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研究文章

电针诱导的产后压力性尿失禁中运动蛋白通路的变化

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DOI:

10.3791/70406

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2026年4月7日

本文内容

摘要

电针治疗改善了产后压力性尿失禁大鼠模型的尿动力学参数,并与运动蛋白相关通路的调节有关。这些发现提示了其治疗作用潜在的分子机制。

摘要

产后压力性尿失禁(SUI)显著影响女性的生活质量,但有效治疗手段的潜在分子机制尚不明确。本研究旨在探讨电针(EA)在SUI大鼠模型中的治疗效果及其分子通路。我们采用阴道球囊扩张(VBD)法建立SUI模型,并将受试动物随机分为模型组和电针治疗组。通过尿动力学检测评估功能恢复情况,结果显示电针显著提高了漏尿点压力(LPP)和最大膀胱容量(MBC)。采用苏木精-伊红染色和Masson三色染色进行组织病理学分析,发现肌肉结构得到改善,胶原沉积减少42.3%,同时炎症反应受到抑制。定量蛋白质组学共鉴定出2,907个差异表达蛋白(DEPs),STRING数据库分析显示运动蛋白通路是核心靶点。具体而言,电针选择性下调了MYL1、TNNI2、MYLPF、TNNT3和TNNT1等关键蛋白的表达。Western blot和qPCR验证了上述结果,提示电针通过调节肌肉收缩力及重塑盆底结构缓解SUI,为靶向治疗SUI的潜在机制提供了新的见解。

引言

压力性尿失禁(SUI)是一种常见的盆底功能障碍,影响着15%至35%的产后女性1,2,显著影响其生活质量与心理健康。除了躯体症状外,产后SUI还带来沉重的心理社会负担;许多女性会感到尴尬、自尊心下降以及回避社交活动。这种状况可能削弱女性的性别认同感,并导致不愿参与各类日常活动,从而加重孤独感,甚至诱发产后抑郁3。此外,由于需要购买控尿产品及频繁就医,SUI也带来了经济负担。尽管目前已有盆底肌训练和手术治疗等干预手段,但其疗效有限且存在复发风险,因此亟需开发更有效、创伤更小、能够针对产后SUI根本病因的治疗方法4,5。SUI的发病机制是多因素的,涉及盆底肌肉功能障碍、结缔组织退化以及神经肌肉损伤。阴道分娩过程中的机械性损伤是导致产后SUI的主要原因6,7。此外,细胞外基质重塑失调——表现为胶原纤维减少和弹性蛋白代谢异常——会削弱盆底支持结构8。新兴证据表明,横纹尿道括约肌收缩功能受损是一个关键因素,其背后机制与肌源性特异性蛋白(包括调控肌动蛋白-肌球蛋白相互作用的运动蛋白)表达异常密切相关<....

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方案

所有实验程序均经广州美莱生物科技有限公司动物伦理委员会批准,批准编号为 IACUC-MIS2023045。

建立压力性尿失禁大鼠模型
共使用20只6–8周龄的雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,用于建立模拟分娩过程的盆底损伤模型。为实施阴道球囊扩张(VBD),通过腹腔注射氯胺酮(75 mg/kg)和赛拉嗪(10 mg/kg)对大鼠进行麻醉。将一个未充气的10 Fr Foley导尿管小心插入阴道中段,随后用3 mL无菌生理盐水充盈球囊。球囊保持充盈状态4小时,以模拟分娩过程中盆底肌肉的长时间机械性牵拉以及阴部神经受压情况。建模周期为7天。第8天时,随机选取6只动物进行尿动力学检测。

通过尿动力学检测和血清乳酸脱氢酶(LDH)水平测定验证模型建立成功,后者可作为肌肉损伤的指标。确认建模成功后,将压力性尿失禁(SUI)大鼠随机分为假手术组和治疗组,每组各五只。同时设立五只正常SD大鼠作为对照组。在假手术组中,将针灸针插入穴位BL23(位于L2棘突外侧6 mm处)和GB30(位于髋关节后方),但不施加任何电刺激。在电针组中,采用电针仪对相同穴位进行刺激,操作遵循标准临床治疗方案。电针仪参数设置为1 Hz疏密波,电压2 V。每次干预持续30分钟,连续10天每日一次。所有动物均每日监测,并在标准实验室条件下饲养。实验结束时,对各组动物进行尿动力学检测。随后,各组大鼠均使用3%异....

