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土壤有机质分解速率对温度的响应：温度梯度模块的构建与应用

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DOI：

10.3791/69785

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2026年1月30日

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1Soil Biology Group, Wageningen University & Research, 2Soil Chemistry Group, Wageningen University & Research, 3Wageningen Technical Solutions, Wageningen University & Research, 4School of Science, University of Waikato

本文内容

摘要

我们介绍一种温度梯度模块，并详细说明其构建和使用方法。该模块可提供22个离散温度点，在用户定义的0至90 °C范围内呈线性分布。利用该装置采集的数据可用于检验并发展关于土壤有机质分解速率温度响应的新理论。

摘要

土壤是地球上最大的碳（C）库，其碳储量几乎是大气中碳含量的两倍。气候变化引起的温度升高可能会增强土壤有机质（SOM）的分解，从而向大气中释放二氧化碳（CO2），进而对气候变化产生正反馈效应。这就提出了一个问题：我们如何界定SOM分解速率对短期温度变化的响应？能否利用这些数据拟合地球系统模型中具有机理基础的方程，以用于气候预测？迄今为止，大多数研究集中在不同离散温度下的实验室土壤培养实验。然而，这种方法无法获得详细的温度响应曲线，而这类曲线对于检验该领域最新进展（如大分子速率理论，MMRT）所提出的新假设至关重要。本文介绍了一种经过改进和优化的温度梯度模块，详细说明了其构建过程，并提供了该装置使用的完整操作说明。该温度梯度模块为一个铝制块体，设有四排共22个独立孔位，可同时孵育88个微宇宙系统（60 mL 小瓶）。模块一端冷却、另一端加热，形成线性温度分布，在0至90 °C范围内可根据用户设定提供22个离散温度点。经过3.5小时的孵育后，分别测定88个微宇宙系统中每个系统的CO2生成量。结果表明，该模块能够实现用户设定的温度梯度，并有助于构建SOM分解的温度响应曲线。此外，通过该装置获取的数据可用于检验和发展有关温度变化对SOM分解速率影响的新假设与理论，这一研究方向在当前气候变化背景下正变得日益重要。

引言

大气中二氧化碳（CO2）浓度的升高导致地球温度上升1。这一现象最早由尤妮斯·富特（Eunice Foote）于1856年报道，她进行了一项简单却具有开创性的实验2。她将一个圆柱形容器充满环境空气，另一个充满CO2，并记录了两个容器内的温度变化1。实验结果明确显示：CO2浓度较高的容器温度更高，证明了大气中CO2增加所产生的增温效应1。这一发现对气候变化具有重要意义。如今，富特早期的洞察力仍在持续影响当代气候科学，指导着关于不断上升的CO2水平如何影响全球变暖及各类生态系统的科学研究。

在表层一米范围内，土壤储存的碳（C）量接近大气中碳量的两倍，在全球碳循环中发挥着关键作用3。影响土壤碳储量的一个关键过程是土壤有机质（SOM）的分解，该过程决定了碳以多快的速率重新释放到大气中4,5。由气候变化引起的年平均气温升高可能促进土壤有机质（SOM）的分解，从而加快CO2向大气的释放6,7。这构成了对气候变化的正反馈机制，特别是当温度升高通过SOM分解加速碳损失的程度超过其对光合作用固碳输入的促进作用时6。尽管该领域已有大量研究，但所谓陆地-碳-气候反馈的强度和方向仍存在广泛争议8,9,10,11。这种不确定性主要源于对SOM分解速率温度响应机制的基础知识仍存在空白。弥补这些知识缺口对于改进地球系统模型、并纳入基于理论的SOM分解速率温度响应表征至关重要。

土壤有机质（SOM）分解速率对温度的响应通常用Q10值和阿伦尼乌斯方程来表示。Q10 值定义为温度每升高 10 °C时，反应速率所乘的倍数因子。尽管其有效性面临诸多质疑12,13,14,15，Q10仍成为比较不同处理方式和不同类型土壤温度响应的默认方法。阿伦尼乌斯理论认为，诸如土壤有机质分解等过程的速率随温度升高呈指数增长16。然而，实际的酶活性通常表现为单峰曲线，具有明确的最适温度，并在更高温度下下降17,18,19。基于阿伦尼乌斯的方程试图通过假设在超过最适温度后酶发生变性来解释这种下降趋势6。但酶变性发生的温度通常高于土壤中常见的温度范围，这表明酶在发生变性之前已达到其热最适点19,20。此外，简单地在阿伦尼乌斯方程中加入第二个函数以反映因变性导致的呼吸速率下降，并不能估算出拐点温度——即呼吸速率变化率达到最大值时的温度21,22。因此，在通常观测到的土壤温度范围内，基于阿伦尼乌斯的方程无法充分描述实际测量得到的土壤有机质分解速率整体温度响应曲线的典型形态14,23。

为解决阿伦尼乌斯理论的局限性，研究人员已开发出多种方程以描述生物过程对温度的敏感性；然而，其中很少有基于生物学理论构建的方程被应用于土壤研究24,25。在基于生物学机制的方法中，大分子速率理论（MMRT）通过引入生物大分子（如酶）的热力学特性，克服了阿伦尼乌斯方程的部分局限性26。类似地，酶促辅助阿伦尼乌斯理论（EAAR）则考虑了酶在降低反应活化能过程中随温度变化的作用24。这两个方程均已成功应用于土壤及微生物中生化反应温度响应的研究17,24,27,28。这些方程为理解土壤有机质分解及其反应步骤的温度响应机制提供了重要的理论依据。然而，由于实验上的挑战，这些方程的广泛应用和参数化仍受到限制。

野外和实验室研究在理解土壤有机质（SOM）分解速率对温度响应方面各有优势和局限性。野外实验能够为SOM分解速率的长期温度响应提供有价值的见解。然而，由于自养呼吸、水分变化和底物可利用性等混杂因素的存在，解释野外测得的CO2通量数据具有挑战性29,30,31,32,33。尽管这些相互作用对于量化真实世界中的过程至关重要，但此类研究通常关注的是生态系统的长期响应，而非短期机制过程的测量。理解短期温度响应对于参数化由近期理论（如MMRT和EAAR）所定义的方程至关重要，而在这方面，实验室研究起着关键作用。许多实验室研究通常受到底物耗竭的混杂效应影响，这种效应会随着培养时间及温度处理的升高而加剧 34,35,36。此外，大多数实验室实验仅使用少数几个温度处理水平37,38,39,40，导致只能拟合简单的指数方程或计算Q10比值，而无法应用需要在更多离散温度下测定速率的更先进方程41。为解决这些问题，迫切需要开发新的实验方法，以实现对更宽温度范围内SOM分解速率的精确测量，从而支持针对温度响应的SOM分解理论的严格检验与进一步发展。

