快速诊断 嗜肺军团菌 重症患者中的感染诊断仍然具有挑战性。本回顾性队列研究评估了采用鲎试剂阿米巴样细胞裂解物（Limulus amebocyte lysate）检测血清内毒素水平作为辅助生物标志物，以帮助鉴别诊断 军团菌 由其他病原体引起的感染，并指导早期抗菌治疗。
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快速诊断 嗜肺军团菌 重症患者中的感染诊断仍然具有挑战性。本回顾性队列研究评估了采用鲎试剂阿米巴样细胞裂解物（Limulus amebocyte lysate）检测血清内毒素水平作为辅助生物标志物，以帮助鉴别诊断 军团菌 由其他病原体引起的感染，并指导早期抗菌治疗。
快速且准确的区分 嗜肺军团菌 与其他革兰氏阴性菌感染相区分在重症医学中仍然是一个重大挑战。尽管其相对较低的发病率 体外 内毒素活性，临床观察表明，军团菌病患者的循环内毒素水平升高。本项回顾性队列研究分析了2020年1月至2023年12月期间入住重症监护病房并经微生物学确诊感染的118名危重患者。患者被分为四类病原体组： 嗜肺军团菌 （n = 18），其他革兰氏阴性菌（n = 68）、革兰氏阳性菌（n = 24）以及真菌（n = 8）。血清内毒素水平在进入重症监护室（ICU）后24小时内，采用动态显色法鲎试剂变形细胞溶解物检测进行测定。患有 嗜肺军团菌 感染患者的内毒素水平显著高于其他革兰阴性菌感染患者（平均值分别为2.15 ± 1.28 vs 0.61 ± 0.74 EU/mL）。采用阈值 > 2.5 EU/mL，内毒素定量检测在区分军团菌感染时的敏感性为77.8%，特异性为89.7%，阴性预测值达95.3%。多变量逻辑回归分析表明，内毒素 > 2.5 EU/mL 仍与军团菌感染独立相关（校正后 OR 15.7，95% CI 3.84–64.2，p < 0.001）。这些发现表明，血清内毒素定量可能作为有用的辅助生物标志物，有助于早期识别 嗜肺军团菌 重症患者中的感染。
临床识别和及时治疗 Legionella pneumophila 感染是当代重症医学中最具挑战性的问题之一，诊断延迟可能导致易感患者出现灾难性后果。这种苛养的革兰氏阴性杆菌可引起严重肺炎，在住院患者中的病死率高达25%至50%，尤其在需要重症监护支持的患者中更为显著1。该病原体在肺泡巨噬细胞内的独特胞内寄生特性，加之其苛刻的生长需求以及对常规抗菌药物的耐药性，共同构成了诊断与治疗上的复杂局面，数十年来一直困扰着临床医生2。
目前军团菌病的诊断方法对于危重患者所要求的紧迫性而言，仍令人沮丧地不足。尽管尿液抗原检测是特异性的金标准，但仅能检测到约80–90%感染病例中的 L. pneumophila 血清1型，对其他血清型和菌种存在显著的诊断盲区3。培养方法虽然全面，但需要特殊的缓冲活性炭酵母提取物培养基，且通常需48–72小时才能获得结果，这一延迟在败血症患者中可能是致命的4。分子诊断技术，包括聚合酶链式反应和宏基因组高通量测序，尽管敏感性和速度不断提高，但仍成本高昂，且并非普遍可用，尤其在资源有限的地区或临床决策最为关键的非工作时段5。
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本项回顾性队列研究在中山市人民医院（一所三级甲等教学医院）的22张床位内科重症监护病房（ICU）中进行。研究方案经中山市人民医院机构审查委员会批准（批准号：2026-032）。由于本研究为回顾性设计且使用去标识化数据，故豁免知情同意要求，所有操作均通过匿名化处理并遵循《赫尔辛基宣言》及相关数据保护法规，以确保患者隐私。患者筛选及研究流程详见图1，内毒素定量方法如下所述，结果按病原体分组展示，如图2所示。所有数据均提取自现有的医疗记录和实验室数据库，未进行任何前瞻性干预或患者接触。
研究人群
研究人员纳入了2020年1月至2023年12月期间入住重症监护室（ICU）的所有成年患者（年龄≥18岁），并满足以下标准：纳入标准如下： 临床怀疑有严重细菌感染或脓毒症；细菌培养阳性或分子诊断确认；入住ICU后24小时内进行血清内毒素检测；以及具有完整的临床和实验室数据可供分析。排除标准如下： 多种病原体引起的混合感染；诊断评估不完整；近期接受可能影响炎症反应的免疫抑制治疗；慢性炎症性疾病；以及在入院24小时内死亡、未能完成全面评估的患者。提取了参与者的特征，包括人口学资料、合并症及临床表现，以确保纳入的队列能代表疑似革兰阴性菌感染的危重患者。由于本研究为回顾....
