用于猪麻醉期间重复皮层记录的慢性颅窗技术

摘要

本研究提出了一种可在猪模型中进行重复慢性皮层记录的可扩展、可靠且可重复的方法。该方法适用于神经科学的多个领域，包括疼痛研究和神经系统疾病诊断。

摘要

皮层记录对于提取神经元信号至关重要，可为多种应用提供信息，包括脑机接口和疾病诊断。不同应用对记录技术有特定要求，通常选择侵入式方案进行长期记录。然而，侵入式记录方法面临设备失效和不良组织反应的挑战，这会损害长期信号质量。

为了在最小化设备故障和组织反应相关风险的同时提高慢性皮层记录的可靠性和质量，我们开发了一种颅窗技术。在本方案中，我们报告了在幼年长白猪中植入和打开颅窗的方法，该方法可便于将硬脑膜上电皮层图（ECoG）阵列临时放置于硬脑膜表面。我们进一步描述了如何利用颅窗技术记录皮层信号。颅窗的访问可重复进行多次，但建议在植入手术与后续访问手术之间至少间隔2周，以促进组织恢复和愈合。

颅窗方法成功减少了常见的电极失效模式和组织反应，实现了长期稳定且可靠的皮层记录。我们以记录初级躯体感觉皮层的事件相关电位（ERPs）为例进行了说明。该方法提供了高度可靠的记录结果，还可用于评估干预措施（高频刺激）对ERPs的影响。由于未出现明显的设备故障，且使用的电极数量较少（2个电极，43次记录，16只动物），表明该方法具有更高的研究经济性。尽管电极植入需要进行轻微的外科手术操作，但该方法具有降低感染风险和改善动物福利等优势。

本研究提出了一种可扩展、可靠且可重复的慢性皮层记录方法，在神经科学的多个领域（包括疼痛研究和神经系统疾病诊断）具有潜在应用价值。未来的技术改进可能将其应用扩展至其他物种以及其他记录模式，例如皮层内记录和成像技术。

引言

通常，皮层记录的目的是从大脑神经元信号中提取信息。这些信息可用于多种用途——控制外部设备、通信、疾病诊断或康复治疗^1,2,3,4。每种应用对所需信息内容、空间分辨率以及可接受的侵入程度都有独特的要求。因此，自1929年脑电图被发现以来，已开发出一系列具有不同侵入程度和空间分辨率的记录方法⁵。

通常，这些方法可分为脑电图（EEG）、皮层脑电图（ECoG）和皮层内记录。EEG 是一种非侵入性记录方法，可从全脑捕捉神经振荡和事件相关电位（ERPs）。然而，由于其空间分辨率较低，该方法在精确定位脑活动来源方面能力有限。ECoG 是一种更具侵入性的方法，电极被放置于硬脑膜上或下，通常覆盖皮层较小区域。它具有更高的空间分辨率，能够记录事件相关电位（ERP）和皮层表面局部场电位（LFP）。因此，该方法可更精确地定位脑活动的来源，在例如确定局灶性癫痫起源方面具有重要帮助。皮层内记录是最具侵入性的记录方法，能够记录来自大脑表层或深层单个神经元的动作电位，以及电极周围神经元群体产生的局部场电位（LFP）。这些信号具有极高的空间分辨率和信息含量，但仅由有限数量的神经元（每通道1-10个神经元）产生⁶。

为了长期（数月到数年）从大脑中提取信息，脑机接口必须保持稳定和可靠，以确保所获取的信号在整个记录期间持续代表相同的信息。脑电图（EEG）记录需要频繁更换电极，导致其可靠性从极低到极高不等^7,8,9,10。因此，对于长期记录，通常选择皮层脑电图（ECoG）和皮层内记录方法。然而，这些方法均要求记录电极及其周围组织的状态在长时间内保持稳定。尽管电极通常保持在相同位置，但电极-组织界面可能因组织反应或电极失效模式而发生变化^11,12,13,14。组织反应包括神经元死亡、出血、生物污染、异物反应、胶质增生、包膜形成、感染、脑膜炎以及脑膜外露¹⁵。这些反应会损害电极的记录能力^12,13。常见的电极失效模式包括绝缘部分的分层或泄漏、电极表面涂层的剥落或开裂、导线损伤以及电极移位^11,12。

