儿童中升高的乳酸脱氢酶和D-二聚体水平 肺炎支原体 肺炎与全身性炎症、心理应激及预后结果相关。高MP-DNA载量可预测更长的住院时间。研究结果强调乳酸脱氢酶（LDH）和D-二聚体是用于早期风险分层的有价值生物标志物，有助于改善临床管理并识别高风险儿科患者。
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儿童中升高的乳酸脱氢酶和D-二聚体水平 肺炎支原体 肺炎与全身性炎症、心理应激及预后结果相关。高MP-DNA载量可预测更长的住院时间。研究结果强调乳酸脱氢酶（LDH）和D-二聚体是用于早期风险分层的有价值生物标志物，有助于改善临床管理并识别高风险儿科患者。
Mycoplasma pneumoniae 肺炎（MPP）是一种常见的儿科感染，常伴随全身性炎症和心理应激；然而，其潜在的双向关系尚不明确。我们回顾性分析了120名年龄在5至12岁之间的住院患儿，采用儿童应激问卷（CSQ）、炎症介质（CRP、IL-6）以及三项临床生物标志物（LDH、D-二聚体、MP-DNA载量）进行评估。LDH和D-二聚体水平升高与更高的CSQ评分显著相关（r = 0.67，p < 0.01），并提示更严重的炎症反应。病程较长（>7天）且MP-DNA载量较高的患儿应激评分明显更高（平均38分 vs. 25分，p < 0.01）。LDH ≥ 450 U/L可独立预测住院时间延长（OR = 2.1，95% CI：1.2–3.7），ROC分析显示其对严重并发症具有良好的判别能力（AUC = 0.89，95% CI：0.83–0.95；敏感性 = 82%，特异性 = 81%）。这些发现支持在儿童MPP中，心理应激与免疫失调之间存在双向关联，并强调LDH和D-二聚体可作为早期识别高危患儿的实用生物标志物。
Mycoplasma pneumoniae（MP）是儿童社区获得性肺炎最常见的病因之一，在全球范围内导致了大量呼吸系统相关的住院病例1,2。除了肺部受累外，MP感染还常引发全身性免疫反应，可能导致肺外并发症及恢复延迟3。在儿童群体中，免疫功能与心理状态密切相关，急性疾病和住院可能诱发慢性应激反应，从而破坏内分泌-免疫系统的平衡4,5。下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴的激活可能抑制免疫防御功能，也可能增强促炎信号通路，提示炎症与心理应激是相互促进的过程。其他研究还强调了肠-脑轴的中介作用，应激引起的肠道菌群改变和肠通透性增加可促进全身性炎症6,7，这在一定程度上解释了部分MP肺炎患儿出现的肝脏或心脏症状比例偏高的现象8,9。
临床上，某些患者尽管接受了及时治疗，仍会出现恢复较慢或病情恶化的情况，常表现为呼吸道样本中持续存在肺炎支原体DNA，并伴有组织损伤或凝血标志物升高10,11以及应激评分升高。这些模式提示应激与炎症之间可能存在自我维持的循环。然而，目前的临床指南仍主要以病原体为中心，在决策过程中很少整合心理因素与炎症动态变化12。传统标志物如C反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）虽具信息价值，但特异性较低3,14。
相比之下，乳酸脱氢酶（LDH）和D-二聚体可快速检测，具有临床可及性，且具有明确的机制相关性：LDH反映组织损伤和缺氧状态，而D-二聚体则提示凝血功能紊乱和血管应激15,16。既往研究表明，LDH水平 ≥ 450 U/L 和 D-二聚体水平 > 0.5 mg/L 是与住院时间延长相关的临床显著阈值，凸显了其预后价值17。同样，肺炎支原体DNA载量（MP-DNA load）虽主要用于诊断，但可能直接反映病原体负荷及其与宿主免疫应答之间的关系18。与C反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）等传统标志物相比，LDH和D-二聚体提供机制上更特异、临床上更易解读的信号，而MP-DNA载量则可直接量化病原体负荷，从而补充并拓展了现有的诊断工具19。
