体内共聚焦显微镜：检测睑缘毛囊蠕形螨的标准操作流程

摘要

体内共聚焦显微镜是一种具有高分辨率的有前景的成像技术。本文介绍了临床医生用于在眼睑边缘活体检测毛囊蠕形螨（Demodex）的操作步骤。

摘要

毛囊蠕形螨 螨虫感染可引起睑缘炎症， 毛囊蠕形螨 睑缘炎在临床病例中可能引发一系列眼部疾病。许多医生诊断眼部寄生虫感染时 毛囊蠕形螨 通过睫毛拔除术获取螨虫并在光学显微镜下观察睫毛 体外然而，睫毛拔除后残留螨虫的存在以及该操作带来的疼痛感是标准临床护理的局限性。

体内共聚焦显微镜（IVCM）是一种非侵入性成像技术，可使临床医生无需拔除睫毛即可详细观察睑缘处的毛囊蠕形螨。该技术可实现无痛分析，整个检查可在<30分钟内完成。尽管该检查方法正受到越来越多的关注，但对于缺乏丰富经验的眼科医生而言，可能难以掌握。本文提供了一套标准化操作流程，用于通过IVCM对睑缘处的毛囊蠕形螨进行可视化观察，以促进该技术在临床工作中的推广应用。

引言

睑缘炎是临床实践中最常见的眼科诊断之一。证据表明，睑缘炎的发生与某些因素存在显著关联。 毛囊蠕形螨 螨虫 和睑缘炎¹螨虫的侵染既包括由螨虫直接造成的损害 毛囊蠕形螨² 及其分泌物引发的免疫反应，这些分泌物可能发挥作用 作为细菌的载体，并可能促进睑缘炎的发展³. 毛囊蠕形螨 睑缘炎（DB）可引发一系列不良后果，包括角膜及眼表损伤¹，对患者的生活质量产生负面影响^4,5.

Demodex 是一种寄生性螨虫，栖居于毛囊和皮脂腺内及其邻近区域⁶。在睫毛毛囊内或周围检测到Demodex有助于诊断蠕形螨睑缘炎（DB）⁷。临床上诊断DB通常采用睫毛拔除术，并在光学显微镜下观察Demodex。然而，已知许多位于毛囊深部的螨虫在拔除睫毛后仍可能残留在毛囊口^8,

方案

本方案重点介绍使用共聚焦显微镜（IVCM）在睑缘观察Demodex的标准化操作流程（图1）。本研究已获得温州医科大学附属眼视光医院伦理审查委员会（IRB）批准（IRB批准编号：H2023-022-K-20），由于本研究为回顾性分析，因此豁免了个人知情同意要求。本文所述操作步骤参考了既往已发表的相关描述^{11,13,14,15,16}。

图 1：断层扫描设备。

结果

根据上述标准操作程序（SOP），我们在2024年对疑似Demodex感染的患者进行了检查。此外，我们还比较了2023年尚未实施该SOP时的数据。如图5所示，2024年接受共聚焦显微镜（IVCM）检查以检测Demodex的患者数量显著高于前一年。该SOP使得对不同年龄患者（从4岁至92岁）的检查成为可能。

图5.......

讨论

外寄生虫 毛囊蠕形螨 是人类最常见的寄生虫之一。这些螨虫生活在睫毛毛囊、睑板腺（MGs）以及皮脂腺中，呈透明、细长形，体长为0.15–0.4 mm。¹⁷使用该设备进行的共焦显微内镜（IVCM）可提供400 µm × 400 µm的实时图像，横向分辨率为1 µm/像素，放大倍数为800倍。通过IVCM，可获得详细的图像 毛囊蠕形螨 可在睫毛毛囊中获取；也可监测患者对眼睑边缘治疗反应的变化^11,13作为一种非侵入性技术，共焦激光显微镜（IVCM）已被用作眼科成像工具，可快速可视化睑缘处的螨虫¹⁸与睫毛拔除后在光学显微镜下观察微生物相比，IVCM 无痛，可进行频繁检查，便于随访，并能获取高分辨率图像。 表1 展示了两种方法之间的比较。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
基于卡波姆的眼用凝胶，Vidisic	博士伦，德国柏林	8187195
海德堡眼底检查仪软件	Heidelberg Engineering GmbH，德国海德堡	版本 1.3.3.0
海德堡视网膜断层扫描仪III	Heidelberg Engineering GmbH，德国海德堡	HRT3-08398
盐酸丙帕他卡因	Alcon Laboratories，美国德克萨斯州沃思堡	8387271
TomoCap	Heidelberg Engineering GmbH，德国海德堡	18829	PMMA 盖帽