为了克服电极失效模式，我们考虑了一种临时性电极放置方案的可行性，该方案同时解决了与组织反应相关的诸多挑战，即神经元死亡、异物反应、胶质增生、包裹形成以及脑膜外突。此外，为获得可靠且可重复的神经元记录，必须实现电极位置的一致性。由于电极以硬膜外方式放置，距离神经组织仅数毫米，因此电极的移动幅度不应超过1 mm。颅窗的设计尺寸旨在防止电极放置过程中的过度移动。通过颅窗技术的开发，我们旨在提高长期信号的可靠性与质量，并消除电极失效的风险。

方案

本方案已获得丹麦食品、农业和渔业部下属的丹麦兽医和食品管理局批准（方案编号：2020-15-0201-00514）。共有16头雌性长白猪接受了相关操作。动物到达实验设施时体重约为20 kg，年龄约为2个月。植入手术时体重约为30 kg，研究结束时体重为40–60 kg。操作包括植入手术、通路手术和终末手术（图1）。

图1：实验操作时间线。进入手术（第二阶段）可重复多次。建议每次手术之间至少间隔2周，以确保动物在手术间期充分恢复并完成伤口愈合。缩写：ERP = 事件相关电位。请点击此处查看该图的放大版本。

1. 植入手术（第一阶段）

注意：植入一个3D打印的聚乳酸（PLA）颅窗（图2），以方便对猪的初级躯体感觉皮层进行重复记录。记录尺神经电刺激诱发的事件相关电位（ERPs）。手术及伤口闭合方式应确保后续可再次接触并关闭颅窗。

图2：颅窗设计。（A）颅窗的侧视图，显示固定在颅骨上的壁高和底座。（B）顶视图，显示颅窗的直径、螺钉孔、盖帽空间和窗口。颅窗盖帽为直径22 mm、高1 mm的圆柱体，可精确嵌入盖帽空间。请点击此处查看该图的放大版本。