本文介绍了温度梯度模块的构建与使用方法，该模块不仅解决了当前实验中的局限性，还提供了一项前沿研究，用于展示土壤有机质（SOM）分解对温度的短期响应。本文所提出的装置设计是在Thomas等人（1963）42首次建立、后由Robinson等人（2017）41改进的方法基础上进行的优化。主要改进之处包括：1）优化了冷却系统；2）通过将模块连接至CO2分析仪以直接测定CO2浓度，从而缩短了运行时间；3）消除了实验过程中转移样品瓶的需要。尽管先前的研究21,41,43对温度梯度模块进行了较为宽泛的描述，但其详细设计、构建方法和测试过程均较为简略，限制了其他研究人员对该技术的复现与应用。本文提供了该装置在设计与构建方面的完整细节，并展示了多个测试结果，以验证该系统在不同土壤样品中的正常功能与适用性。

方案

本文介绍了温度梯度模块的详细构建过程及其深入应用。所有材料及其相应规格详见补充表1和材料表。该温度梯度模块的构建与组装成本约为20,000欧元（不含气体分析仪费用）。该温度梯度模块以尤妮斯·富特（Eunice Foote）的名字命名为“Eunice”。

1. 温度梯度模块的构建

  1. 参见图1了解温度梯度模块的结构设计。
  2. 铝块的加工
    1. 将原始铝块固定在通用铣床上。将每个孔的尺寸和位置输入机床的软件中。图2标明了装置中各孔的位置和直径。
    2. 钻加热棒安装孔。在铝块的一端，钻两个直径为16 mm、深度为133 mm的孔。使这两个孔的中心距离上边缘25 mm，距离侧边缘36.25 mm（图2）。
    3. 加工冷却剂流通的城堡形通道。在铝块的另一端，加工一段长度为180 mm的城堡形通道（图3A）。确保该通道厚度为16 mm，深度为140 mm。在城堡形通道区域内再钻12个孔，每个孔直径为10 mm，深度为140 mm。具体孔位分布参见图3B。
      注：设计城堡形通道是为了增加冷却剂与铝块的接触面积，12个孔的作用是防止冷却剂溢出。
    4. 制作城堡形通道的密封垫片。切割一块铝制垫片，覆盖在城堡形通道上方，用于将冷却剂密封在铝块内部，防止泄漏。
    5. 钻冷却系统连接孔。在铝块的前后面各钻一个直径为15 mm的孔，用于连接冷却装置（图4）。孔的中心位于深度75 mm处。前面的孔中心距离边缘18 mm，后面的孔中心距离边缘162 mm。确保这两个孔分别连接城堡形通道的起始端和终止端。
    6. 钻温度传感器安装孔。钻8个直径为3 mm、深度为150 mm的孔。这些传感器位于铝块中部，并沿其长度方向均匀分布。第一个传感器孔的中心距离边缘940 mm，最后一个传感器孔的中心距离边缘205 mm。
    7. 钻60 mL样品瓶安装孔。共加工88个孔，每个孔直径为28 mm，高度为144 mm。这些孔在铝块上均匀分布，第一个和最后一个样品瓶孔的中心与第一个和最后一个传感器孔的中心对齐。
  3. 保温材料准备
    注：保温材料采用厚度为40 mm的聚异氰脲酸酯。
    1. 使用圆锯将保温材料以135°角切割成梯形。为覆盖铝块的四个长边，将保温材料裁成1080 mm × 230 mm的矩形，并将该矩形的四边均以135°角斜切，以便紧密贴合铝块。其中一侧将粘接到铝块盖板上。使用铝箔胶带包裹盖板部分的保温材料，以提供保护。
    2. 对于铝块的两个短边，将保温材料裁成230 mm × 230 mm的正方形，并将每一边以135°角斜切，以确保贴合紧密。
  4. 连接冷却系统（图5）
    注：本装置所用冷却系统结构紧凑且节能高效，通过循环天然冷却剂实现制冷，最低温度可达-30 °C。
    1. 将弯管接头和软管接头安装到铝块上（图5C），然后连接将冷却剂导向冷却装置的软管。
    2. 用柔性保温材料完全包裹软管，以维持冷却剂的设定温度。裁剪柔性保温材料并紧密套在软管上，使用粘合密封剂固定保温层。
  5. 将加热棒和传感器插入铝块，检查其安装是否合适（图5D）。
  6. 参见图5了解上述各步骤的总体示意图。

带有铝块、隔热材料和不锈钢外壳的冷却室组装示意图。
图1：温度梯度模块的结构设计与组成部分。 请点击此处查看此图的放大版本。

传感器分布示意图；加热棒、小瓶、冷却剂布局；标注尺寸。
图 2：温度梯度模块，标示用于多种用途的孔位位置与直径。 字母“S”表示传感器。尺寸单位为毫米（mm）。 请点击此处查看此图的放大版本。

显示微通道设计及标注尺寸的流体动力学示意图；工程研究。
图3：用于冷却剂的城堡图案设计与尺寸测量。（A）城堡图案的厚度、长度和直径测量，以及（B）用于防止溢流的12个孔的位置与间距。尺寸单位为毫米（mm）。请点击此处查看该图的放大版本。

冷却装置示意图；显示小瓶、传感器、加热棒深度的尺寸；连接规格。
图4：温度梯度模块的侧视图，显示每个孔的深度及冷却连接位置。 字母“S”表示传感器。尺寸单位为毫米（mm）。 请点击此处查看此图的放大版本。

金属加工过程；数控设备设置、表面钻孔、数据监测、结构测试。
图 5：温度梯度模块构建示意图。（A）钻孔以放置 60 mL 样品瓶；（B）在铝块上构建隔热材料层；（C）冷却剂的连接与封装；（D）将加热棒和传感器插入模块中。请点击此处查看该图的放大版本。

2. 构建不锈钢外壳。

  1. 将不锈钢切割成尺寸为 1080 mm x 230 mm x 230 mm 的长侧板，短侧板切割成 230 mm x 230 mm 的尺寸。确保预留冷却软管、传感器、加热棒和把手的安装孔。
    注意：其中一个长侧板用作模块的盖板。
  2. 将把手、盖板铰链和锁扣通过焊接方式连接至不锈钢外壳。

