创新的脂肪组织分选技术：将脂肪转化为特化组分

摘要

本文介绍了一种可将自体脂肪组织转化为多种具有不同理化特性和功能的脂肪组分物质的实验方案。

摘要

传统的自体脂肪组织移植常用于容积填充和组织再生。然而，脂肪移植物均匀的物理和生物学特性在不同患者的临床情况及多样化需求下，往往导致效果不够理想。在自体脂肪移植的基础上，我们提出一种创新性技术——自体脂肪组分移植。这一全新理念整合了一套精心设计的操作流程，旨在将自体脂肪组织转化为多种具有独特理化特性的脂肪组分，以满足不同临床应用场景下的特定需求。通过一系列物理方法，脂肪组织可被转化为提供充分刚性支撑的脂肪基质复合物（AMC）、用于进一步填充的高密度脂肪（HDF）、适用于小范围或精确注射的基质血管组分（SVF）-凝胶，以及针对细小皱纹和/或面部年轻化需求的脂肪胶原片段（ACF）。这些不同的脂肪组分具有各自固有的特性，适用于精准化、靶向性的移植策略，能够更好地满足个体化患者的复杂需求。这种新型的脂肪组织分选技术在革新脂肪移植领域方面展现出巨大潜力，为实现更精细、更个性化的移植提供了全新的视角与方法。

引言

自体脂肪组织移植是一种广泛用于容积增加和组织再生的技术，其发展得益于供区准备、脂肪提取、处理及植入等环节的进步^1,2,3,4。然而，传统脂肪移植物在物理和生物学特性上的均一性常常限制了其在应对多样化临床需求方面的有效性⁵。为了克服这些局限，我们的研究团队开发了一种创新的脂肪组织分馏技术，可将自体脂肪转化为具有不同理化特性和功能的特化组分。

本方案的主要目标是将自体脂肪组织分离为具有特定功能的组分——脂肪基质复合物（Adipose Matrix Complex, AMC）、基质血管组分凝胶（Stromal Vascular Fraction-gel, SVF-gel）以及脂肪胶原片段（Adipose Collagen Fragment, ACF），每种组分均针对特定的临床需求而设计。通过提供具有独特性能的组分，如增强的刚性、高细胞密度以及富含胶原的配方，该方案可实现精确且靶向性的移植策略^6,7,8

方案

本研究经中国广州南方医院伦理审查委员会批准。脂肪组织取自签署书面知情同意书并自愿参与本研究的健康供体。所有动物实验均经南方医院实验动物管理和使用委员会批准，并依照中国国家卫生与医学研究理事会的指导原则进行。

1. 脂肪组织制备

1. 全身麻醉与肿胀液浸润
   1. 对患者实施全身麻醉。在静脉诱导阶段，给予丙泊酚（2 mg/kg）、芬太尼（1.5 µg/kg）和罗库溴铵（0.6 mg/kg）联合用药，随后以七氟烷（1.5%）和瑞芬太尼（0.1 µg/kg/min）维持麻醉深度。在整个手术过程中，根据BIS监测（目标值40–60）、循环参数（MAP >65 mmHg）和呼气末二氧化碳（EtCO₂，35–45 mmHg）动态调整麻醉方案。
   2. 将患者置于仰卧位，在受压部位使用保护性衬垫，并用氯己定-酒精对手术区域进行严格消毒。遵循无菌操作规程，以最大限度降低感染风险。
   3. 使用20 mL注射器将含有0.06%利多卡因和0.001%肾上腺素的肿胀液浸润至吸脂区域（如腹部或大腿）的皮下组织。保持浸润液体积与预期脂肪抽取体积之间的比例为2:1，并根据患者的具体解剖特征和治疗区域大小调整总注射量。
   4. 检查麻醉效果，确认肿胀液已充分浸润。在进行下一步操作前，轻刺或捏压吸脂区域。若患者仅感到轻微压力，则表明浸润充分，可实现更少不适感的脂肪采集。....

结果

通过手术过程中执行的各种机械操作，我们成功将脂肪组织转化为具有不同特性的多种脂肪组分。依次为：可提供充分强韧支撑的AMC（图1A）；用于进一步填充的HDF（图1B）；适用于小范围精确注射的SVF-gel（图1C）；以及用于改善细小皱纹或面部修复的ACF（图1D）。脂肪组分物质AMC、SVF-gel和ACF的特性及功效已得到充分验证。

讨论

该脂肪组织分馏方案包含多个关键步骤，可确保成功分离出具有特定功能的组分。首先，对获取的脂肪组织进行离心处理，将其分离为高密度脂肪（HDF）和低密度脂肪（LDF），二者具有不同的细胞成分和细胞外基质（ECM）组成^23,24。HDF富含活性脂肪细胞和基质血管组分（SVF）细胞，经进一步处理可获得脂肪基质复合物（AMC），其因含有丰富的胶原蛋白而具备良好的结构支撑作用⁷。而LDF则通过机械乳化制备成SVF凝胶，该产物适用于小范围的精确注射¹⁰。最后，通过对LDF进行机械粉碎可得到脂肪胶原片段（ACF），这是一种富含胶原蛋白的制剂，特别适用于皮肤年轻化治疗¹¹。这些步骤共同实现了将均质的脂肪组织转化为具有特定功能特性的专业化组分。

离心后，脂肪组织样本表现出不同的密度，反映了细胞和细胞外基质（ECM）组成的多样性，而非均一性

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
0.001% 肾上腺素	Sigma-Aldrich	E4375
0.06% 利多卡因	Sigma-Aldrich	L5647
3-mm 多通道套管	Tulip Medical Products, San Diego, CA, USA	/
50-ml 离心管	Corning	430829
BOSE ElectroForce 力学测试装置	Bose Corporation	/
胶原酶	Worthington Biochemical	LS004176
雌-雌鲁尔锁紧接头	BD Biosciences	309628
带套筒和筛网的过滤装置	定制（上海天工仪器有限公司）	/
纱布	Medline Industries	MDS093944
苏木精/伊红染色试剂盒	Sigma-Aldrich	HT110116
马松三色染色试剂盒	Sigma-Aldrich	HT15
裸鼠	南方医科大学	/
磷酸盐缓冲液（PBS）	Thermo Fisher Scientific	10010023
圆形不锈钢过滤筛网（0.15 mm）	上海天工仪器有限公司	/
圆形不锈钢过滤筛网（0.25 mm）	上海天工仪器有限公司	/
灭菌 100 目滤袋	上海天工仪器有限公司	/
基质血管组分（SVF）-凝胶提取器	上海天工仪器有限公司	/
胰蛋白酶	Thermo Fisher Scientific	25200056
Western 印迹分析试剂盒	Bio-Rad	1705061