采用非靶向代谢组学与网络药理学方法研究生陷祛瘀汤在大鼠心力衰竭中的作用机制

摘要

本研究通过动物实验证实了生陷祛瘀汤对心力衰竭的治疗作用。采用超高效液相色谱-质谱联用技术及网络药理学分析，鉴定了其潜在的治疗靶点和作用机制。

摘要

生心区域汤（Shengxian Quyu decoction，SXQY）被认为是一种治疗心力衰竭（HF）的潜在治疗策略，但其治疗机制尚不明确。本研究探讨了SXQY在心力衰竭中的治疗作用及其潜在机制。采用横主动脉缩窄术（TAC）建立大鼠心力衰竭模型，并给予SXQY治疗。通过经胸超声心动图评估心脏功能，采用苏木精-伊红染色和马松三色染色评价心肌结构及纤维化程度。利用超高效液相色谱-串联质谱技术对血清样本进行非靶向代谢组学分析。将入血成分映射至靶点，并结合蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络分析，筛选出与HF相关的交集靶点，随后进行基因本体（Gene Ontology）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析。结果显示，SXQY显著改善了TAC大鼠的心脏功能，表现为舒张期左心室内径和舒张期左心室后壁厚度降低，左心室射血分数升高，同时减轻了心肌肥厚、炎症反应和纤维化。共鉴定出563种入血化合物（其中原型成分367种，代谢产物196种），在中药系统药理学数据库中筛选出5种关键活性成分，对应63个靶点。网络分析揭示了44个交集基因，其中以芒柄花素（Formononetin）、知母皂苷BII（Timosaponin BII）和辛那素（Sinensetin）为核心成分，PTGS2、PPARG和HSP90AA1为枢纽靶点。PPI分析进一步识别出ESR1、PTGS2、PPARG、HSP90AA1、JUN等关键基因及其他15个相关基因。KEGG通路分析表明，SXQY主要通过Ca²⁺、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B、环磷酸腺苷以及炎症和激素相关信号通路发挥作用。综上所述，SXQY通过多成分、多靶点、多通路机制改善心脏功能并减轻心肌重塑，从而对心力衰竭产生保护作用。

引言

心力衰竭（HF）是一种临床综合征，由心脏结构或功能异常导致心室充盈和射血能力受损，从而引发一系列临床体征和症状¹。作为多种心脏疾病的终末阶段，HF 显著降低患者的生活质量，并导致高死亡率和频繁的再住院，给家庭和社会带来沉重的疾病负担^2,3。在临床管理中，药物治疗是 HF 治疗的基础和核心，主要包括利尿剂、肾素-血管紧张素系统抑制剂、β受体阻滞剂、盐皮质激素受体拮抗剂以及钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂等关键药物类别^3,4,5,6。尽管这些药物在一定程度上改善了 HF 患者的预后，但每类药物均存在一定的局限性和不良反应，例如电解质紊乱、心动过缓和尿路感染等⁷。因此，心力衰竭的药物治疗仍需进一步研究。

中医（Traditional Chinese Medicine, TCM）在长期治疗心力衰竭（HF）的过程中积累了丰富的临床经验。其强调整体调节和多靶点干预，提供了一种独特的治疗思路⁸。近年来，多项随机对照试验（RCTs）已证实中药复方对心力衰竭具有治疗效果^{9,10,11,12,13,14,15}。生陷祛瘀汤（Shengxian Quyu decoction, SXQY）已开始接受严格的随机对照试验以验证其疗效，但其具体的治疗机制仍需进一步和更全面的研究¹⁶。网络药理学作为一门融合系统生物学、多靶点药理学和计算分析的新兴学科，为阐明中药复方的整体作用机制提供了有力工具^17,18,19。因此，本研究采用非靶向代谢组学与网络药理学相结合的整合策略，鉴定SXQY的入血成分并阐明其潜在的治疗机制。本工作旨在为SXQY的进一步临床应用提供理论基础。