3. 电子单元的构建

注意：电子单元必须由合格的电工进行组装。此处概述的方案已根据荷兰及欧盟法律制定。以下是所用主要组件的简要说明；详细的接线说明见补充文件1。

  1. 设计电子电路图（图6）。
  2. 安装接线盒。
    注意：安装接线盒用于保护电气元件和连接部分免受外部物体和损坏的影响。
    1. 使用安装螺钉将三个接线盒牢固地固定在不锈钢外壳上。
    2. 准备电缆入口。在主接线盒中，敲出六个用于电缆格兰头的孔；在两个较小的接线盒中，各敲出两个用于电缆格兰头的孔。其中一个接线盒用于安装双路开关，另一个用于加热棒电缆的连接。
      注意：双路开关用于开启和关闭设备，即向微型断路器供电。
    3. 在主接线盒顶部钻一个孔，用于安装绿色LED指示灯。
      注意：该LED灯用于指示设备已开启，且所有组件均已通电。
    4. 裁剪并安装DIN导轨至主接线盒内。然后标记出三个用于固定DIN导轨的螺钉孔位置，并将DIN导轨安装到主接线盒中。
      注意：DIN导轨用于方便电气元件的安装。建议将其大致安装在主接线盒的中央位置。
  3. 电气元件安装。
    注意：参考图7，依次安装各个电气元件。
    1. 找到用于安装双路开关的接线盒。拆下开关的上半部分，确定需要穿过盖板的部分。在开关接线盒的盖板上标记并钻孔，使开关能够紧密贴合并固定在盖板上。请参照开关的安装说明进行操作。
    2. 在主接线盒中，将PE/GND端子安装在DIN导轨上，然后将微型断路器（MCB）安装在DIN导轨上。
      注意：PE/GND端子用作终端挡块。MCB为微型断路器，在发生故障或短路时作为主要安全断路装置。当MCB闭合时，会向AC/DC电源模块供电。
    3. 在DIN导轨上安装两个三联贯通端子，并使用两个双联桥接端子将它们在贯通端子的顶部和底部连接起来。
      注意：使用贯通端子连接两个以上的导线，并利用桥接件将多个贯通端子连接在一起。使用冷压端子确保连接牢固可靠。
    4. 按照图示将直流电源模块安装在DIN导轨上。
      注意：本研究使用了24 V、2.5 A的AC/DC电源模块，该模块将交流电转换为24 V直流电，以满足其他组件的输入电源需求。
    5. 按照图示将温控器安装在DIN导轨上。注意不要丢失电缆连接模块（图7中为绿色）。
      注意：温控器用于控制和监测温度。它是一个基于网页浏览器的软件系统，需输入设备的IP地址进行登录，以设定加热棒的温度并记录数据。该系统连接至局域网（LAN），以便校园内任意计算机均可连接设备。
    6. 按照图示在DIN导轨上安装七个三联贯通端子。使用三个五联桥接件，将前五个贯通端子在顶部、中部和底部的贯通端子位置连接在一起。
    7. 使用两个五联桥接件，将最后两个贯通端子在顶部和底部的贯通端子位置连接在一起。
    8. 按照图示在DIN导轨上安装一个保险丝座。
      注意：使用630 mA保险丝，以在发生短路或电源浪涌时保护设备元件免受损坏。
    9. 按照图示在DIN导轨上安装两个单端子连接单元。
    10. 按照图示将固态继电器安装在DIN导轨上。
      注意：固态继电器用于控制加热棒的开启和关闭。
    11. 安装一个PE/GND端子作为终端挡块。
  4. 有关电线连接步骤，请参见补充图1。
  5. 有关电子单元的整体结构，请参见图7。

温度控制电路图；包含继电器、恒温器、传感器以及加热元件的接线。
图6：电子单元的示意图。 电线颜色如下：棕色 = 交流电压（VAC）火线，蓝色 = 交流电压（VAC）零线，黄绿色 = 接地（GND），红色 = 直流电压（VDC）正极，黑色 = 直流电压（VDC）负极。数据线为白色，但为了便于识别，本图中以绿色显示。 请点击此处查看该图的放大版本。

控制系统示意图；自动化电气布线设置；工业设备配置。
图7：连接至温度梯度模块的电子单元主接线盒。请点击此处查看此图的放大版本。

4. 组装温度梯度模块

  1. 使用粘合密封剂将隔热材料粘接到不锈钢外壳上，静置过夜使其干燥。
  2. 将传感器和加热棒插入铝块内部。
  3. 将铝块放入不锈钢外壳中，引导电缆通过各自的孔洞，以便连接至电子控制单元。
  4. 使用铰链将带隔热层的不锈钢盖子固定到铝块上。
  5. 将冷却系统连接至铝块。
  6. 将温度梯度模块放置于实验室中，确保所有连接牢固且功能正常（图8A）。确保实验室配备至少2米长的稳固实验台，并具备以太网和电源接口。为获得最佳运行效果，建议实验室环境温度可控。

5. 冲洗系统的构建

注意：冲洗管线的设计目的是在孵育开始时使每个小瓶中的 CO2 浓度标准化。请参考图8B，以查看带有温度梯度模块的冲洗系统示意图。

  1. 将直径较小的软管剪成10段，每段长度为15 cm。将针头连接到10根小管的每一端。
  2. 将直径较大的管子剪成一段，长度为1 m。在一端装上塞子，并将另一端连接至实验室的环境空气导管。
  3. 沿大管长度方向每5 cm测量并标记一次。在每个标记处，插入连接有小管的针头。

色谱系统；相分离装置；蛋白质纯化设备示意图。
图8：温度梯度模块。（A）实验室中已关闭盖板的温度梯度模块，以及（B）打开盖板并展示冲洗系统的状态。请点击此处查看此图的放大版本。

6. 气体分析仪进样单元的描述

注意：该装置的气体分析仪可直接测量60 mL玻璃小瓶中的CO2浓度。该气体分析仪的检测范围为0 ppm至10000 ppm，在400 ppm时精度为0.04 ppm。气体分析仪配备流量降低套件，测量流速为1.17 mL/s。

  1. 通过添加一个外部的 0.45 µm 滤器和一支进样针，对气体分析仪的进样管进行改装（图9）。
    ​注意：添加 0.45 µm 滤器是为了额外防止水分进入气体分析仪。所用针头规格为 18 G，尺寸为 1.2 mm × 25 mm。针头的选择基于其直径，以尽量减少对 60 mL 玻璃小瓶橡胶隔垫的损伤。
  2. 将气体分析仪的进样管连接至仪器的进样入口。
  3. 在进样管末端安装一个公型鲁尔锁接头。使用内径为 1/4 的柔性管，将鲁尔锁接头固定在进样管上。然后，使用柔性管将 0.45 µm 滤器连接，确保整个系统密封不漏气。
  4. 在 0.45 µm 滤器的螺纹端，使用公母接头将针头牢固连接。

