糖尿病足坏疽中的罕见病原体：Wohlfahrtiimonas chitiniclastica 感染一例

摘要

一名76岁患有糖尿病的男性，因慢性足部溃疡和坏疽，并继发蝇蛆感染，通过宏基因组测序诊断为Wohlfahrtiimonas chitiniclastica感染。经清创、厄他培南治疗及创面重建后康复，凸显了对免疫功能低下患者中罕见病原体进行早期检测和先进诊断的重要性。

摘要

Wohlfahrtiimonas chitiniclastica 是一种罕见的革兰阴性细菌，通常与伤口感染相关，尤其常见于免疫功能低下患者或暴露于不卫生环境的个体。尽管临床病例较为少见，但若未能及时识别或治疗不当，该感染可导致严重并发症，如菌血症、感染性休克，甚至死亡。本文报告一例76岁糖尿病男性患者，其出现慢性难愈性足部溃疡，并继发坏疽及蝇蛆感染。通过宏基因组高通量测序技术解决了诊断难题，检测出W. chitiniclastica，同时合并存在Proteus mirabilis和Corynebacterium striatum。治疗方案包括积极的外科清创以去除坏死组织、局部应用庆大霉素骨水泥、静脉使用厄他培南进行系统性抗菌治疗，以及采用背侧带蒂筋膜瓣进行创面修复。该综合治疗策略取得了显著的临床改善，创面逐步愈合，感染指标明显下降。本病例凸显了先进测序技术在多微生物感染中识别罕见病原体的关键作用，而传统方法如基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）可能无法准确鉴定。同时，本案例强调了将精准诊断与外科干预、靶向抗微生物治疗及严密的术后管理相结合，对实现良好预后的重要性。通过记录这一不典型临床表现，我们旨在提高临床对W. chitiniclastica感染的认知，并为类似复杂的糖尿病足感染提供切实可行的管理框架。

引言

Wohlfahrtiimonas chitiniclastica 是一种革兰氏阴性、无动力的杆菌，可在有氧和无氧条件下定植于多种宿主，具有显著的几丁质酶活性，在寄生性蝇类的变态过程中发挥重要作用^1,2。雌性蝇将卵产在黏膜表面或伤口处，形成感染灶。幼虫以体液、摄入的食物或活体及坏死的宿主组织为食，持续一段时间³。尽管感染较为罕见，但临床报道数量正在增加，尤其多见于免疫功能低下者或暴露于不卫生环境的人群。这一趋势部分归因于基因测序技术的广泛应用，从而加深了对该病原体流行病学的认识⁴。临床上，W. chitiniclastica 可引起局部伤口感染，若未及时治疗，也可能发展为严重菌血症、感染性休克甚至死亡⁵。

本病例报告描述了一例慢性难愈性糖尿病足溃疡患者，其病情因蝇蛆感染而复杂化，最终被诊断为W. chitiniclastica感染。该报告阐述了诊断过程中的挑战，并强调了利用宏基因组高通量测序（mNGS）进行早期识别的重要性。此外，报告还突出了通过积极的外科清创联合碳青霉烯类抗生素治疗以实现保肢的关键作用。通过展示先进诊断技术与创新重建手术之间的协同效应，本病例拓展了应....

方案

根据机构指南，已从患者处获得出版临床资料和临床图像的书面知情同意。所有文件中的患者标识信息均已匿名化处理。

1. 患者评估与初步检查

1. 获取全面的病史资料，重点关注糖尿病病程、血糖控制情况（HbA1c水平）、外周血管疾病史以及既往干预措施（如起搏器植入）。记录慢性足部溃疡进展及蝇蛆感染情况。
2. 体格检查评估右足肿胀、坏死组织（第三和第五足趾）、感觉功能缺损，并肉眼确认蝇蛆活动情况。对创面形态进行拍照记录（图1 和 图2）。
3. 实验室检查包括全血细胞计数（CBC）、C反应蛋白（CRP）和红细胞沉降率（ESR）。
   1. 进行CBC检测时，采集全血（3 mL）至EDTA抗凝管中，轻柔颠倒混匀8–10次，并在4小时内完成分析。
   2. 进行CRP检测时，采集血液（2–3 mL）至血清分离管中，静置凝固20–30分钟，以1,500–2,000 × g 离心10分钟，并于当日完成检测。
   3. 进行ESR检测时，采集全血（2 mL）至含3.2%枸橼酸钠的采血管中，轻柔混匀后，在4小时内采用Westergren法进行分析。
      注：若检测延迟超过>1小时，血液应于2–8 °C条件下保存或运输。

结果

一名76岁男性糖尿病患者，患有慢性右足坏疽并伴有蝇蛆感染（图1 和 图2），接受了综合治疗，包括彻底清创坏死组织、清除骨髓炎病灶，并采用以背侧为基础的筋膜瓣进行创面重建。术中样本的宏基因组高通量测序（mNGS）结果显示，主要病原体为Wohlfahrtiimonas chitiniclastica，基因组覆盖率达97.96%（图3）。同时检出的其他微生物包括Proteus mirabilis和Corynebacterium striatum。

术后，患者接受静脉注射厄他培南（每日1 g），感染指标显著下降。手术部位愈合进展良好，无皮瓣失败或感染复发的迹象。血糖控制得到优化，进一步促进了康复。

该病例凸显了宏基因组下一代测序（mNGS）在多微生物感染中检测罕见病原体的关键作用，并强调了在外科清创、靶向.......

讨论

Wohlfahrtiimonas chitiniclastica 是一种杆状、革兰氏阴性、非发酵型细菌，氧化酶和过氧化氢酶试验呈阳性。该菌最初在寄生蝇Wohlfahrtia magnifica的幼虫体内被发现⁶。雌性蝇类将卵产于伤口或黏膜表面，从而形成感染病灶。幼虫可在坏死或存活的宿主组织、体液或摄入的食物上摄食一段时间³。多种因素可增加感染易感性，包括社会经济地位低下、高龄、外周血管疾病、饮酒以及慢性开放性伤口⁷。

传统的实验室方法，如基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和16S rRNA测序，可从组织或血液培养物中鉴定W. chitiniclastica⁸。然而，本病例中该病原体是通过宏基因组高通量测序（mNGS）鉴定的。与仅限于细菌鉴定且无法检测真菌、病毒或寄生虫的16S rDNA测序不同，mNGS能够广泛检测.......

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
Agilent 2100 HS DNA 试剂盒	Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA	5067-4626 (DNA 1000) / 5067-4627 (DNA HS)*	用于文库质量控制和片段分析
Agilent 2100 HS DNA, Qubit 3.0	Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA	G2939BA	与HS DNA试剂盒配对使用的文库质控仪器
bioMérieux VITEK 2 系统	bioMérieux, Marcy-l'Étoile, France	414532	用于自动化微生物鉴定和抗菌药物敏感性测试
Illumina NextSeq 500	Illumina Inc., San Diego, CA, USAIllumina Inc.,	SY-415-1001	高通量测序平台
QIAamp UCP 病原体 DNA 试剂盒	High-throughput sequencing platform	50214	用于去除宿主DNA的病原体DNA提取
Qubit 3.0 荧光计	Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA	Q33216	用于DNA和RNA定量
Siemens SOMATOM Definition AS 64排	Siemens Healthineers, Erlangen, Germany	N/A	用于计算机断层血管成像（CTA）