方案

所有实验操作均经中日友好医院动物伦理与福利委员会审查批准（批准号：zryhyy21-23-01-09），并遵循替代、减少和优化原则，以最大限度地减少动物使用数量和减轻动物痛苦。负责数据采集与分析（包括超声心动图测量和组织学评估）的研究人员对分组情况设盲。

SXQY 样品的制备

SXQY 由以下草药成分组成：Astragalus membranaceus（黄芪）（30 g）、Codonopsis pilosula（党参；20 g）、山茱萸（山萸肉；15 g）、Sparganium stoloniferum（三棱；12 g）、Curcuma zedoaria（莪术；15 g）、Cimicifuga heracleifolia（升麻；10 g）、Bupleurum chinense（柴胡；10 g）、Platycodon grandiflorus（桔梗；10 g）、Anemarrhena asphodeloides（知母；15 g）和益母草（益母；15 g），每剂总生药量为 152 g。所有药材均购自中国—日本友好医院药剂科，并由主任药师根据标准生药学鉴定方法进行鉴定。临床上，SXQY 的给药剂量为每日一剂（152 g）。假设成年成人平均体重为 70 kg，则相应的人体剂量为 2.17 g（生药）/kg。根据人与大鼠之间的体表面积归一化换算，计算得出等效大鼠剂量为 13.67 g（生药）/kg。在制备汤剂时，将一剂 SXQY 以每克生药加 10 mL 蒸馏水的比例（w/v，基于浸泡前初始溶剂体积，浸泡后不调整体积）浸泡 1 小时，随后使用电热套加热至沸腾，并在 100°C 下持续沸腾 1 小时。提取液经纱布（孔径 200–300 µm）过滤，药渣再按相同条件重复提取两次。合并滤液后，在 60°C 下使用旋转蒸发仪减压浓缩至最终体积 111 mL，得到浓度为 1.37 g（生药）/mL 的浓缩液。浓缩后的汤剂再次经纱布（孔径 200–300 µm）过滤，于 4°C 保存，并在 24–48 小时内使用。给药时直接使用该溶液，灌胃体积根据 1.37 g/mL 的浓度计算，约为 10 mL/kg，以达到 13.67 g/kg 的目标剂量。

动物模型

将18只8周龄雄性Sprague–Dawley（SD）大鼠饲养于标准环境条件下（23°C ± 2°C，相对湿度50 ± 5%，12小时光照/黑暗循环），自由摄食和饮水。根据随机数字表将动物随机分为三组（每组n = 6）：假手术组（Sham）、横主动脉缩窄组（TAC）和SXQY治疗组（SXQY）。TAC组和SXQY治疗组大鼠通过吸入异氟烷（诱导浓度4%，维持浓度2%）进行麻醉，并仰卧于恒温加热垫上，维持体温在37°C。通过足底夹捏无反射反应、呼吸频率稳定且无自发运动来确认麻醉深度。双眼涂抹眼用软膏以防止角膜干燥。经气管插管后，将动物连接至小型动物呼吸机，潮气量为每200 g体重4–6 mL，呼吸频率为每分钟70次，吸气与呼气时间比为1:1。

所有手术操作均在无菌条件下进行。手术器械通过高压灭菌法进行消毒，手术区域则通过剃毛后使用聚维酮碘消毒，再用70%乙醇处理。完成手术部位准备后，于左侧胸壁做皮肤切口，钝性分离胸大肌和胸小肌以暴露肋骨。在左侧胸骨旁第二至第三肋间处做一长约1.0 cm的横向切口。钝性分离血管和筋膜后，轻柔牵拉胸腺以充分暴露主动脉弓。

使用无菌弯镊在无名动脉右侧与左颈总动脉之间小心抬起主动脉弓，并将一根2-0丝线从下方穿过。使用前，将钝头弯形16号针头（外径1.6 mm）手动修整为钝头并弯成适当弧度，随后经高压灭菌处理。将制备好的钝头弯针平行置于主动脉弓旁，然后将丝线在主动脉和针头周围紧密结扎。迅速抽出针头以形成标准化的缩窄，复位胸腺组织。确认无活动性出血后，逐层关闭胸壁和皮肤。术后继续机械通气约10分钟，直至动物自主呼吸恢复，表现为呼吸频率稳定且规律，并能在无呼吸机支持下维持自主呼吸。此时拔除气管插管。假手术组动物接受相同的手术操作，但不结扎主动脉弓。

