,为探索不同运动模式和强度下的生理反应提供了新的研究机会。总体而言,NIRS 技术在深化人类生理学认知以及推动运动科学研究方面具有广阔前景,为提升运动表现和优化训练策略提供了有力的工具。
作者声明无利益冲突。
我们感谢本研究的所有参与者以及实验生理学实验室的技术人员,感谢他们在实验室测量工作中提供的支持。作者FC-B和ME-R的研究工作部分得到了第三、第四和第五研究项目的支持。 &;智利天主教大学医学院健康科学学院创新竞赛 作者 RC-C 受到由 2023 年度常规研究项目竞争资助的项目(项目编号:LPR23-17)资助,该项目由 Universidad Tecnológica Metropolitana 提供支持。
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