通过固体表面荧光监测蜂产品中的2,4-二氯苯氧基醋酸

Summary

本研究提出了一种替代传统技术的新方法，用于控制和监测阿根廷中北部蜂产品样本中的2,4-二氯苯氧羧酸。

Abstract

蜜蜂健康对蜂蜜生产和作物授粉至关重要。蜂蜜的生产可能会因使用除草剂而产生负面影响，因为蜜蜂在采集处理过的植物的花蜜和花粉时可能接触到这些化学物质，导致蜂蜜被这些有毒残留物污染。虽然2,4-二氯苯氧基醋酸（2,4-D）设计用于控制阔叶杂草，但它可能侵入花朵并污染蜜蜂的生产，可能影响蜜蜂的健康和生活质量。因此，定期分析蜂蜜以检测除草剂残留，并在必要时采取纠正措施非常重要。本研究提出了一种替代传统技术的新方法，用于控制和监测阿根廷中北部蜂产品样本中的2,4-D。样品在pH=7.0条件下，使用阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）进行调理，系统通过蓝带过滤纸作为固体支撑体，然后通过固相荧光法确定。在最佳工作条件下，检测和定量限分别为0.33 ng/L和0.90 ng/L，线性范围为0.90 x 10³ ng/L至1.13 x 10³ ng/L。新方法的优点包括使用廉价仪器和环保溶剂，低废弃物产生，从而保护了绿色化学的一些原则。

Introduction

蜜蜂健康对蜂蜜生产和作物授粉至关重要。健康的群体依赖于全面的健康管理，包括适当的营养、卫生措施以及疾病预防和治疗。如果蜂蜜生产负责任，不会伤害蜜蜂，因为养蜂人只提取总蜂蜜的一小部分，为蜂群保留了^1,2。

使用除草剂可能会对蜂蜜生产产生负面影响，因为蜜蜂在采集处理过的植物中的花蜜和花粉时可能接触到这些化学物质，导致农药残留物污染蜂蜜。此外，一些除草剂，如草甘膦，会直接影响蜜蜂的发育和行为，降低它们的觅食能力和^生理发育 3,4,5,6。尽管2,4-二氯苯氧基醋酸（2,4-D）除草剂被设计用于控制阔叶杂草，但它可能侵入花朵并污染蜂蜜，可能影响蜜蜂健康和蜂蜜质量 ^7,8,9。

近年来，国内外蜂蜜及其他蜂产品贸....

Protocol

本手稿中没有任何作者对人类参与者或动物进行的研究。

所用设备
光谱荧光测量使用配备150瓦氙灯的PC型光谱荧光仪完成。样品架用于固体表面荧光（SSF）测量。用于2,4维定量的参数如下：λ_em= 580 nm，使用 λ_ext=555 nm（狭缝 3-3），使用固体样品架。

采样与样品处理
这项关于2025年蜂蜜样品生产的研究在阿根廷中北部的圣路易斯、圣胡安、胡胡伊和萨尔塔省进行。分析的样本包括：四种多花蜜、两种蜂胶蜂蜜、纯蜂蜜糖果，以及由蜂蜜、古柯和蜂胶混合物制成的糖果，这些糖果从当地养蜂人处购买。研究的蜂蜜为新鲜蜂蜜，生产后不到一周内从蜂箱中提取，以避免因不同机制导致2,4-D的降解。所有样本均被采集到新的无菌容器中，并立即运送到实验室。它们会在4-8°C的黑暗环境下保存，直到分析。固体焦糖用研钵和杵均质化;其内容物被稀释在5毫升超纯水中，从该溶液中提取了0.5微升。

方法论
加入0.5微升或1微升2,4-D（1.23 ng/L和3.49 ng/L）、100微升样品、250微升SDS（1 x ^10-4 mol/L）和....

Results

以下结果表明了对影响一般程序、优化及其最佳工作条件的各项变量的研究，是如何逐步进行的。

2,4维频谱表征
2,4维特征分析通过紫外可见光谱和分子荧光进行，观察到λ_em=580 nm时荧光强度的最大值，使用λ_ext=555 nm（狭缝3-3; 图1）。通过提高荧光信号浓度，实现了直接定量（见图2），显示出对荧光信号的提升效应。强调直接分析物定量的细节非常重要，因为它具有多重优势，即：作和计算简便、分析可靠性和鲁棒性，相较于间接方法，后者通过评估分析物如何改变另一种荧光物质的荧光信号来评估分析物。在这种情况下，荧光信号与2,4-D的浓度直接相关，便于作计算并简化作任务。

Discussion

由于满足不断增长的人口需求，阿根廷及世界其他地区除草剂的密集使用呈指数级增长。如果对此类产品的使用进行适当、理性且定期的监控，就不会损害预期的益处，也不会对整体环境产生负面影响。2,4-D在全球范围内被广泛使用，许多研究表明该除草剂能诱导非靶向生物体发生改变。因此，持续评估除草剂对不同生态系统和生物（如蜜蜂）可能构成的风险至关重要，35,36,37,38,39,40。

Almer-Jones于1964年进行^{的研究显示，} 在空中施用2,4-D防治豚草后，该地区数百个蜂箱发生了成蜂.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
2,4-D	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯	49083
醋酸/醋酸酯	马林克罗特化学厂及nbsp;
蓝丝带滤纸及nbsp;	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯	WHA1001929	2-5 和 mu;孔径12.5厘米，nbsp;
醋酸纤维素膜	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯		0.45 & mu;孔径为m，孔径为47毫米
六二环三甲基溴化物（HTAB）	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯	H5882
盐酸	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯	1.09063
Immobilon（+）膜	巴西圣保罗米利波尔	HATF04700	0.45 & mu;孔径为m，孔径为47毫米
混合酯膜	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯		0.45 & mu;孔径为m，孔径为47毫米
尼龙膜及nbsp;	巴西圣保罗米利波尔	Z290793	0.45 & mu;孔径为m，直径47毫米
pH计（猎户座膨胀离子分析仪）及nbsp;	猎户座研究，美国马萨诸塞州剑桥	EA 94型号。
二氢磷酸钾	阿根廷布宜诺斯艾利斯的Biopack;	2000168900
邻苯二甲酸钾	默克公司
十二烷基硫酸钠	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯	11667289001
氢氧化钠	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯	S2770
四硼酸钠	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯	221732
光谱荧光法	岛津	RF-5301及nbsp;	配备150瓦氙气灯和1.00厘米石英电池
三基（羟甲基）-氨基甲烷	Sigma-Aldrich，美国圣路易斯	77-86-1