带有试管、鲁尔接头、滤器、连接件和针头的注射器过滤装置；流体纯化方法。
图9：气体分析仪进样单元。（A）气体分析仪的进样管。（B）一个外置的0.45 µm滤器和一支进样针。请点击此处查看该图的放大版本。

7. 孵育处理方案的设计

  1. 选取土壤样品。
    注意：本论文所选的土壤样品用于展示该方案的功能性，并体现使用此装置可采集的数据类型。
  2. 选择块状孵育的温度范围，该范围由用户定义，介于 0 °C 至 90 °C 之间。
    注意：本论文采用的温度范围为 4 °C 至 60 °C。若系统使用超出此范围的温度，操作高温或零下温度时应遵循实验室安全规程。
  3. 规划样品的随机化方案。
    注意：本论文中，样品在温度区块内（位置 A-D）进行随机化。尽管本研究最初尝试在孵育后随机化样品读取顺序，但这在读取过程中引入了标签错误。因此，优先采用一致的测量顺序（即从高温到低温）。

8. 准备样品进行预孵育

注意：为了减少土壤微生物群落的变化，土壤样品最好在采集后尽快直接进行新鲜培养。然而，根据实验条件和物流限制，土壤样品在培养前可能需要风干以用于运输和储存。本论文中，已建立标准化的风干程序，用于培养前的样品处理。

  1. 使用2 mm筛子对新鲜土壤进行过筛。将过筛后的土壤在40 °C下干燥24小时。此风干土壤可保存至后续处理。
  2. 将土壤样品放入金属罐中并充分混匀。将混合均匀的土壤分装至22个预先标记好的60 mL玻璃瓶中。使用称量纸，向每个60 mL瓶中加入3 ± 0.03 g土壤。
  3. 使用移液器根据漏斗法将土壤调节至目标持水容量（WHC）。调节至目标%WHC后，记录每个瓶的准确重量。
    注意：本研究中所选土壤样品调节至60% WHC。
  4. 使用棉塞封口玻璃瓶，以允许与环境空气交换。
  5. 将样品在20 °C的温控实验室中预培养10天。

9. 预孵育期间调节持水力（WHC）

  1. 经过7天的预培养后，记录小瓶的重量，并调整至目标持水量（WHC）。使用移液器精确操作，根据需要添加水。使用公式1计算每瓶需添加的水量。
    需添加的水量 = weightT0 (g) - weightT7 (g)(1)
    其中weightT0表示初始时刻小瓶的重量，weightT7表示培养7天后小瓶的重量。

10. 启动温度梯度模块

注意：冷却系统通过仪器前方的面板进行控制，加热系统则通过仪器后方的开关和在线界面进行控制。

  1. 按照制造商的说明开启冷却系统。按下电源按钮一次（项目 A， 补充图2）。确保温度数值的数字 °C 转速（rpm）应与消息一同闪烁 关闭这表明系统已开启但当前处于非活动状态。
  2. 通过按压启动泵 OK/泵 按钮（项目 E， 补充图2）并按下 + 或 - 按钮（项目 G 和 F， 补充图2) 将转速设定为 3500 rpm。在启动冷却系统之前，检查液体液位是否显示绿灯（项目 L， 补充图2）。如果液位显示为红色，表示冷却剂不足。请联系实验室管理员或参阅制造商使用手册。
  3. 按下按钮启动冷却系统 温度 （项目 B， 图 S2）并按下 + 或 - 按钮（项目 D 和 C， 补充图2) 以设定温度 °C 至 -1.6 °C设定点（项目 O， 补充图2) 应处于闪烁状态，这表示冷却系统尚未达到设定温度。
    注意：冷却系统的设定温度与金属块内部的实际温度并不相同。
  4. 转动模块后方的开关 开启 (补充图3). 确保绿灯亮起，这表示加热系统已开启，但温度控制未激活。
  5. 要启动加热系统的温度控制，请在浏览器中输入IP地址10.75.117.227，打开温度梯度模块的在线界面。使用提供的用户名和密码登录，以查看每个传感器的温度补充图4）。该界面显示传感器数值，每3秒更新一次。
  6. 调节 设置加热温度 到 60.00 °C 通过按压 上/下 箭头。按下 开启 启动加热系统的按钮。
    注意：组织块需要大约一小时才能达到稳定的线性温度梯度。
  7. 开启模块十分钟后，检查加热控制器以确保其正常工作。当每个传感器的温度不同时，表明仪器正在正常运行。

11. 设置气体分析仪

  1. 按照制造商的说明书，按下电源按钮一次，将气体分析仪开启。等待45分钟，使仪器预热。
  2. 将计算机连接到气体分析仪的Wi-Fi网络，该网络由唯一的主机名（TG15-XXXXX）标识，并使用密码进行连接。
  3. 在网页浏览器中输入主机名或IP地址，然后按回车键进行连接。接着，打开设置部分并选择降低流速。如果该选项已处于选中状态，则无需在软件中进行任何更改。

12. 准备上样

  1. 在开始孵育前1小时，按照方案第6节调整WHC。
  2. 在将样品放入金属块前10分钟，检查加热控制器，确保其已达到设定温度。
  3. 打开实验室内的环境传导装置。
  4. 连接吹扫系统，并将气体分析仪连接至计算机。

13. 收集空白样本

  1. 按照以下两个步骤记录空白对照：
  2. 将冲洗管路连接至气体分析仪的进样系统，直接记录冲洗管路中的 CO2（单位：ppm）。
  3. 将五个 60 mL 玻璃小瓶放入空瓶架中。每个小瓶中插入一根冲洗管路。1 分钟后取出冲洗管路并盖紧瓶盖。等待四小时后，测定各小瓶内的 CO2 含量。

14. 在温度梯度模块中加载样品

注意：在每个模块中，您将有模块位置 A、B、C、D。请将同一样本始终放置在所有模块的相同位置（图10）。例如，样本编号 175 从模块 1 至 22 均置于位置 A，样本编号 45 从模块 1 至 22 均置于位置 B，依此类推。