1. 颅窗植入术
   1. 手术准备
      注意：在手术开始前，需打开数据处理器（RZ2）、工作站（WS8）和计算机（PC）。由非无菌操作的研究人员至少每15分钟在电子表格中记录一次手术笔记，以记录生命体征（心率、spO₂）₂，终末呼气二氧化碳₂核心体温）、麻醉深度（丙泊酚输注速率、芬太尼输注速率、七氟烷百分比）、手术阶段及任何异常情况。
      1. 使用 Zoletil 混合物（每 1 mL 含替噻咪 8.3 mg、唑拉西泮 8.3 mg、赛拉嗪 8.3 mg 和丁丙诺啡 1.7 mg）进行肌肉注射，剂量为 0.15 mL/kg，以使动物镇静。
         注意：本研究中，为避免阻断NMDA受体，Zoletil混合液未添加氯胺酮。
      2. 将动物转运至手术室。对动物进行气管插管并连接机械通气机。
      3. 放置耳静脉导管以输注丙泊酚、芬太尼和生理盐水。
      4. 给予手术麻醉：七氟烷 1-2%，丙泊酚（10 mg/mL，以 8 mg∙kg⁻¹∙h⁻¹持续输注）^-1·h^-1）、芬太尼（50 µg/mL，以20 µg∙kg⁻¹∙h⁻¹持续输注）^-1·h^-1）。涂抹保护性眼用润滑剂以防止角膜干燥。使用0.5%氯己定以从中心向外画圈的方式对皮肤进行两次消毒。
      5. 使用无菌记号笔在无菌铺巾前标记切口位置。通过连接每侧耳部与对侧眼睛的直线来确定前囟点；前囟点即为这两条线的交点（图3A确保切口位于对侧前肢刺激侧的中线略偏外侧处。
      6. 将金属板置于手术单下，并在开始手术前确保其位置正确且稳定。
   2. 进入颅骨
      注意：在本步骤及后续实验流程中，所有操作均由无菌外科医生执行，除非另有说明。
      1. 在步骤1.1.1.5中标记的位置，于中线稍外侧处用手术刀在真皮层做初始切口。随后使用电灼器继续切开皮肤。
         注意：切口不宜过于靠前，以免损伤猪较大的额窦。若需要更大操作空间，可向后侧延长切口。
      2. 使用镊子提起皮肤，放置拉钩，剪开骨膜与皮下组织之间的无血管结缔组织图3B) 以增加皮肤的延展性，便于步骤 1.4 中的缝合。根据所获得的延展性调整牵开器。
      3. 用骨膜剥离器切开骨膜并从颅骨上剥离。使用牵开器将骨膜牵向一侧。
   3. 进入硬脑膜
      1. 在矢状缝前方、正中缝外侧钻一个直径为10 mm的孔图3C从直径15 mm开始钻孔，以在硬脑膜水平获得直径10 mm的孔，因为圆头钻头会产生略微锥形的孔。
      2. 早期将颅窗安装到孔洞中，以确保合适贴合。
      3. 当硬脑膜可见时，换用较小的钻头，以在硬脑膜层面实现孔径的最大化。使用咬骨钳修剪边缘。
   4. 颅窗植入术
      1. 确认颅窗是否完全嵌入并到达孔洞底部，并确定其深度。尽管此步骤因动物而异，但需确保颅窗侧壁抵达硬脑膜以获得良好贴合，且在任何位置均不对脑组织施加压力。
      2. 用手钻在固定颅窗位置的同时标记螺钉孔。
      3. 移除颅窗，并钻出至少4毫米深的孔。穿透颅骨以安装其中一枚螺丝，作为皮层记录的接地/参考电极。
      4. 放置颅窗（图3），并从蝶形输液装置上取下针头。使用钝头蝶形针测量颅窗上螺孔的深度。将长度匹配的螺钉插入孔中并拧紧。
         注意：过长的螺钉将无法有效固定颅窗盖。
      5. 将U型连接器置于一个穿透颅骨并接触硬脑膜的螺钉下方。
         注意：该螺钉的长度必须大于颅骨厚度，以确保新生长的骨组织不会阻碍其与硬脑膜的接触。
2. 外周导丝植入
   注意：此操作可与颅窗植入术同时进行。本操作为无菌程序。为防止手术部位或颅部区域受到污染，应穿戴无菌服装。
   1. 在尺神经附近植入导线
      1. 以两个相距2 cm的无菌金属针（不刺入皮肤）或其他无菌金属部件，接触前肢远端背侧皮肤，施加5 mA的电刺激。观察是否出现明显的蹄部屈曲反应，若出现则表明神经走行于这两点之间。
         注意：可能需要将肢体向后旋转，以便更方便地接触后侧部分。
      2. 将两根针垂直于神经走向插入，相距约2厘米。在距离进针点约3厘米处再次刺穿皮肤图 4A).
      3. 使用2 mA的测试刺激作用于针头，验证位置是否正确；确保可见明显的蹄部运动。
      4. 将Cooner导丝穿过穿刺针，然后拔出穿刺针，使Cooner导丝部分留置于皮下。确保两根导丝中间的裸露部分均位于皮肤下方。图4B).
         注意：如果肢体向后旋转，请小心地将其向前旋转。
      5. 将每个鳄鱼夹连接到两根科纳线的去绝缘端。
   2. 建立运动阈值
      1. 使用上下法确定运动阈值^16,17从100 µA开始，以50 µA为步长逐步增加电流，同时观察并感知蹄部区域是否出现运动反应。通常阈值低于1 mA即可达到。
      2. 将STG程序设置为先以运动阈值的2倍强度，提供100个脉宽为200 µs的矩形双相对称刺激，随后以运动阈值的10倍强度，再提供100个相同参数的刺激。
3. 皮层信号记录
   1. 让一位非无菌操作人员将前置放大器就位，并使用光纤电缆将其连接到数据处理器（RZ2）。