手术后，对切口部位进行消毒，并将动物置于清洁的恢复笼中，以降低感染风险。随后将大鼠送回动物饲养设施进行恢复和常规饲养。使用布托啡诺（0.05 mg/kg，皮下注射）进行镇痛。在术后前72小时内，每12小时观察一次大鼠是否出现疼痛、痛苦或手术并发症的迹象，包括活动减少、竖毛、异常姿势、呼吸困难或伤口裂开。

手术后3天，SXQY治疗组大鼠按1 mL/100 g体重剂量灌胃给予SXQY汤剂，持续9周。同时，假手术组和TAC组大鼠以相同体积（1 mL/100 g体重）的蒸馏水灌胃处理。

经胸超声心动图

治疗期结束后，对所有组别进行经胸超声心动图检查。大鼠通过吸入异氟烷进行麻醉，并仰卧于专用成像平台上。仔细剃除胸部前侧毛发，并涂抹足量超声耦合剂。采用配备高频探头（18–40 MHz）的高分辨率小动物超声系统，在B模式和M模式下进行超声成像。将探头轻柔地置于涂有耦合剂的区域，设置深度为12.29 mm，增益为22 dB，并调整焦点以优化图像质量。采集图像和视频片段用于后续定量分析。测量左心室舒张末期内径（LVIDd）和舒张末期左心室后壁厚度（LVPWd），并根据M模式测量结果，采用Teichholz公式计算左心室射血分数（LVEF）。每个参数的测量值取3–5个连续心动周期的平均值。所有超声心动图的采集与分析均由经过正式培训并具备资质的超声心动图操作人员，依照标准化超声心动图操作规程完成。

样品采集与处理

超声检查后，用异氟烷对大鼠进行麻醉。将动物置于仰卧位，打开胸腔以暴露心脏。迅速切除心脏，用冷磷酸盐缓冲液冲洗，并沿矢状面进行切分。心脏组织立即在4°C条件下用4%多聚甲醛固定24小时，随后依次经梯度乙醇（70%、80%、90%、95%和100%）脱水，每步1小时，在此过程中组织逐渐变为半透明且无明显收缩。样品经二甲苯透明处理后，在60°C下用熔融石蜡浸润3小时，并在室温（RT；20°C–25°C）下冷却固化。将石蜡包埋的心脏组织块修整后，用切片机切成4–6 µm厚的切片。切片漂浮于45°C水浴中展平，然后捞取至载玻片上，并在37°C–40°C下过夜干燥。载玻片置于室温低湿度条件下保存，并在1周内用于组织学染色。

苏木精-伊红（HE）染色

石蜡包埋切片按以下步骤处理。首先将切片依次浸入二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中各5分钟以脱蜡，随后通过无水乙醇Ⅰ、Ⅱ及梯度乙醇溶液（95%、90%、80%、70%和50%）各5分钟进行水化，最后用蒸馏水冲洗，直至无可见蜡残留。然后将切片用 Harris 苏木精染色5分钟，并用流水冲洗1–2分钟。接着用酸性乙醇溶液分化约1–2秒，分化终点通过肉眼观察确定，即背景呈淡色而细胞核染色仍清晰分明。随后在37°C–45°C的水中进行蓝化处理，并用蒸馏水冲洗。之后，切片用醇溶性伊红复染40秒，经蒸馏水洗涤后，通过梯度乙醇脱水，二甲苯透明，最后用中性树胶封片。