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结果

阴道球囊扩张损伤大鼠的尿动力学参数
在建模前后评估了膀胱功能,包括排尿控制能力和最大膀胱容量。尿动力学分析显示,与基线相比,阴道球囊扩张(VBD)后最大膀胱容量(MBC)和漏尿点压力(LPP)均出现统计学上显著的下降(P < 0.05)。MBC 从 2.34 ± 0.21 mL 下降至 0.75 ± 0.32 mL(表 2 和 图 1A),而 LPP 从 41.83 ± 5.45 cmH2O 下降至 22.16 ± 6.90 cmH2O(表 2 和 图 1B)。

压力性尿失禁大鼠尿动力学参数的改善
治疗前后评估了膀胱功能参数,包括尿控能力和最大膀胱容量(MBC)。比较性尿动力学分析显示,与假电针对照组(仅针刺不施加电刺激)相比,电针(EA)治疗组的MBC和漏点压(LPP)均表现出统计学显.......

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讨论

压力性尿失禁(SUI)是一种常见的泌尿系统疾病,影响产后女性,其病理机制与妊娠和分娩过程中盆底支持结构的损伤密切相关7,27,28。该病表现为在增加腹压的活动(如咳嗽、打喷嚏或运动)期间出现不自主的尿液漏出,显著损害患者的躯体和心理健康,以及生活质量29。

从发病机制上看,压力性尿失禁(SUI)的发生直接与妊娠和分娩过程中盆底支持结构的解剖学改变及神经肌肉损伤相关6,30。盆底肌肉对于维持尿道闭合功能至关重要,在分娩过程中会经历显著的适应性重塑。经阴道分娩使盆底肌肉暴露于机械性应力之下,导致多维度的损伤,包括肌纤维断裂、筋膜分离以及微循环障碍31,

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披露

作者声明无利益冲突。

致谢

本工作得到广州市中医药和中西医结合科技项目(项目编号:20232A010025)的资助。

....

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
0.22 µm PVDF 膜MilliporeISEQ00010 
2× UniTaq SYBR qPCR 主混合液(ROX-)TIANYAbiotechP1504
4% 多聚甲醛GSbiothGS539A
BCA 检测试剂盒鼎国生物BCA02
明场显微镜MSHOTml31
D-乳酸脱氢酶检测试剂盒碧云天P0392S
ECL Prime 显色试剂CytivaRPN2232
电泳仪WIXminiPro4
全自动化学发光图像分析系统富士胶片LAS-3000
GAPDH 抗体Affinity BiosciencesT0004
HRP 标记的二抗Affinity BiosciencesS0001,S0002
ImageJ 1.54 软件NIH
Masson 三色染色试剂盒GSbiothGS800A
MYL1 抗体Cloud-ClonePAB105Ra01
MYLPF 抗体Affinity BiosciencesDF9048
名称公司货号
PowerLab Chart v5.2.1ADInstruments
Primer Premier 5.0 软件PREMIER Biosoft
PrimeScript RT 主混合液TAKARARR036A
Proteome Discoverer 2.4 软件赛默飞世尔科技
快速半干转膜仪Bio-Rad788BR04132
实时荧光定量 qPCR 系统天隆TL100
RIPA 裂解缓冲液碧云天P0013B
RNA 提取试剂盒AidlabRN70
轮转式切片机LeicaRM2235
SDS-PAGE 凝胶碧云天P0052A,P0053A
标准化 H&E 染色试剂盒GSbiothGS700A
TBST 缓冲液biosharpBL346A
TNNI2 抗体Cloud-ClonePAD230Ra01
TNNT1 抗体Cloud-ClonePAD231Ra01
TNNT3 抗体Cloud-ClonePAD233Hu01
总 RNA 提取试剂biosharpBL258A
尿动力学检测系统TechmanBL-420

参考文献

  1. Rajavuori, A., Repo, J. P., Häkkinen, A., Palonen, P., Multanen, J., Aukee, P. Maternal risk factors of urinary incontinence during pregnancy and postpartum: a prospective cohort study. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol X. 13, 100138(2022).
  2. Dai, S., Chen, H., Luo, T.

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重印与许可

标签

电针治疗盆底重塑尿动力学检测阴道球囊扩张肌肉收缩力差异蛋白表达蛋白质印迹定量蛋白质组学