热梯度方框图、温度研究装置示意图，标注冷端至热端，热分析。
图10：试管在模块内的位置。 字母“S”表示传感器。请点击此处查看此图的放大版本。

  1. 打开模块，将计算机和灌注系统放置在模块盖的顶部（图11将装有样品的盒子放置在可移动的桌面上。
    注意：佩戴 KN95 口罩以最大限度减少 CO2 样本间的变异性。这可以防止 CO2 防止呼吸作用污染样品瓶。
  2. 准备一个电子表格，用于记录每个单独小瓶的关闭时间（小时：分钟），同时可视化气体分析仪的时间。
    注意：每个小瓶的关闭时间将用于数据处理过程中的速率归一化。
  3. 开始将样品加载到温度梯度模块中。每次处理八个样品。将未加盖的样品从较冷端开始依次放入模块中，即前八个样品为 A1、B1、C1、D1、A2、B2、C2、D2。
  4. 将冲洗管放入8个样品瓶中，等待1分钟。取出冲洗管后立即盖紧瓶盖。在电子表格中记录每个样品瓶盖盖的确切时间。
    注意：将冲洗管小心插入每个小瓶中，确保其不与土壤接触。这可以防止交叉污染，并有助于保持样品的完整性。
  5. 当前八个样品管正在冲洗时，将下一批样品加入温度梯度模块中。例如，正在冲洗的样品为：A1、B1、C1、D1、A2、B2、C2、D2；需加入的下一批样品为：A3、B3、C3、D3、A4、B4、C4、D4。
  6. 将冲洗管路放入下一批样品中。
  7. 重复这些步骤，直至样品块完全加载。
  8. 封闭模块，并从最后一个样本封闭的时刻起等待3.5 h。
  9. 将气体分析仪设置为 休眠模式，通过在3秒内快速按下电源按钮两次。
  10. 转动 关闭 使用墙上的红色阀门进行冲洗系统操作。

计算机监控下的样品分析实验室设置；试管已按处理流程排列。
图11：温度梯度模块加载设置。请点击此处查看此图的放大版本。

15. 从 CO2 测量开始

  1. 将气体分析仪从 休眠模式 通过按压 功率 按钮，在开始 CO 前 1 h 按下一次2 测量。请按照第8节所示检查分析仪设置。
  2. 打开冲洗系统，将气体分析仪放置在可移动台面上（图12).
    注意：移动台的高度必须足以使气体分析仪的进样系统能够触及所有样品。
  3. 检查气体分析仪的诊断部分（补充图5）。确保仪器所有组件的状态均为绿色。此处有两种可能：
    1. 如果所有项目均为绿色，则开始分析。
    2. 如果出现红色或黄色组件，请查阅气体分析仪使用手册，必要时寻求技术支持。若错误已排除，则继续进行 CO2 测量。如果错误未被纠正，则停止实验。
  4. 打开气体分析仪的图表部分以查看实时测量结果。请注意，仪器会持续测量 CO2 从空气中。
    注意：测量显示延迟约 3-5 秒。
  5. 孵育3.5小时后，开始测定样品，从较高温度的样品开始。例如，首先读取的样品为：A22、B22、C22和D22。
    注意：在高温下测量样品时需佩戴 KN95 口罩 <15 °C这将降低数据中的噪声。
  6. 将分析仪的进样针连接至样品间的冲洗管路，以便于数据清洗。
  7. 屏幕上方有一个 备注 在气体分析仪软件中设置功能。每次测量样品时，创建一个 独特 和 简单 备注：切勿忘记点击 备注 每次运行样品前。
    注意：使用样品的唯一编号或唯一 ID 作为备注。如果备注中出现错误，请记录样品测量的时间。例如，记录注射延迟的情况、备注提前或延迟结束等信息。
  8. 将针头插入60 mL样品瓶中，持续20 s。20 s结束后，将针头从瓶中取出。
    注意：若将针头留在60 mL小瓶中超过38秒，气体分析仪将出现压力问题。请避免此情况，否则气体分析仪会停止工作数分钟，直至压力重新稳定。
  9. 使用气体分析仪检测样品及五个空白对照的操作步骤如下：
    注意：按下 备注 使用气体分析仪在线软件中的按钮来开始和结束备注。
    1. 在 hh:mm:00 开始 REMARK。
    2. 在hh:mm:10将针头插入小瓶中。
    3. 在hh:mm:30时将针头从药瓶中取出。
    4. 停止 REMARK 时间：hh:mm:45。
  10. 更换 0.45 µm 每分析16个样品后，更换连接至分析仪进样针的过滤器。该过滤器用于捕获水分，防止分析仪内部滤膜堵塞。
  11. 对所有样品重复上述步骤。

用于化学分析的台面上配有便携式光谱设备的实验室装置。
图12：将气体分析仪放置在可移动的实验台上。请点击此处查看此图的放大版本。

16. 从温度梯度模块中卸载样品

  1. 逐一从样品块中取出样品，并放入盒子中。遵循以下选项之一：
    1. 在测量 CO2 的同时卸载样品。
    2. 在完成最后一个 CO2 样品测量后卸载样品。
      注意：根据样品块孵育后后续分析的要求或实验室工作时间安排，选择上述两种选项之一。例如，步骤 16.1.1 可能会改变部分样品的孵育时长，从而影响后续分析结果。实验室的工作时间（如开放和关闭时间）也可能成为限制因素。
  2. 对样品进行处理并储存，以备后续分析。
    注意：本实验中，全部 88 个样品在样品块孵育后均被保存。使用刮铲将整个样品从 60 mL 玻璃小瓶转移至预先标记好的塑料袋中。

17. 下载数据

  1. 要提取气体分析仪收集的数据，请登录气体分析仪的在线软件。点击设置，然后点击下载图标。
  2. 选择第一个和最后一个样本测量的具体时间。点击下载。
  3. 打开一个新的电子表格，选择打开文件。将文件搜索类型更改为所有文件 (*.*)，并查找上一步中保存的文档。新窗口将打开，然后选择完成。

18. 关闭仪器

  1. 使用电源按钮或软件界面关闭气体分析仪。若通过按钮关闭仪器，请按下 关闭电源 5 秒内在按钮上点击三次
  2. 转动 关闭 冷却系统。按下 锁定 （项目 I， 补充图2）以及 OK/泵 按钮（项目 E， 补充图2）。白噪声应停止。待白噪声完全消失后，按下 关闭 底部
  3. 转动 关闭 加热系统。使用仪器后方的开关关闭温度梯度模块控制系统。确保绿色指示灯熄灭（补充图3).