   2. 将七氟烷浓度降低至0.5%-1%（约为其外科麻醉水平的一半），并监测心率和呼出二氧化碳₂，并监测血压（如有条件）以确保麻醉深度充分且稳定。根据需要增加丙泊酚和芬太尼的剂量。
   3. 让非无菌操作人员将头戴装置连接至前置放大器（SI8），并将（ZIF-夹）头戴装置放入安装在磁力支架显微操作仪上的头戴装置架中。
   4. 将无菌铺巾围绕显微操作仪放置，并将粘贴部分固定在头架和头架固定器上（图5A).
   5. 由一名非无菌操作人员使用磁性支架固定显微操作器，将µECoG电极浸入酒精中，然后放入(ZIF-clip)前置放大器接口中。
      注意：将电极放置在硬脑膜上之前，需先使其干燥。操作时务必仅触碰覆盖在前置放大器头部的无菌洞巾，因为µECoG电极本身并非无菌。
   6. 使用显微操作器并借助棉签引导，将µECoG电极放置到位。用鳄鱼夹连接器将µECoG的接地导线连接至接地螺钉。
   7. 将七氟烷浓度降至0%，监测心率、呼出CO₂_2, 并监测血压（如有），以确保麻醉深度充分且稳定，必要时增加丙泊酚和芬太尼的剂量。
   8. 预览突触中的信号；典型信号范围最高可达 ±100 µV。
      1. 如果信号呈现为 粗线 （提示存在线路噪声），应由无菌操作人员执行以下操作：检查接地电路，保持接地螺钉和连接处干燥，并与周围组织隔离。检查其他线缆是否与猪体及手术器械隔离。如未隔离，使用无菌纱布将线缆与猪体或手术器械隔开。
      2. 如果 振幅 信号的 大于 ±100 µV （提示存在运动伪影），确保电极悬浮并贴附于脑组织表面，且当猪因通气或尺神经电刺激而移动时，导线不会发生移动。
      3. 如果信号 振幅 是 小于 ± 20 mV （提示接触不良或麻醉过深），确保µECoG电极贴附于脑表面，且硬脑膜和电极保持湿润；必要时，可在电极上滴加少量生理盐水。确认已关闭七氟烷，降低丙泊酚（可能还包括芬太尼）的输注速率。进行测试性刺激，观察是否可记录到诱发电位。确保外周导线的未绝缘部分完全置于皮下。
         注意：诱发电位通常可在单次扫描中在线区分，但也可在离线状态下评估，取5-10次刺激的平均值。若在触发时刻可见峰形，则为刺激伪迹。刺激伪迹将干扰数据分析。
   9. 将无菌纱布置于电极上以保持良好的组织接触。滴加体温生理盐水于纱布上，防止组织干燥。
      注意：由于这些记录为硬膜外记录，精确温度并非至关重要。而对于硬膜下记录，温度控制则更为关键。
   10. 让电极稳定（30 分钟），并记录电极放置位置和接地连接器的设置，以确保后续记录条件一致图5B- D开始记录，并在每次刺激程序开始前等待30秒，每10分钟进行一次刺激程序。
       注意：在每次记录间隔应定期检查电极上的纱布是否保持湿润，必要时滴加体温生理盐水。
   11. 在三轮刺激后进行干预（作为干预前基线）。再重复刺激九轮。
       注意：在每次记录间隔期间，需定期检查电极上的纱布是否保持湿润，必要时滴加生理盐水。
4. 植入部位的关闭
   1. 用棉签轻轻引导，同时使用显微操作器将电极从纱布上取下并移除。
   2. 由一名非无菌操作人员取下并存放显微操作器、电极、前置放大器探头和前置放大器，按照制造商说明清洁电极：先用去离子水快速冲洗以去除组织残留物。随后将电极浸泡在镜头清洁液中最多4小时，以去除电极表面的组织和蛋白质，再用去离子水进行第二次冲洗，以清除电极表面的镜头清洁液。存放前，将电极浸入异丙醇中。
   3. 将颅窗帽放置于颅窗上以封闭颅窗，确保其与颅窗精确贴合。无需额外固定，皮肤对植入物的压力即可使其保持在位。
   4. 将抗生素小袋置于颅窗帽上方，使用可吸收单股缝线，采用皮下埋入式垂直褥式缝合技术闭合皮肤图6A）。缝合间距保持在5-10 mm，以便为皮肤缝合预留空间。放置最后三针后暂不打结，待所有缝合线均放置完毕后再一并打结。
      注意：在放置全部三根缝线后，再打结最后三根缝线，可确保有足够空间进行最后的缝合。
   5. 以连续方式在皮肤内进行连续皮内缝合。从切口部位外侧1-2 cm处开始皮内缝合，经皮下隧道穿入皮肤真皮层，但位于皮肤表面以下（图6B以避免过度搔抓导致缝线松脱。在缝线的外侧末端打结。
      注意：在此操作过程中可关闭丙泊酚和芬太尼，因为这些药物有数分钟的苏醒时间。
   6. 将连续缝合线置于皮下缝合之间，直至到达切口的另一侧。
      注意：缝线应穿过真皮层但不穿透皮肤表面，以减少动物抓挠缝线的可能性。
   7. 将缝线在切口外侧 1-2 cm 处穿隧道至外侧出针点并打结（图6B）。将组织胶涂抹于切口处。
   8. 术后前3天给予美洛昔康口服混悬液（2 mL，每日两次，口服）和阿莫西林（2 mL，每日一次，肌内注射）；首次给药在围手术期进行。
5. 动物返回家中圈舍
   1. 移除动物身上的无菌敷料，一旦观察到动物出现活动，即开始将其脱离呼吸机。
   2. 将动物转移至其居住栏，并与同栏动物隔离过夜。
      注意：手术后应将猪只分隔开，因为它们通常会剧烈地试图唤醒同栏的同伴，从而导致咬伤。猪只应能够通过鼻部进行接触。