因此，本研究旨在探讨乳酸脱氢酶（LDH）、D-二聚体和肺炎支原体（MP）DNA载量是否可作为儿童肺炎支原体肺炎病情严重程度的可靠预测指标，并进一步分析这些生物标志物与心理应激之间的关联，以期改善该人群的风险分层和临床管理。
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本研究经安徽省儿童医院机构伦理委员会批准。在数据收集之前，已从所有参与者的父母或法定监护人处获得书面知情同意。涉及患者样本的所有操作均按照机构生物安全规定以及国际公认的伦理标准进行。所使用的仪器和软件列于材料表中。
1. 研究设计
本项回顾性队列研究纳入了2021年6月至2024年12月期间在一家三级儿童医疗中心确诊为Mycoplasma pneumoniae（MP）肺炎的5至12岁儿童。MP肺炎的诊断依据为通过咽拭子或支气管肺泡灌洗液（BALF）的PCR检测出MP-DNA20,21。排除已知存在免疫缺陷、慢性肺部疾病（如哮喘）或临床资料不完整的儿童22。
2. 临床数据收集
每日两次记录腋下体温（07:00 和 19:00），额外的发热事件在发生时另行记录。使用脉搏血氧仪评估基线外周血氧饱和度。入院后24小时内采集静脉血样用于炎症生物标志物分析23,24。全血和血清在2-8 °C下保存，并在采集后2小时内进行处理；血清/血浆分装后于−80 °C冷冻保存直至分析。
3. 支气管镜检查与样本采集
在镇静条件下，使用儿童用纤维光学支气管镜进行可弯曲支气管镜检查并实施灌洗。操作过程中持续监测血氧饱和度和心率25。吸引压力维持在100–120 mmHg，工作通道直径为2.0 mm。每个肺段灌注3至5 mL无菌生理盐水，当回收液体积达到灌注盐水量的至少50%时，视为灌洗质量合格。支气管肺泡灌洗液（BALF）立即置于冰上，于1,500 g离心10分钟以去除细胞和碎片，上清液储存于−80 °C，用于后续肺炎支原体DNA检测和细胞因子测定。
4. 炎症生物标志物检测
采用颗粒增强法分析CRP。IL-6通过化学发光免疫分析法进行定量。LDH活性通过丙酮酸转化为乳酸的反应，以分光光度法测定26。D-二聚体采用乳胶增强免疫比浊法检测。严格遵循制造商推荐的孵育时间、校准程序和内部质控要求；外部质量评估按照实验室认证计划的时间表执行。检测结果单位分别为：mg/L（CRP）、pg/mL（IL-6）、U/L（LDH）和mg/L FEU（D-二聚体），MP-DNA结果以拷贝数/µL表示。
5. 心理测量评估
心理压力通过入院后72小时内由家长报告的儿童压力问卷进行评估。总分范围为0-80分，得分≥30分被视为中至重度压力。经过培训的护士提供标准化指导和条目级别的示例，以尽量减少回忆偏倚，并于当天重新核查未完成的问卷，以确保数据完整性。
6. 安全注意事项
所有血液和支气管肺泡灌洗液（BALF）样本均在经认证的II级生物安全柜中操作，并穿戴适当的个人防护装备（手套、防护服、口罩/呼吸器和眼部防护）。锐器被丢弃至防穿刺容器中。液体生物危害废物在丢弃前用10%次氯酸钠溶液预处理30分钟。每次操作后对表面进行去污处理，所有操作均符合机构和国家相关法规（例如，《世界卫生组织实验室生物安全手册》；BMBL）。
7. 统计分析
采用 IBM SPSS Statistics 进行数据分析。使用 Shapiro-Wilk 检验评估数据的正态性。连续变量以均值 ± 标准差或中位数与四分位间距表示，分类变量则以频数和百分比汇总（表 1）。采用 Pearson 或 Spearman 相关分析评估 CSQ 评分、炎症介质与临床指标之间的关联。采用逻辑回归分析评估住院时间延长（>7 天）和重症肺炎（定义为肺实变、胸腔积液、肺不张或呼吸衰竭）的预测因素27。通过构建 ROC 曲线评估模型的区分能力，报告 AUC、敏感性、特异性及 95% 置信区间。采用十折交叉验证评估模型稳健性。缺失数据（<5%）通过中位数填补法处理。建模前对生物标志物数值进行 z 分数标准化。统计学显著性水平设定为 p < 0.05（双侧）（表 2）。
8. 视觉结果与可重复性检查点
足够的BALF定义为灌注生理盐水的回收率≥50%，且外观清晰、无血液。可接受的CSQ给药定义为在入院后72小时内完成，每个领域最多遗漏1个项目。检测运行需通过制造商规定的内部质控标准，方可发布患者检测结果。