19. 将 CO2 ppm 转换为每小时每千克土壤中以 µg C 表示的呼吸速率

  1. 将气体分析仪数据导入后处理软件（我们使用了 R），并提取以下变量：REMARK、TIME、CO2，和 H2O.
  2. 创建一个新列以提取感兴趣的秒数，具体从 >30 秒至 <35 s
  3. 移除任何与压降相关问题的观测数据。在实验过程中，压降可能导致略微偏低的 CO2 读数低于预期。这些轻微下降（比前一个或后一个值低3%至5%）并非CO₂的真实变化，而是由压力下降引起的人为误差（错误）。因此，应去除CO2 与前一次或后一次心输出量相比略有下降的值（约下降 3-5%）2 值
  4. 计算平均 CO2 浓度（ppm）用于其余数据点。对每个样品，减去五个测定空白值的均值。
  5. 将实验室数据导入后处理软件（例如 R），并提取以下变量：REMARK、干土重量和关闭时间。
  6. 将 CO 转化为2 分析仪测得的 ppm 值 µg 每克土壤的碳含量，应用公式2：
    土壤CO2计算公式；与浓度、压力和温度相关的μgCO2/g土壤
    其中 CO2 气体分析仪测得的浓度以 ppm 表示；CO2 分子量为 44.01 g·mol-1；P 为大气压，等于 1，单位为 atm；R 为通用气体常数，等于 0.082058，单位为 atm·mol-1·K-1；顶空体积根据60 mL玻璃小瓶的顶空体积计算，单位为mL；T为仪器内部假设温度，等于293.15，单位为K；干土重量单位为g。
  7. 然后，除以以小时表示的孵育时间，并乘以1000以将土壤质量从克转换为千克。
  8. 最后，转换 µg CO2 到 µg 使用CO的分子量计算碳含量2 和 C。这将得到以 µg 每小时每千克土壤的摄氏度
  9. 保存或导出处理后的数据以供进一步分析。

结果

模块温度的稳定性和分布
在本方案的开发过程中，我们测试了模块内部温度的线性度和时间稳定性。开启制冷系统和加热器后，模块的初始化时间约为一小时，在此期间，八个均匀分布的温度传感器中的大部分均达到目标温度，并在出现短暂过冲后保持恒定（图13A）。在此阶段之后，八个传感器记录的温度证实了铝制模块沿长度方向具有理想的线性温度分布（图13B）。

温度与时间及距离的关系图；传感器数据分析；孵育过程；相关性图。
图13：温度梯度模块内部的线性度与时间稳定性。（A）孵育期间模块内部温度的时间稳定性，以及（B）孵育开始时传感器记录的温度。请点击此处查看该图的放大版本。

模块温度与土壤温度
我们测试了模块内土壤样品达到八个传感器所记录温度所需的时间（图14）。在本研究中，我们测量了模块内八个不同位置的土壤样品温度，这些位置靠近传感器。传感器位于模块内部，并已预先稳定至目标温度。根据上述方案，当模块温度稳定后，将土壤样品放入模块中。本次测试使用了与模块分离的额外传感器。每次使用15 g土壤，并确保传感器探头与土壤完全接触。土壤样品保持敞口状态，每分钟记录一次温度，持续30分钟。测试过程中，模块轻微闭合，以尽量减少温度波动，并尽可能模拟实际使用条件（完全闭合）。我们发现，土壤样品大约需要12分钟才能达到目标温度并趋于稳定。考虑到培养时间至少为3.5小时，我们认为该稳定时间是可接受的。此外，我们评估了模块培养12分钟后土壤温度的线性关系。结果表明，土壤温度呈现良好的线性关系，与八个传感器所显示的线性趋势高度一致（图15）。

土壤温度与时间关系图；八个小瓶；热响应数据分析；研究结果。
图14：在不同温度下孵育的土壤温度记录。样品A、B、C和D分别在靠近相应传感器的小瓶中孵育（参见图10作为参考）。土壤温度由直接插入土壤样品中的热电偶记录。各传感器监测的具体温度如下：（A）传感器1（S1）为4.1 °C，（B）传感器2（S2）为12.5 °C，（C）传感器3（S3）为20.1 °C，（D）传感器4（S4）为28.1 °C，（E）传感器5（S5）为36.1 °C，（F）传感器6（S6）为43.8 °C，（G）传感器7（S7）为51.9 °C，以及（H）传感器8（S8）为60 °C。将土壤样品放入金属块后，大约需要12分钟达到目标温度。请点击此处查看该图的放大版本。

温度相关性图；土壤与传感器，线性拟合，R²=0.9999，摄氏度，实验数据。
图15：土壤温度与传感器温度之间存在强线性相关性。 在A、B、C和D区的八个传感器附近放置了四个含土壤的小瓶。土壤温度由插入土壤样品中的热电偶记录。请点击此处查看该图的放大版本。

温度与湿度的相互作用
在培养期间，温度与湿度之间存在不可避免的相互作用，需要加以评估。例如，高温会加速水分蒸发，而低温则可能导致水汽凝结。在本实验中，我们选取了四种不同质地的土壤样品（补充表2）进行随机测试。根据实验方案，每种土壤样品在全部22个温度条件下均置于相同的区块位置。结果显示，在平均3.5小时的培养时间后，无论土壤质地如何，较高温度下的土壤水分损失均显著大于较低温度（图16）。在60 °C下培养的土壤平均损失了所加水量的12%，而在4.1 °C下培养的土壤平均仅损失了所加水量的1.88%。这表明，在3.5小时的区块培养过程中，无论培养温度如何，土壤的湿度均维持在50%至60%持水能力的适宜范围内44,45（补充图6）。

水分损失与温度关系图；土壤质地类型：壤土、粉壤土、黏土；数据分析。
图16：四种不同样品在土块培养过程中土壤水分的相对损失。 水分损失量以调整WHC时所添加的总水量为基准进行计算。请点击此处查看该图的放大版本。

CO2 浓度测量
为了测试气体分析仪的准确性和精确性，我们对一种有证标准气体（413 ± 5 ppm CO2）进行了四次测量，分析仪测得的结果为 413.71 ± 0.60（ppm CO2，均值 ± 标准差）。该结果证实了气体分析仪所记录的 CO2 测量值具有很高的准确性和精确性。此外，为符合制造商的规范，应每年使用有证标准气体进行一次测试。

鉴于进样管路和流量降低装置对气体分析仪造成的滞后时间，我们进行了多次测试以确定最佳测量时间。结果表明，进样管路引起的延迟约为5秒。在此装置中，理想的测量时间为20秒，可确保充分填充CO2检测单元，并有5秒时间达到平衡（图17）。由于流量降低装置的流速为1.17 mL/s，该测量时间相当于从60 mL样品瓶中抽取空气含量的39%。此外，我们观察到当气体分析仪作为封闭系统使用时，会出现压力下降。这种压力下降发生在针头从样品瓶中抽出时约1秒的无进样间隔期间。为了在数据处理过程中校正这一压力下降的影响，我们排除了比前一个或后一个数值略低（低3%至5%）的CO2数值。