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研究人群与基线特征
在最初筛查的312名ICU入院患者中，有118名患者符合纳入标准，并被纳入最终分析队列。这些患者被分为四类病原体组：Legionella pneumophila（n = 18）、其他革兰氏阴性菌（n = 68）、革兰氏阳性菌（n = 24）和真菌（n = 8）（图1）。各组之间的基线特征总体具有可比性（表1）。与感染其他革兰氏阴性菌的患者相比，Legionella pneumophila 感染患者中免疫抑制的比例更高（22.2% vs 7.4%，p = 0.048）。临床上，Legionella 感染患者更常表现为发热（83.3%）、咳嗽（100%）和意识状态改变（88.9%）。通过APACHE II评分评估的疾病严重程度在各组间总体相似，尽管Legionella 感染患者的中位评分略高（28 [IQR 24–36] vs 其他革兰氏阴性菌感染患者的25 [IQR 18–31]），如表1
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本研究首次系统评估了血清内毒素定量作为区分不同疾病的诊断生物标志物的价值 嗜肺军团菌 与其他革兰氏阴性菌感染在重症患者中的区别。当前研究结果揭示了一种显著的悖论，挑战了传统对 军团菌 病理生理学：尽管该生物体在实验室研究中已明确表现出内毒素活性降低，但军团菌病患者的循环内毒素水平却显著高于感染其他革兰阴性菌的患者。这一看似矛盾的观察结果不仅为重症发病机制提供了新的见解 军团菌 感染，还可能提供一种有用的辅助生物标志物，有助于早期识别 军团菌 危重患者中的感染。
该队列中观察到的诊断性能特征在临床上具有特别强的说服力。对于内毒素水平>2.5 EU/ml 的情况，其77.8%的敏感性和89.7%的特异性优于许多已确立的细菌感染生物标志物，而高达95.3%的阴性预测值则是一项具有直接临床指导意义的发现，可立即影响治疗决策19。这一较高的阴性预测值表明，内毒素水平≤2.5 EU/mL 能够以极高的可信度排.......
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作者声明他们与本研究无任何竞争利益。不存在任何财务或非财务冲突，包括就业关系、咨询、股票所有权、酬金或有偿专家证词。
感谢中山市人民医院重症监护室的工作人员在数据收集方面提供的支持，以及为本研究提供匿名数据的患者。
....访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 动力学显色鲎试剂细胞裂解物检测法 | Cape Cod / Charles River Laboratories 的关联公司 | KTA-2 或同等产品 | 用于定量血清内毒素检测；检测范围 0.01–10.0 EU/mL |
| 缓冲活性炭酵母提取物琼脂 | BD 诊断 / Remel | 221836 / R05001 | 选择性培养琼脂 嗜肺军团菌 |
| 无菌无热原采血管 | BD Vacutainer / Greiner Bio-One | 368498 / 455092 | 为避免内毒素污染，进行静脉采血。 |
| 无热原微量离心管 | 康宁 / 艾本德 | 3620 / 022364111 | 用于血清分装与保存。 |
| –80 °C 冷冻室 | 赛默飞世尔科技 / 松下 | Forma 900 / MDF-U73V | 用于血清样本的长期保存。 |
| 离心机（3,000 × g) | Eppendorf / Thermo Scientific | 5810R / Sorvall ST 8 | 用于凝固后血清分离。 |
| 尿液抗原检测 L. pneumophila | BinaxNOW / Sofia | 430-000 / 30400 | 快速免疫层析检测 嗜肺军团菌 1型血清群抗原 |
| 宏基因组学下一代测序平台 | Illumina / Oxford Nanopore | MiSeq / MinION | 在常规诊断无法得出结论时，用于病原体鉴定。 |
| APACHE II &和 SOFA 评分表 | – | – | 用于评估患者入住重症监护室时的疾病严重程度。 |
| 电子病历系统 | – | – | 用于回顾性数据提取（人口统计学资料、实验室结果、治疗措施、结局）。 |
| 统计软件（R 版本 4.3.0） | R基金会 | – | 用于所有统计分析，包括ROC、回归和生存模型。 |
| 常规检测用实验室设备 | – | – | 包括全血细胞分析仪、化学分析仪、乳酸检测仪、CRP/PCT 免疫分析系统等。 |
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