马松染色

石蜡包埋切片依次在二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中脱蜡，每次5分钟；随后经无水乙醇Ⅰ、Ⅱ及梯度乙醇溶液（95%、90%、80%、70%和50%）各5分钟进行水化，最后用蒸馏水漂洗。切片浸入预冷至4°C的0.5%醋酸溶液中1秒，随后用商品化Masson三色染色试剂盒中的品红溶液染色10分钟，再用磷钼酸分化5分钟，最后用苯胺蓝复染3分钟。所有试剂均来自同一商品化试剂盒，并按照生产商说明书使用。染色完成后，切片用预冷至4°C的醋酸溶液漂洗三次（每次约30秒），经梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

用于代谢组学分析的血清样本采集

选取6只8周龄雄性SD大鼠，饲养条件与上述体内实验相同。采用计算机生成的随机化方法，将动物随机分为SXQY处理组和溶剂对照组（蒸馏水；每组n = 3）。SXQY组大鼠按1 mL/100 g体重剂量经口灌胃给予SXQY，对照组则给予等体积的蒸馏水。连续每日灌胃7天，第7天最后一次给药剂量加倍。末次给药后，动物禁食12 h。使用异氟烷麻醉大鼠，直至足底回缩反射消失，以确认达到充分麻醉状态。采用无菌毛细管从眶后静脉丛采集血液样本，并立即转移至不含抗凝剂的1.5 mL微量离心管中。全血在室温下静置1 h后，于4°C以1000 × g离心15 min，以获取血清。当上层透明血清层与血凝块清晰分离时，小心吸取上清液血清并转移至洁净的微量离心管中。血清样品储存于−80°C，待测入血成分。

代谢组学分析的样品预处理

血清样本从 −80°C 保存条件下取出后置于冰上解冻，并短暂涡旋混匀（10 秒），以确保样本均匀。取 100 µL 血清转移至 1.5 mL 微量离心管中，随后加入 500 µL 提取溶剂（含 2-氯-L-苯丙氨酸作为内标，终浓度为 1 µg/mL 的 20% 乙腈-甲醇溶液），以诱导蛋白质沉淀。混合物剧烈涡旋 3 分钟，然后在 4°C 下以 12,000 × g 离心 10 分钟。取 470 µL 上清液转移至新管中，在受控的低流量氮气条件下使用氮吹仪蒸发至完全干燥。用 200 µL 70% 甲醇-水溶液重新溶解残渣，涡旋 1 分钟后，在 4°C 下以 12,000 × g 离心 10 分钟，将 180 µL 澄清上清液转移至自动进样瓶中，用于液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析。

取200 µL SXQY样品，转移至预先标记的1.5 mL离心管中。按1:1（v/v）的体积比向每个样品中加入内标提取液。混合物涡旋振荡15分钟，于4°C下以12,000 × g 离心3分钟。小心收集上清液，经0.22 µm微孔滤膜过滤，得到无可见颗粒的透明滤液。将滤液转移至自动进样瓶中，于4°C保存，待进行超高效液相色谱-串联质谱（UPLC–MS/MS）分析。

内标溶液的制备

通过将1 mg参考标准品溶解于1 mL 70%（v/v）甲醇-水溶液中，配制内标物（2-氯-L-苯丙氨酸）储备液，得到浓度为1,000 µg/mL的溶液。再用相同溶剂将该储备液稀释，获得终浓度为1 ppm的工作用内标溶液。工作液需新鲜配制，于4°C保存，并在48–72小时内使用。

UPLC–MS/MS 条件

采用超高效液相色谱系统与串联质谱仪联用进行色谱分离。分离在维持于40°C的C18色谱柱上完成，流速为0.35 mL/min，进样体积为4 µL。流动相由含0.1%（v/v）甲酸的超纯水（A）和含0.1%（v/v）甲酸的乙腈（B）组成。梯度洗脱程序如下：0.0 min时为5% B；线性增加至2.0 min时为25% B，3.0 min时为35% B，5.0 min时为60% B，6.0 min时为99% B；在99% B条件下保持1.5 min；于7.6 min时返回至5% B；并在5% B条件下平衡至10.0 min。