CO2浓度随时间变化图；针头注射/抽取；显示平衡状态、压力下降。
图17：在三种不同温度下培养的单个土壤样品的最佳测量时间。 该图显示了针头的注射和抽取时间、CO2在5秒内的平衡状态，以及所选时间段相关的压力下降。Incubation_ID 显示培养块位置（C）和样品瓶位置（5、10 和 15）。请点击此处查看此图的放大版本。

完整实验方案的测试
为评估本实验方案的功能性与可重复性，我们选取两种不同的样品，每种设置四个技术重复，在4 °C至60 °C范围内共22个离散温度条件下进行孵育。选择这些土壤样品旨在展示该实验装置所产生的数据类型及其性能表现。具体样品特征见补充表2。温度梯度模块能够稳定地捕捉不同土壤样品在各个温度点的土壤呼吸速率，从而生成温度响应曲线。此外，所有重复样品所得的温度响应曲线几乎完全一致，这体现在各温度下平均呼吸速率周围的标准差极小（图18）。上述结果表明该方案具有高度可重复性，并验证了其操作的精确性。

呼吸速率（Rs）随温度变化的关系图；土壤科学中的数据分析。
图 18：两种土壤的典型土壤有机质分解速率（Rs），每种土壤在完整的温度梯度下进行培养，并设有四个技术重复。 每个数据点表示在对应温度下的呼吸速率均值，误差线表示技术重复之间的标准偏差。请点击此处查看该图的放大版本。

进行了第二次测试以验证该方案的科学适用性。我们测量了在整个温度梯度范围内的土壤呼吸速率，并使用阿伦尼乌斯（Arrhenius）或MMRT模型对数据进行拟合（图19）。所选的土壤样品旨在展示系统在不同温度响应曲线下的性能表现（样品特征详见补充表2）。结果表明，利用温度梯度模块所采集的数据可进一步用于检验关于土壤有机质（SOM）分解速率温度敏感性的不同理论。然而，在任何实验中使用新鲜土壤时都会面临挑战。在为期10天的预培养期间，我们观察到部分土壤样品的试管中出现了真菌群落的生长，超出了代表性样品的范围。尽管我们努力在不扰动土壤的前提下小心去除真菌群落，但其生长仍对部分样品的结果造成了影响（图20）。因此，我们决定将受影响的样品整体剔除，而不仅仅是移除受真菌生长影响的个别试管。

温度与反应速率关系图；Arrhenius 模型与 MMRT 模型；实验数据拟合。
图 19：在温度梯度模块中培养的四种不同土壤样品的代表性结果及其呼吸速率（Rs）。 红线表示（A、B）Arrhenius 拟合结果，蓝线表示（C、D）MMRT 拟合结果。请点击此处查看该图的放大版本。

土壤呼吸速率与温度关系图，不同温度下 Rs（gC/kg土壤/小时）的数据分析。
图20：受真菌生长影响的某些样品的呼吸速率模式。这些结果是（A、B）两个被污染样品的示例，已从后续分析中剔除。请点击此处查看该图的放大版本。

补充图1：基本的常开/常闭电路。“C”也可标记为“COM”，表示公共端。请点击此处下载该文件。

补充图2：冷却系统控制面板。请点击此处下载该文件。

补充图3：系统开关与指示灯。（A）温度梯度模块控制系统开关；以及（B）绿灯表示传感器和加热系统已开启。请点击此处下载该文件。

补充图4：在线界面中的温度梯度金属浴加热模块控制。请点击此处下载该文件。

补充图5：气体分析仪的诊断界面。所有状态显示为绿色表示仪器已准备就绪，可以进行测量。请点击此处下载该文件。

补充图6：在不同温度下培养的土壤的持水能力，在方块培养3.5小时后记录的测量结果。请点击此处下载该文件。

补充文件 1：详细接线说明。请点击此处下载该文件。

补充表1：所需材料及其数量列表。请点击此处下载该文件。

补充表 2：用于水分损失测试和完整方案的土壤样品特性。 选择这些样品以展示该方案的功能性。质地分类遵循美国农业部（USDA）系统，其中粗粒、黏粒、粉粒和砂粒以百分比表示。OC 指有机碳含量（g C·kg-1 土壤），pH 值在水中测定，CaCO3 表示碳酸钙含量（g·kg-1 土壤）。请点击此处下载此文件。

讨论

使用温度梯度模块测定土壤有机质（SOM）分解速率对短期温度变化的响应存在挑战，尤其是在低温下检测呼吸速率时。低温可直接抑制胞内和胞外酶的催化活性46,47。因此，培养时间必须足够长，以确保在温度范围的低温端，呼吸速率较低的情况下，玻璃小瓶中仍能积累足够的CO2，使其浓度处于气体分析仪的检测范围内。在本实验设置中，最低温度为4.1 °C；这些样品最先被装入模块，最后被分析，从而获得更长的培养时间。约3.5小时的模块培养时间被证明足以使样品中的CO2浓度产生可检测的变化。该培养时长可能取决于土壤类型，尤其是有机质含量。例如，有机质含量较低的砂质土壤可能需要比富碳土壤更长的培养时间。然而，在本研究的测试中，3.5小时的培养时间对大多数土壤类型和有机质含量水平均表现出普遍足够的效果。

除了优化低温下检测 CO2 的孵育时间外，同样重要的是在温度梯度的高温端尽量减少水分流失。土壤水分在底物向微生物群落的运输、扩散和溶解过程中起着关键作用48。例如，当水分含量较低时，土壤水分可通过限制底物扩散来降低呼吸速率；而在水分含量较高时，则会因降低氧气可用性而限制呼吸速率45,49。因此，在高温条件下尽量减少水分流失，有助于防止水分成为微生物获取底物的限制因素。尽管本实验方案中的小瓶已完全密封，但水分仍会凝结在瓶盖和瓶壁内侧。这种冷凝现象被视为土壤水分的损失。因此，我们将孵育时间从 Robinson 等 2017 年41所用的 4 小时缩短至 3.5 小时。尽管无法在所有温度处理组中完全保持恒定的水分水平，但在 3.5 小时的孵育期间，土壤始终维持在最佳水分状态。即使在高温条件下，土壤的持水能力（WHC）仍保持在 50% 以上，确保水分的可利用性不会限制微生物对底物的获取44,45。