本方案提供了一个可重复的框架，用于评估心理压力、炎症介质与儿童临床生物标志物之间的相互作用 肺炎支原体 肺炎并建立实用的质控节点（BALF质量、CSQ时机、检测质控），以支持在各中心可靠实施。
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整体研究设计和工作流程总结于图1。与CRP（AUC = 0.76）和IL-6（AUC = 0.72）相比，LDH在预测严重并发症方面表现出更优的准确性（AUC = 0.89，95% CI：0.83–0.95）。LDH的最佳截断值为450 U/L，其敏感性为82%，特异性为81%。Logistic回归分析证实，LDH ≥ 450 U/L与住院时间延长独立相关（OR = 2.1，95% CI：1.2–3.7）。持续的肺炎支原体DNA载量也预示着病程更长和更高的CSQ评分，凸显了病原体负荷与心理应激之间的相互作用。
该队列的临床特征包括发热（中位持续时间：5天）、咳嗽严重程度（平均评分：4.2 ± 1.1）以及影像学异常（实变、胸腔积液或肺不张）。压力评分与炎症介质显著相关，包括IL-6（r = 0.68，p < 0.001）和CRP（r = 0.59，p ...
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Mycoplasma pneumoniae（MP）肺炎在儿童中是一种异质性疾病，免疫炎症调节紊乱是决定其严重程度和恢复情况的核心因素。这种调节紊乱源于宿主免疫反应与MP毒力因子之间的相互作用，共同影响疾病的病程及对治疗的反应。因此，临床生物标志物成为患者分层、治疗指导和预后评估不可或缺的工具。
C反应蛋白（CRP）是急性期炎症的首要标志物，尽管其非特异性限制了其预测价值。乳酸脱氢酶（LDH）反映组织损伤和缺氧状态，显示出较强的预后意义，与既往研究结果一致。D-二聚体提示内皮功能障碍和高凝状态，与胸腔积液和呼吸衰竭等严重并发症相关。MP-DNA载量可直接反映病原体负荷，但在病原体死亡后仍可能持续存在，限制了其作为独立预后指标的作用28。此外，支气管肺泡灌洗液（BALF）中中性粒细胞比例升高可进一步区分疾病严重程度，提示患者易发生继发性细菌感染29,30。
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作者声明无利益冲突。
我们感谢安徽省儿童医院的临床和护理人员在患者入组和数据收集过程中提供的帮助。同时，我们也感谢参与本研究的儿童及其家庭在整个研究过程中给予的配合。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 儿童压力问卷（CSQ） | 未说明 | 压力的心理测量评估 | |
| CRP 检测试剂盒 | Siemens Healthineers | 11537224 (Atellica CH hCRP2, 720 tests) | C-反应蛋白的测定 |
| D-二聚体检测试剂盒 | Diagnostica Stago | 00515 (STAÂ- Liatest D-Di kit) | 血浆 D-二聚体水平的测定 |
| IBM SPSS Statistics 28.0 版 | IBM Corp., Armonk, NY, USA | 数据分析 | |
| IL-6 检测试剂盒 | Roche Diagnostics | 09015612190 (cobas e 801 pack); 09015612500 (100 tests) | 白细胞介素-6 的测定 |
| LDH 检测试剂盒 | 未说明 | MAK066 (MilliporeSigma LDH 活性检测试剂盒) | 乳酸脱氢酶活性的测定 |
| 儿科用柔性支气管镜（例如，BF-P190） | Olympus | BF-P190（型号/订单号） | 支气管肺泡灌洗液采集 |
| 脉搏血氧仪 | 未说明 | 未提供 | 血氧饱和度的测定 |
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