采用配备电喷雾电离源的高分辨质谱仪，在正离子和负离子模式下进行质谱检测。正离子模式下的喷雾电压设置为3500 V，负离子模式下为3200 V。鞘气和辅助气体流速分别设定为30和5个任意单位（由仪器定义）。离子传输管温度和汽化器温度分别维持在320°C和300°C。全扫描质谱（Full MS）在m/z 84–1250范围内采集，分辨率为35,000，自动增益控制（AGC）目标值为1.0 × 10⁶；随后进行数据依赖的二级质谱（MS/MS）采集（前10个信号最强的离子），分辨率为17,500，AGC目标值为2.0 × 10⁵，隔离窗口为1.0–1.5 m/z。采用分步归一化碰撞能量，分别为30、40和50。选择信号强度最高的前10个母离子进行碎裂，动态排除时间为3秒。

原始数据处理

使用 ProteoWizard 将原始质谱数据转换为 mzML 格式。为确保分析的可靠性，通过等体积混合所有血清样本制备混合的质量控制（QC）样本。在整个超高效液相色谱-串联质谱（UPLC–MS/MS）分析过程中，以固定间隔（每分析 5–10 个样本插入一次 QC 样本）进样 QC 样本，以监测仪器稳定性、保留时间一致性及信号重复性。根据 QC 样本中峰强度的相对标准偏差评估重复性。

使用 XCMS 软件包进行峰检测、保留时间校正和峰对齐。在任一组内缺失率超过 50% 的特征被排除在后续分析之外。随后，采用基于支持向量回归（SVR）的归一化方法，在 R 统计软件中利用基于质控样本（QC）的建模对峰面积进行信号漂移校正，以校正分析过程中信号的漂移。

通过将校正后的特征与内部参考标准品库（包含约5,000种化合物，均具有MS1和MS2谱图数据；为专有资源，不公开）以及公开可用的谱图数据库进行比对，完成代谢物鉴定。所用数据库包括人类代谢组数据库（HMDB）、代谢物与串联质谱数据库（METLIN）、MassBank以及全球天然产物社会分子网络（GNPS），比对依据为精确质量匹配、保留时间对齐以及MS/MS谱图相似性。质量匹配时，母离子（MS1）和碎片离子（MS2）的质量容差设为±25 ppm，保留时间容差为±6秒。在谱图库检索中，母离子（Q1）的质量容差设为±25 ppm，MS/MS碎片离子设为±50 ppm，并要求最低MS/MS匹配得分不低于0.3。仅保留综合鉴定得分高于0.5的代谢物用于非靶向鉴定。最终得分由碎片匹配得分（权重0.1）、正向匹配得分（权重0.3）和反向匹配得分（权重0.6）加权求和计算得出。正负离子化模式下获得的数据在化合物水平上进行合并。对于重复的注释条目，选择鉴定置信度最高且得分最高的条目保留。最终确定的注释结果被汇总生成代谢物注释文件。

吸收化合物的鉴定标准

吸收的原型成分定义为在SXQY提取物和SXQY处理组中检测到的化合物，且其保留时间在±0.1 min的容差范围内相匹配。此外，这些化合物在SXQY处理组中的峰面积需至少是溶剂对照组的两倍，或在溶剂对照样品中未检出。

采用另一组标准鉴定吸收的代谢物。这些化合物在SXQY提取物中未被检测到，但在SXQY处理组中存在。其质谱特征需与典型的代谢转化一致，包括羟基化（Δm/z = +15.9949 Da）和去甲基化（Δm/z = −14.0157 Da）。此外，根据信号漂移校正后的归一化峰面积，SXQY处理组中的峰面积需至少是溶剂对照组的两倍，或在溶剂对照样品中相应信号不可检出。

吸收化合物相关基因的获取

通过传统中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP；https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.ph；2026年1月访问）对入血成分进行筛选²⁰。根据已建立的药代动力学阈值，口服生物利用度≥30%且类药性≥0.18的化合物被筛选为候选生物活性成分²¹。随后检索这些保留化合物对应的潜在靶点，并利用UniProt数据库将所有靶点标识符标准化为官方基因符号²²。