另一个重要的考虑因素是孵育的温度范围。尽管冷却系统可达到低至 -30 °C 的温度，加热系统可升至 320 °C，但隔热材料的耐温范围为 -183 °C 至 148 °C。本装置所用的玻璃小瓶可耐受 500 °C 的高温。尽管这些范围较宽，但在高于 100 °C 的条件下孵育样品会对操作人员构成安全隐患。为防止过热，系统中增加了一个热敏电阻，确保当铝块温度达到 90 °C 时加热系统自动关闭。由于存在初始化超调现象，该热敏电阻的设置至关重要（图 13A）。若初始化过程中温度超过 90 °C，系统将自动停用。鉴于上述限制，我们建议为确保安全和可靠运行，本装置的最高操作温度不超过 60 °C。若需在 0 °C 以下孵育土壤样品，还需进行额外测试，以确保 CO2 检测的可靠性，因为冷凝及相关的湿度变化可能影响零下温度时的测量结果。在本方案中，我们选择 4 °C 作为最低温度，在此温度下未观察到冷凝现象。若系统需在更宽的温度范围内使用，我们建议实施额外的热安全规范。

该方法的另一个潜在限制是相对较短的培养周期不允许微生物群落适应温度变化。许多研究重点关注长期增温条件下土壤的温度响应，特别是旨在检验微生物适应性理论27,43,47,50,51。已有研究提出，微生物适应性可解释实验增温对土壤呼吸速率影响随时间减弱的现象47。然而，本文所述方法旨在测量土壤有机质（SOM）分解速率的短期温度响应。尽管微生物适应在短时间内不太可能发生47，但最近一项研究采用类似方法，通过培养来自地热梯度土壤的样品，量化了微生物适应的速率。在该研究中，使用MMRT拟合以估算关键参数，包括温度最适值和拐点。通过比较来自地热梯度不同土壤的这些参数，结果表明微生物适应的速率显著低于增温速率52。该研究强调了理解完整温度响应曲线的重要性，特别是准确捕捉土壤生物过程的温度最适值和拐点（图19C、D）。基于这些发现，我们建议在区块培养过程中于多个温度点取样，以评估微生物群落组成和功能如何与呼吸速率及温度敏感性参数相关联。

本文所述的温度梯度模块相较于传统方法具有显著优势。其中一个主要优点是，该方法能够在22个离散温度下，利用少量土壤高效且准确地测定土壤有机质（SOM）分解速率。这相对于仅在少数几个离散温度下培养土壤样品的方法是一种技术上的改进，后者迫使研究人员使用Q10温度系数—— 而这一方法已被许多研究质疑12,13,15。另一项重要优势在于，该装置所获取的数据能够清晰反映温度响应曲线的形态和陡峭程度。在宽广的温度梯度范围内设置多个离散温度处理，使我们能够识别生物过程的拐点温度和最适温度，从而实现不同处理之间的比较。本论文展示的示例呈现出两种截然不同的模式（图19A、B 与 图19C、D），研究人员可进一步结合不同的温度敏感性理论对这些模式进行分析。部分示例支持阿伦尼乌斯（Arrhenius）理论，即反应速率随温度呈指数增长（图19A、B）；而另一些示例则符合MMRT理论，表现出具有明确最适温度的单峰响应模式（图19C、D）。这两种不同模式表明，本文所提出的温度模块培养方案能够重现上述两类响应曲线，可用于检验关于土壤有机质分解速率温度敏感性的理论，从而加深我们对热力学、生物学和化学过程的理解。

披露

作者无任何利益冲突需要披露。

致谢

我们感谢Pieter van de Broek在模块的编程、电子设计和测试方面提供的帮助。感谢Christopher Wedde协助撰写电子单元的操作规程。感谢Henk Martens在本实验装置材料采购过程中提供的协助。我们还感谢Tamas Salanki、Paolo Di Lonardo和Willeke van Tintelen在模块实验室安装过程中提供的支持与协助。我们感谢联合研究中心（Joint Research Center）授权使用历史样品，用于本温度模块的性能测试。最后，我们感谢Antoine Moinet和Tullia Calogiuri在土壤采样工作中对本方案测试所提供的帮助。本项目由瓦赫宁根大学与研究机构的土壤科学集群资助。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
630 mA 玻璃保险丝 RS563-637https://uk.rs-online.com/web
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粘合密封剂 Innotec01.2451.0000https://www.innotec.nl
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铝块 金属卡宾96082150.1https://www.metaalketen
.com/铝/
铝箔胶带马努坦A159435https://www.manutan.nl/nl/mnl/aluminiumtape
50565，50 m × 50 mm，tesa，防静电涂层
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蓝色导线RS724-4392https://nl.rs-online.com/web
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圆锯RyobitoolsRWSL1801Mhttps://nl.ryobitools.eu/elektrisch-g
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封闭装置克拉普HS491976https://www.kramp.com/shop-nl/nl/p
可调节钩扣锁 118
128-型.3--HS491976
冷却器与天然冷却剂Dijkstra VereenigdeL035004186https://www.laboratorium-apparatuur
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DIN导轨RS648-5722https://nl.rs-online.com/web/p/din-ra
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以太网电缆RS657-2090https://nl.rs-online.com/web/p/
以太网线/6572090
口罩KN95NAhttps://www.bol.com/nl/nl/p/kn95-
一次性口罩 FFP2 x 1 只
一次性KN95防护口罩FFP
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谷歌&utm_medium=free_shopping
雌性接头qosina17642https://www.qosina.com/female-
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过滤 0.45 µmWhatman10462650https://us.vwr.com/store/product/1394
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柔性管AvantorMFLX06491-14https://www.avantorsciences.com
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管线式转移泵管
血流减少套件LICOR7800-113https://www.licor.com/support
/痕量气体分析仪/主题/重
duced-flow-rate-kit-7800-113.html
保险丝座端子Elektramat401144228https://nl.mouser.com/ProductD
Phoenix Contact/3270200 详情
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气体分析仪LICORLI-7815https://www.licor.com/env/
产品/痕量气体/LI-7815
60 mL 带盖玻璃小瓶Cole-Parmer GZ-99535-25https://www.coleparmer.com/i/
科尔帕默预清洁 EPA
60 毫升透明玻璃瓶，72 箱装/9953525
绿色/黄色电线RS721-0636https://nl.rs-online.com/web
/p/连接线/7210636
手柄RS456-539https://nl.rs-online.com/web/p/
抽屉把手 橱柜把手
dles/0456539
加热棒RS860-6984https://www.reichelt.com/nl/nl/shop
加热板_hotr
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