需要JoVE订阅才能观看此内容。 请登录或开始免费试用

方法文章

机械处理富含SVF的微脂肪用于创伤性软组织缺损的重建

408 次观看

⸱

DOI:

10.3791/69984

⸱

2026年2月20日

* These authors contributed equally

本文内容

摘要

本方案描述了一种可重复的方法,用于从自体脂肪组织中制备经机械处理的富含基质血管组分(SVF)的微脂肪,并将其注射至腔隙型创伤性软组织缺损中,以进行临床重建。

摘要

创伤性软组织缺损由于组织缺失、血供受损以及难以实现持久覆盖,给修复重建带来了重大挑战。脂肪组织是一种实用的自体组织来源,且可通过机械处理制备富含基质血管组分(SVF)的微颗粒脂肪,整个过程无需酶消化,可在术中完成。
本研究提出了一项标准化的临床操作方案,用于获取自体脂肪组织,并将其加工为富含SVF的微颗粒脂肪,随后注射至腔隙型创伤性软组织缺损区域。脂肪在低负压条件下通过手动方式从大腿或腹部获取,经剪切及注射器间推注乳化实现机械破碎,再通过过滤获得均一的微颗粒脂肪,并经离心分离出含SVF的组分。将处理后的微颗粒脂肪以多层模式注射至整个创腔内。术后评估包括连续的临床检查、摄影记录以及创面面积缩小程度的测量,直至上皮化完成。
在小样本队列中,该方法与创面持续收缩及约4至8周内完全上皮化相关,未出现严重并发症。尽管未对细胞组成和活性进行量化,该技术仍为缺乏酶处理或实验室条件的医疗环境提供了一种可行的术中操作方案。本方案为SVF富集型微颗粒脂肪在处理创伤性腔隙型缺损中的应用提供了一种实用且最小化操作的手段,亦可为后续开展对照研究奠定基础。

引言

创伤性腔隙型软组织缺损仍然是一个重大的重建难题,因其同时存在组织缺失、局部灌注受损,以及高感染风险和死腔形成风险。传统的覆盖技术,如中厚皮片移植或皮瓣转移,在许多情况下可提供持久的覆盖效果。然而,这些方法常受限于供区并发症、技术复杂性以及长期效果的不确定性,尤其是在污染或瘢痕化的创面床上1,2,3。

脂肪组织是一种丰富且易于获取的异质性细胞群体来源,这类细胞群体被称为基质血管组分(stromal vascular fraction, SVF)。SVF包括间充质基质细胞、内皮祖细胞、周细胞以及支持性基质成分。当SVF保留在脂肪组织颗粒内部时,在操作和临床递送过程中其天然的细胞外环境得以维持4。临床上,富含SVF的脂肪移植物(即SVF富集的微脂肪)已被报道可提高移植物的存留率,并在多种适应证中与创面再上皮化加速相关5,6,7。

从脂肪抽吸物中获取基质血管组分(SVF)主要有两种策略。酶消化法通常每单位体积可获....

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

方案

所有操作均经机构伦理委员会批准(批准号:KL-2025062),并依照《赫尔辛基宣言》进行。在患者参与之前,均已获得其签署的知情同意书。

1. 患者选择与术前评估

  1. 纳入因创伤导致软组织缺损呈腔隙型、且在完成充分外科清创后需行重建干预的成年患者。
    ​注:重建时缺损应具有明确边界,周围存在存活组织,且无持续性坏死。
  2. 排除存在活动性全身感染或无法控制的局部伤口感染、血糖控制不佳的糖尿病(定义为经治疗后 HbA1c 仍持续 >8%)、影响受累肢体的严重外周血管疾病、已知凝血功能障碍或无法安全中断的抗凝治疗、病灶部位存在恶性肿瘤,以及经术前评估确定存在脂肪抽吸或麻醉禁忌证的患者。
  3. 进行基线数据收集和伤口评估
    1. 记录患者的基线特征,包括年龄、性别、伤口部位、致伤机制以及从受伤至重建的时间间隔。
    2. 在标准伤口准备后进行伤口评估。使用无菌直尺测量伤口最宽处的长度和宽度。以固定距离和方位拍摄标准数码照片。通过基于校准照片的平面测量法计算伤口面积(cm²)(见第6.6步)。
  4. 提供术前咨询。向患者说明手术步骤、预期获益、潜在风险(包括感染、脂肪吸收及需追加手术等)、术后护理要求以及随访安排。
  5. 确认患者充分理解,并在手术前获取其签署的书面知情同意书。