图3：颅窗植入过程。（A）在无菌铺巾前，预先确定并标记猪头部前囟点的预期位置，因为之后该点可能难以辨认。（B）皮肤切开后，使用剪刀松解无血管的皮下组织。（C）在颅骨上钻出一个直径为15 mm的孔，并使用咬骨钳去除边缘。冠状缝和矢状缝的位置已标出。（D）将颅窗植入并用螺钉固定。请点击此处查看该图的放大版本。

图 4：外周导线的植入。（A）将两根23 G针头插入皮肤，并通过这些针头插入Cooner导线。（B）移除针头，导线保留在皮肤内，并使用鳄鱼夹连接至刺激器。请点击此处查看该图的放大版本。

图 5：皮层记录装置示意图。（A）在植入手术过程中，将电极阵列置于硬脑膜上，头端固定装置和微操作器位于无菌套管内，此时切口更长且位置更偏外侧。（B）在通路手术中记录装置的特写，此时切口位置更偏内侧。（C）接地装置示意图，其中所有ECoG上的接地和参考导线均通过U型连接器短接并连接至颅周螺钉。（D）在通路手术中头端和头端固定装置的特写。µECoG被放置于硬脑膜上。缩写：ECoG = 皮层脑电图；µECoG = 微皮层脑电图。请点击此处查看该图的放大版本。

图6：缝合技术。（A）皮下埋入式垂直褥式缝合技术示意图。（B）连续皮内缝合技术示意图。请点击此处查看该图的放大版本。

2. 手术入路（第二阶段）

注意：2-4 周后，打开颅窗以对 S1 区皮层信号进行随访记录。手术及伤口闭合操作需再次以可重复打开和关闭颅窗的方式进行。

1. 手术准备
   注意：步骤 2.1.1–2.1.6 与步骤 1.1.1.1–1.1.1.6 类似。
   1. 使用 zoletil 混合液对动物进行镇静（5 mL zoletil [盐酸替来他明 25 mg/mL 和盐酸唑拉西泮 25 mg/mL]，6.25 mL 赛拉嗪 [20 mg/mL]，以及 2.5 mL 布托啡诺 [10 mg/mL]）。
      注意：在本项研究中，为避免阻断 NMDA 受体，zoletil 混合液中未添加氯胺酮。
   2. 将动物转运至手术室，并进行气管插管和通气。
   3. 放置耳静脉导管，通过该导管给予丙泊酚、芬太尼和生理盐水。
   4. 实施手术麻醉：七氟烷 1–2%，丙泊酚（10 mg/mL，以 8 mg∙kg^-1∙h^-1 的速率输注），芬太尼（50 µg/mL，以 20 µg∙kg^-1∙h^-1 的速率输注）。
   5. 如有需要，在无菌铺巾前使用无菌标记笔标记切口位置。通过连接两侧耳部与对侧眼睛的直线确定前囟点；前囟位于这两条线的交点处（图 3A）。
      注意：初始切口通常仍可见。新切口应距离初始切口至少 30 mm，以避开大部分瘢痕组织，并便于伤口闭合。
   6. 将金属板置于铺巾下方，并在开始手术前确保其位置正确且稳定。
2. 暴露颅窗
   注意：步骤 2.2.1–2.2.3 与步骤 1.1.2.1–1.1.2.3 类似。
   1. 使用手术刀在步骤 2.1.5 标记的位置稍偏外侧的中线处开始切开真皮层，随后使用电灼器继续切开皮肤。
      注意：若为终末实验，可在原切口位置进行切开。
   2. 放置牵开器，用镊子提起皮肤，并剪开骨膜与皮下组织之间的无血管结缔组织（图 3B），以增加皮肤的活动度并便于步骤 1.4 中的缝合。根据所获得的活动度调整牵开器位置。
      注意：若为终末实验，此步骤可省略。
   3. 切开骨膜，并使用骨膜剥离器将其从颅骨上分离，再用牵开器将骨膜牵向一侧。
   4. 取下颅窗盖帽，用棉签轻轻做环形运动清除开孔处的结缔组织，直至暴露硬脑膜。
3. 外周导线植入
   1. 重复步骤 1.2。
4. 皮层信号记录
   1. 重复步骤 1.3。
5. 植入部位的关闭
   1. 重复步骤 1.4。
      注意：若为终末实验，此步骤可省略。