疾病相关靶点与交集基因的获取

以“心力衰竭”为检索词，在 GeneCards 数据库（https://www.genecards.org/；访问时间：2026 年 1 月）中收集与心力衰竭（HF）相关的基因，并筛选相关性评分 ≥ 10 的基因用于后续分析。随后，利用 Weishengxin 平台（https://www.bioinformatics.com.cn；访问时间：2026 年 1 月）将心力衰竭相关靶点与 TCMSP 数据库中获得的化合物相关靶点进行交集分析。将获得的共同基因为交集靶点，用于后续的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络构建及功能富集分析。

网络构建与功能富集分析

使用 STRING 数据库（http://cn.string-db.org/；访问时间为 2026 年 1 月）对鉴定出的靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）分析²³，设置物种为智人（Homo sapiens），置信度评分阈值 ≥0.7。将相互作用数据导入 Cytoscape 可视化工具进行网络可视化。利用该可视化工具中的 NetworkAnalyzer 插件进行拓扑分析，并使用 CytoHubba 插件识别枢纽基因^24,25。对交集靶点进行基因本体（Gene Ontology, GO）富集分析，包括生物过程（biological process, BP）、细胞组分（cellular component, CC）和分子功能（molecular function, MF）三个类别。将 P 值 < 0.05 的 GO 条目视为具有显著性，从每个类别中选取前 10 个富集最显著的条目进行可视化展示²⁶。进一步利用统计软件中的 clusterProfiler 软件包对交集靶点进行京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG）通路富集分析。P 值 < 0.05 的通路被认为具有统计学显著性，并选取前 20 条富集通路进行可视化。随后基于这些通路构建靶点-通路相互作用网络²⁷。

统计学分析

数据以均值 ± 标准差表示。在分析前，采用 Shapiro-Wilk 检验评估数据分布的正态性，采用 Levene 检验或 Brown-Forsythe 检验评估方差齐性。组间统计学比较采用单因素方差分析，随后使用 GraphPad Prism 进行 Tukey 事后检验。P < 0.05 被认为具有统计学显著性。

结果

经胸超声心动图

超声心动图分析显示，TAC 大鼠出现明显的心脏重构和功能障碍（图1）。与假手术对照组相比，TAC 显著增加了舒张末期左室内径（LVIDd）和舒张末期左室后壁厚度（LVPWd），同时左室射血分数（LVEF）显著降低。值得注意的是，与 TAC 组相比，SXQY 给药部分逆转了这些病理变化，表现为 LVIDd 和 LVPWd 显著减小，同时 LVEF 明显改善。

图1。各组间心脏功能参数的比...

讨论

参芎注射液（SXQY）已在临床实践中广泛应用二十余年，证实对多种心血管疾病具有治疗作用。近年来，其应用已扩展至射血分数降低和射血分数轻度降低的心力衰竭患者¹⁶。在本研究中，通过主动脉缩窄（TAC）手术建立大鼠心力衰竭（HF）模型，以模拟HF的病理改变，同时对部分大鼠给予参芎注射液治疗，以评估其疗效。采用经胸超声心动图、苏木精-伊红（HE）染色和马松（Masson）染色评价模型是否成功建立以及参芎注射液是否发挥干预作用。TAC诱导的心力衰竭显著增加左心室舒张末期内径（LVIDd）和左心室后壁舒张末期厚度（LVPWd），同时降低左心室射血分数（LVEF），提示心脏功能受损。参芎注射液治疗部分逆转了上述改变，与TAC组相比，LVIDd和LVPWd减小，LVEF改善。组织学分析显示，TAC组存在心肌细胞肥大、心肌结构紊乱及广泛炎症，并在马松三色染色中呈现明显纤维化。参芎注射液治疗减轻了这些病理改变，促进心肌细胞排列趋于规整，减轻炎症反应，并减少胶原沉积和纤维化区域，提示其对心肌纤维化具有保护作用。这些结果表明，参芎注射液显著缓解了压力超负荷引起的心肌病理性重塑和纤维化。这些实验结果通过证实参芎注射...