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

结果

共有八名腔隙型创伤性软组织缺损患者接受了所述方案的治疗。

队列特征

该队列包括5名男性和3名女性,平均年龄为51.5 ± 11.7岁(范围为38至74岁)。缺损位于下肢(n = 5)、上肢(n = 2)和躯干(n = 1)。伤口最大平均直径为4.3 ± 1.0 cm,腔隙深度为3至6 cm。损伤原因包括交通事故(n = 4)、挤压伤(n = 3)和跌倒(n = 1)。术前伤口培养在多个病例中呈阳性,最常分离出Pseudomonas aeruginosa、Staphylococcus aureus或Streptococcus pneumoniae(表1)。

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

讨论

本研究描述了一种在临床中可应用且可重复的方案,用于处理和移植富含基质血管组分(SVF)的微脂肪,以治疗创伤性腔隙型软组织缺损。该方案旨在标准手术室环境中实现即时治疗(point-of-care)应用,优先考虑操作的简便性、安全性和可行性,而非生物学特性表征。在此项小规模临床研究中,所有经治疗的缺损均表现出持续的创面闭合,并在12周内实现完全上皮化,且未出现重大手术相关并发症,表明该方法在临床实践中具有可行性。因此,机制性解释有意局限于现有文献支持的关联性结论,因为本临床队列未进行细胞表型分析和细胞活力检测。

通过机械法处理脂肪组织以获取含基质血管组分(SVF)的微脂肪,此前已有描述,并已应用于重建和再生医学领域。酶法分离基质血管组分可获得更高数量的有核细胞及祖细胞群体16,但需要专用试剂、较长的处理时间、实验室基础设施,且在许多地区受到监管限制17。相比之下,机械处理可在术中快速完成,操作简便,但细胞得率较低,且常未被准确量化4,.......

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

披露

作者声明无利益冲突。

致谢

本研究由湖北省区域科技创新国际科技合作专项计划(项目编号:2023EHA043)和武汉大学中南医院创伤与微创伤骨科2025年国家临床研究重点项目(项目编号:2025LCYJZX-ZD003)资助。作者衷心感谢白文琪博士此前的工作为本研究提供了启发,并在临床研究方法方面给予了宝贵指导。同时感谢中南医院护理团队和手术团队在患者照护及随访工作中提供的协助。

....

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
0.9% 生理盐水Baxter Healthcare(或同等产品)多种规格用作肿胀液的基础溶液
钝头注射套管(22G × 50 mm)CONPUVON (figure-materials-1),中国DZ 22×50-C5用于富含SVF的微脂肪多层注射
离心机 Longtime Biotechnology (figure-materials-2),中国LTA-1600临床用离心机,可产生约 400 × g 的离心力
数码相机 / 智能手机任意品牌不适用随访期间用于标准化创面摄影
肾上腺素当地医院药房多种规格添加至生理盐水中,使终浓度达到 1:500,000
ImageJ 软件(版本 1.53 或更高)美国国立卫生研究院(NIH)免费软件用于创面面积的平面测量
吸脂套管(2–3 mm)标准医疗器械供应商不适用用于从供区采集脂肪组织
鲁尔锁接头(雌-雌型)Becton Dickinson(或同等产品)多种规格用于注射器之间的机械乳化操作
鲁尔锁注射器(1、5、10、20 mL)Hongda 医疗器械 (figure-materials-3),中国未指定(机构供应)用于抽吸、机械处理和注射
无菌敷料 / 绷带医院药房不适用用于术后创面覆盖
手术剪刀(无菌)广州百堂医疗器械有限公司BT00301(或类似代表性型号)用于脂肪组织的机械切碎
凡士林纱布(10 cm × 10 cm)华西医用敷料有限公司 (figure-materials-4),中国未指定(机构供应)非粘连性敷料,用于术后创面护理

参考文献

  1. Hidalgo, D. A. Aesthetic improvements in free-flap mandible reconstruction. Plastic and Reconstructive Surgery. 88 (4), 574-585 (1991).
  2. Pu, L. L. Q. Free flaps in lower extremity reconstruction. Clinics in Plastic Surgery. 48 (2), 201-214 (2021).

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

重印与许可

标签

基质血管组分微脂肪处理软组织重建脂肪组织获取机械破碎注射器乳化脂肪移植创面再上皮化自体组织创伤性组织缺损