采用网络药理学方法，本研究发现二妙散通过抑制炎症因子及相关信号通路发挥抗前列腺炎作用。随后 体外 实验进一步证明，其水提物在脂多糖诱导的前列腺上皮细胞炎症模型中，显著抑制了关键炎症细胞因子的表达。
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采用网络药理学方法，本研究发现二妙散通过抑制炎症因子及相关信号通路发挥抗前列腺炎作用。随后 体外 实验进一步证明，其水提物在脂多糖诱导的前列腺上皮细胞炎症模型中，显著抑制了关键炎症细胞因子的表达。
本方案采用网络药理学与实验验证相结合的方法，研究二妙散（EMP）治疗前列腺炎的作用机制。该工作流程遵循逐步设计：（i）基于数据库筛选活性化合物及靶点，（ii）构建并分析相互作用网络，（iii） 体外 实验验证。首先，从TCMSP数据库中获取了EMP的活性成分及其对应靶点，同时从GeneCards数据库中获取与前列腺炎相关的靶点。通过取EMP靶点与疾病靶点的交集，确定关键治疗靶点。其次，利用Cytoscape构建“药物–活性成分–靶点–疾病”网络。对关键靶点进行蛋白质–蛋白质相互作用（PPI）分析及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，结果显示IL6和TNF等炎症因子为核心靶点，PI3K/AKT和MAPK等通路显著富集。最后， 体外 使用脂多糖（LPS）诱导的前列腺上皮细胞炎症模型进行验证。与LPS处理组相比，EMP处理显著降低了促炎因子IL-6和TNF-α的释放（p < 0.05）。 < 0.05），证实了EMP的抗炎功效。该整合性方法提供了一个可重复的框架，可用于研究其他多组分治疗体系。综上所述，本研究初步阐明了EMP通过多成分、多靶点、多通路机制发挥抗前列腺炎作用，其作用机制与抑制炎症反应密切相关，从而为其临床应用提供了科学依据。
前列腺炎，尤其是慢性非细菌性前列腺炎，是一种常见的泌尿系统疾病，其病因复杂且缺乏高效治疗方法，严重影响患者的生活质量1,2,3。目前临床对前列腺炎的治疗采用综合疗法，包括抗生素、α-受体阻滞剂和非甾体抗炎药4,5,6。主要挑战在于缺乏针对病因的特异性治疗，以及心理因素与躯体症状之间复杂的相互作用，这些因素共同导致治疗效果不理想且复发频繁7。近年来，整合医学方法如针灸和中草药在前列腺炎的治疗中得到广泛应用，并显示出良好的疗效。这些治疗方法的安全性和有效性已得到一系列高质量研究证据的支持8,9,10,11,12。
在此背景下，具有抗炎和解毒作....
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本研究无需伦理批准，因为未涉及人类受试者或临床样本。所有涉及细胞系的操作均按照机构生物安全指南和规定进行。本研究使用的前列腺上皮细胞系来自经认证的商业供应商。
注意：本研究中使用的所有试剂、仪器和软件均列于材料表中。本研究的流程图见图1。
1. 活性成分筛选
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活性化合物的鉴定与靶点预测
这些结果表明，我们整合网络药理学和体外实验的方法在识别和验证EMP治疗前列腺炎的作用靶点方面具有显著有效性。通过检索TCMSP数据库，从EMP组成药材中鉴定出46种生物活性成分，对应178个潜在靶点。从Genecards数据库中获取了13,960个与前列腺炎相关的靶点。两组数据中共有的162个靶点被确定为EMP治疗前列腺炎的作用靶点。随后，利用Cytoscape构建并可视化了化合物-靶点相互作用网络（图2）。参与“药物-活性成分-靶点-疾病”综合调控网络的活性成分列于表1中。
蛋白质-蛋白质相互作用网络与枢纽靶点识别
利用Cytoscape构建并可视化了EMP治疗前列腺炎关键靶点的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络（图3A<.......
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本方案结合网络药理学与实验验证，为研究多组分治疗机制提供了一个系统性框架。关键步骤包括使用明确定义的阈值（OB ≥ 30%，DL ≥ 0.18）准确筛选活性化合物、可靠地构建网络，以及合理选择实验验证模型。在生物信息学分析中谨慎选择参数，并严格控制实验条件，对于确保结果可重复性至关重要。
前列腺炎是一种具有挑战性的泌尿系统疾病，其病因尚不明确，对常规治疗反应较差，且心理因素在症状持续中起着复杂作用，临床管理困难。电针疗法（EMP）及其他中医治疗方法因其在缓解前列腺炎症状和炎症方面展现出的良好疗效，已逐渐受到关注。研究结果揭示了EMP治疗潜力的新视角，其多靶点抗炎作用已通过网络药理学和体外实验得到验证。然而，本研究也存在局限性，包括网络药理学预测中可能存在的数据库偏差，以及体外验证的局限性，可能无法完全反映体内的复杂性。与传统的单靶点方法相比，这种整合式研究流程能够系统分析多成分、多靶点之间的相互作用。标准化的研究流程提高了可重复性，也可扩展用于其他中药方剂的高通量筛选。
在.......
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作者在本研究中无利益冲突。
本研究由中日友好医院青年项目（编号：2020-1-QN-8）和航天中心医院科研基金（编号：YN202530）资助。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 人IL-6 ELISA试剂盒 | 4Abio | CHE0009 | |
| 人TNF-α ELISA试剂盒 | 4Abio | CHE0019 | |
| K-SFM添加剂 | Procell | CM-0200 | |
| 脂多糖 | Solarbio | L8880 | |
| MTS | Promega | G1111 | |
| 逆转录系统 | Promega | A3500 | |
| RWPE-1 | Procell | CL-0200 | RRID:CVCL_EQ24 |
| RWPE-1细胞完全培养基 | Procell | CM-0200 | |
| SYBR Green实时PCR预混液 | Toyobo | QPK-201 | |
| Trizol试剂 | Thermo Fisher Scientific (Invitrogen) | 15596026 | |
| 胰蛋白酶-EDTA | Gibco (Thermo Fisher) | 25200072 |
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