该方案能够制备和表征CD47和整合素α4/β1共修化巨噬细胞膜包覆多聚(乳酸-共乙醇酸)纳米颗粒,用于靶向药物递送。
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| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 7-氨基拟霉素D(7-AAD) | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | A1310 | 流细胞术活/死活分辨的存活染料 |
| Alexa Fluor 488结合山羊抗兔IgG | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | A-11008 | CD68免疫荧光染色的二级抗体 |
| 抗小鼠CD47抗体 | 阿布卡姆(美国) | AB214453 | 用于西方墨迹分析以验证CD47表达 |
| 抗小鼠整合素和α;4 抗体(B-2) | 圣克鲁斯生物技术(美国) | SC-376334 | 用于西方印迹分析以验证整合素和α;4 表达式 |
| 抗小鼠整合素和β;1个抗体(A-4) | 圣克鲁斯生物技术(美国) | SC-374429 | 用于西方印迹分析以验证整合素和β;1 表达式 |
| ApoE-/-鼠 | 杰克逊实验室(美国) | 无 | 用于体内动脉粥样硬化模型 |
| BCA检测套件 | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | 23225 | 用于确定蛋白质浓度 |
| 黑色硅胶板 | 无 | 无 | 用来安装主动脉进行体外成像 |
| CD47质粒(pcDNA3.1(+)) | Generay生物技术(中国) | G0177361-1 | 含有用于过度表达的小鼠Cd47基因 |
| 秋水仙碱 | Sigma-Aldrich(美国) | C9754 | 纳米颗粒中的治疗有效载荷 |
| 共焦激光扫描显微镜 | 徕卡微系统 | TCS SP8 | 用于荧光成像和共定位分析 |
| 柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0) | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | 无 | 用于免疫荧光染色中的抗原提取 |
| 透析管(MWCO 3,500 Da) | Sigma-Aldrich(美国) | PURD35030 | 用于纳米颗粒纯化 |
| 二甲基亚硫酸盐(DMSO) | Sigma-Aldrich(美国) | D2447 | 纳米颗粒制备溶剂 |
| DiI(1,1′-二八癸基-3,3,3′,3′-四甲基环氨基碳氰酸过氯酸盐) | Beyotime(中国) | C1036 | 纳米粒子核心的荧光标记 |
| DiO(3,3′-二八癸基氧基酸过氯酸盐) | Beyotime(中国) | C1038 | 巨噬细胞膜的荧光标记 |
| 导演 | Beyotime(中国) | Y239280 | 用于体内荧光成像 |
| 达皮 | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | D3571 | 荧光成像用核反染剂 |
| 杜尔贝科改良型鹰型中型(DMEM) | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | 11965092 | 细胞培养基 |
| 动态光散射分析仪(Zetasizer Nano ZS) | 马尔文潘纳利蒂卡(英国) | 无 | 用于动态光散射(DLS)测量纳米颗粒尺寸、PDI和ζ势 |
| ELISA套件 | R&D 系统(美国) | 取决于目标细胞因子 | 用于定量炎症性细胞因子 |
| 内皮素-1(ET-1) | Sigma-Aldrich(美国) | E7764 | 用于刺激整合素和α;4/β1 表达式 |
| 胎儿牛血清(FBS) | Gibco(美国Thermo Fisher Scientific) | 10091148 | 细胞培养基补充剂 |
| 流式细胞仪 | 生物科学学士(美国) | FACSCalibur | 用于荧光信号采集 |
| 流式细胞术分析软件(FlowJo v10.8.1) | 生物科学学士(美国) | 无 | 用于流式细胞术数据分析 |
| 人类脐静脉内皮细胞(HUVECs) | 福恒生物技术(中国) | FH1122 | 用于体外靶向测定 |
| 图像分析软件(ImageJ) | 美国国立卫生研究院 | 无 | 用于定量图像分析 |
| 体内成像系统 | 珀金埃尔默(美国) | IVIS Lumina III | 用于全身荧光成像 |
| 异丙醇(60%) | Sigma-Aldrich(美国) | 34863 | 用于油红O染色时的分化 |
| 脂氧胺3000 | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | L3000001 | 转染试剂 |
| 磁力搅拌器和搅拌杆 | 无 | 无 | 用于纳米颗粒制备 |
| 马松三色染色套件 | 阿布卡姆(美国) | AB150686 | 用于胶原染色 |
| 迷你挤出机 | Avanti极地脂质(美国) | 610000 | 用于膜挤压 |
| 小鼠RAW 264.7细胞系 | 福恒生物技术(中国) | FH0328 | 巨噬细胞的来源 |
| 小鼠平滑肌细胞系 | 福恒生物技术(中国) | FH-Y063 | 用于安全评估 |
| 油红O | Sigma-Aldrich(美国) | O0625 | 用于脂质染色 |
| 光学MEM | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | 31985062 | 用于转染的还原血清培养基 |
| 氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL) | 一源生物技术(中国) | YB-002 | 用于诱导泡沫细胞形成 |
| 青霉素&达什;链霉素 | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | 15140122 | 细胞培养用抗生素补充剂 |
| 苯甲基磺酰氟化物(PMSF) | Sigma-Aldrich(美国) | 78830 | 蛋白酶抑制剂 |
| 磷酸盐缓冲盐水(PBS) | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | 10010023 | 洗涤与稀释缓冲 |
| 聚(乳酸-共乙醇酸)(PLGA,50:50;MW 90,000) | 大连湄伦生物技术(中国) | MB5649-1 | 纳米颗粒制造用聚合物 |
| 聚碳酸酯膜滤网(200 nm,400 nm) | Whatman(英国) | 800282 | 用于挤出 |
| 氯化钾(KCl) | Sigma-Aldrich(美国) | P9333 | 裂解缓冲液的组成部分 |
| P3000试剂 | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | L3000001 | 转染增强剂 |
| 旋转切片机 | 徕卡生物系统(德国) | RM2235 | 用于石蜡切片 |
| 注射器泵 | 哈佛器械(美国) | 70-3007 | 用于受控纳米颗粒形成 |
| 透射电子显微镜(TEM) | 美国,Thermo Fisher Scientific(美国) | 塔洛斯F200S | 用于纳米粒子成像 |
| 三盐酸盐 | Sigma-Aldrich(美国) | T2663 | 缓冲分量 |
| 肿瘤坏死因子α(TNF-&α;) | R&D 系统(美国) | 410吨 | 用于激活内皮细胞 |
| 超纯水 | Milli-Q(默克,美国) | ZMQSV0T01 | 用于纳米颗粒制备和透析 |
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