3. 末期手术（第三阶段）

注意：2-4 周后，打开颅窗以对 S1 区皮层信号进行随访记录。重复上述 2.2-2.5 步骤，然后执行步骤 3.1。

1. 安乐死
   注意：耳缘静脉导管的管路需要用生理盐水冲洗，以防止巴比妥类药物氧化。
   1. 用生理盐水冲洗耳缘静脉导管。
   2. 连接一支含有过量戊巴比妥钠的注射器（10 mL，400 mg/mL），通过耳缘静脉导管注入戊巴比妥钠。

结果

采用颅窗技术，在16只动物中进行了43次皮层信号记录。动物术后恢复良好，研究期间均成对饲养，并依据福利评估方案进行每日监测 补充表 S1所有动物在各个时间点的评分均为0分，表明其福利状况极佳。 图7 表明窗口确实放置在猪大脑皮层的S1区域。通常可在硬脑膜上观察到一些瘢痕组织 体内 和死后（图7A），但尸检结果显示，它从未累及下方的皮质组织（图7B），在所有动物中均显示健康状态，且与对侧S1区域相似。

讨论

该技术发展的意义在于消除电极失效模式、降低组织反应，从而提高侵入性皮层记录技术的可靠性。在本研究过程中未出现任何电极失效情况，整个研究共使用了两个ECoG阵列，涵盖了16只动物和43次记录会话。这对科研经济性具有额外的积极影响。若采用传统的完全植入方法^12,26,27，在假设无设备失效的前提下，至少需要16个ECoG阵列。然而，失效模式和组织反应仍是颅内脑记录技术广泛应用所面临的重要挑战^{11,12,13,28,29}。本研究显著减少了电极数量，从而同时降低了慢性神经科学研究的成本与风险。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
颅窗植入术
手术刀			一次性，10号刀片
镊子
纱布
电灼器
骨膜剥离器			扁平，10 mm 宽度
韦特兰纳拉钩			3x4 齿，钝头，16.5 厘米
Midas Rex Legend EHS 触控笔式外科钻系统	Medtronic Powered Surgical Solutions，美国沃思堡
细钻头传奇球钻头	Medtronic Powered Surgical Solutions，美国沃思堡	7BA40F-MN 和 7BA60F-MN	MedNext 4 和 6 毫米头端直径
钻头无菌保护罩
注射器			5 ml
生理盐水
抽吸
尺子
棉签
刮除器			直柄钳口，15 厘米，3 × 20 毫米钻头尺寸
2.5 mm 手钻和手柄
蝴蝶型输液器
6枚M3螺钉，长度为6-14 mm
螺丝刀
三种尺寸的3D打印颅窗（4、5和6毫米深度）及盖帽
去隔离U形连接器
鳄鱼夹
庆大霉素-胶原可吸收抗生素海绵
VYCRIL 可吸收缝合线	Ethicon		2-0 26 毫米圆形针身
Monocryl 不可吸收缝线	Ethicon		3-0 24 毫米反向切割
持针器
剪刀
局部用粘合性组织胶	Leukosan
外周导丝植入
两根部分未绝缘的Cooner导线
注意：导线中间和一端有1-2厘米的裸露部分
两根23号针头
纱布
由运行 MC_stimulus 程序的计算机控制的可编程刺激器	德国赖特林根，多通道系统公司	STG4008
两个鳄鱼夹连接器
皮层记录
磁力微操作仪用金属板
磁性微操作仪支架
显微操作仪
头戴式装置支架
32通道ZIF夹式头戴装置	TDT，美国佛罗里达州阿拉楚阿
32通道微电皮层图（micro-electrocorticography）µECoG阵列	Neuronexus，美国安娜堡	E32-1000-30-200
TDT 录音设备，包括前置放大器 SI8、数据处理器 RZ2 和工作站 WS8	TDT，美国佛罗里达州阿拉楚阿
麻醉 &麻醉与镇痛
Zoletil 50 Vet	Virbac，卡罗斯，法国
隆朋（Zxylacin）	礼来动物保健公司，蒙海姆；德国
托力达（布托啡诺）	Intervet International，荷兰博斯梅尔		如今使用另一种配方（dolorex）
Ketaminol	Intervet International，荷兰博斯梅尔
丙泊酚	Baxter Holding，乌得勒支，荷兰
芬太尼	B. Braun，德国美尔松根
美达佳	勃林格殷格翰动物保健公司，德国英戈尔施塔特
Noromox	Scanvet 动物健康公司，弗雷登斯堡，丹麦
戊巴比妥	LeVet，荷兰奥德瓦特