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
2-氯-L-苯丙氨酸	Aladdin	C105993-1g	内标物 ≥98%
乙腈（LC-MS级）	Aladdin	A120771-1L	提取溶剂
乙酸	Solarbio	G1340	Masson染色；预冷至4 °C
自动进样瓶	安捷伦	5190-9590	用于LC-MS/MS样品上样
布托啡诺	Cerilliant	B-044S	镇痛剂
C18 色谱柱（1.8 μm，2.1 mm × 100 mm	沃特斯	176001125	ACQUITY Premier HSS T3 色谱柱
毛细管，无菌	Fisherbrand	22-362-566	眼后静脉丛采血
离心机（带制冷功能）	久保田	N61196-F000	用于血清和样本处理
clusterProfiler 包	Bioconductor	—	用于KEGG富集分析的R软件包；v4.0.2
无菌弯头镊子	HL-SQX	HL-JP	主动脉弓操作
Cytoscape 软件	NHGRI	NIH NHGRI U24 HG012107	版本 6.4.1
专用成像平台	富士胶片 VisualSonics	VisualSonics Vevo 1100 超声成像系统	超声心动图检查中的动物体位
蒸馏水	N/A	N/A	煎煮液制备与溶剂对照
电加热套	Midea	WK2102	煎煮沸腾
气管内导管	CWE公司，美国	SAR-1000	经气管插管；本研究中使用的气管插管已整合至呼吸机配置中，并非独立或单独的装置
乙醇（纯）	北京益利精细化学品有限公司	64-17-5	脱水与灭菌
甲酸	Aladdin	O930702	流动相添加剂
纱布	Solarbio	YA0720	煎煮过滤；200–300 μm 孔径大小
GeneCards 数据库	GeneCards	—	疾病相关靶点检索；访问时间：2026年1月
GNPS数据库	加利福尼亚大学圣地亚哥分校	—	光谱数据库；版本 1.3.16，数据存档于 2025 年 12 月
GraphPad Prism 软件	GraphPad Software	—	版本 10.1.2；SCR_002798
加热垫（恒温式）	Physitemp	HP-4M	维持在 37 °C
苏木精和伊红（H&E）&E) 染色试剂盒	Solarbio	G1120	组织学染色
高频换能器	VisualSonics	Vevo F2	18–40 MHz
高分辨率质谱仪	赛默飞世尔科技	Q Exactive	Q Exactive HF-X
高分辨率小动物超声成像系统	富士胶片 VisualSonics	VisualSonics Vevo 1100 超声成像系统	Vevo 2100
HMDB数据库	阿尔伯塔大学威沙特研究组 / 代谢组学创新中心	—	光谱数据库；HMDB 当前版本 5.0；发布版本 5.0；2022 年 1 月
内部参考标准品库	METWARE	—	内部参考标准库的组成：该库共包含5,000种化合物，涵盖MS1（前体离子）信息及MS2（碎片离子）质谱数据。 可用性声明：库数据格式为.txt。 储存条件：数据库存储于公司内部服务器。 访问权限：该自建标准库为公司专有的内部质谱库，仅用于公司受控分析流程中的代谢物鉴定、结果验证和质量溯源，不对外公开下载。客户可获取基于该库生成的注释结果、匹配信息及必要的字段说明。
异氟烷	Sigma-Aldrich	792632	吸入麻醉剂
超高效液相色谱系统（UPLC）	SCIEX	ExionLC AD	ExionLC AD
MassBank 数据库	MassBank联盟；日本质谱学会 / MassBank欧洲	—	光谱数据库；版本 2024.06；数据存档于 2025 年 12 月
马松’s Trichrome 染色试剂盒	Solarbio	G1340	组织学染色
膜滤器（0.22 μm)	Beyotime	FF362	聚醚砜（PES）
METLIN数据库	斯克里普斯研究所 / 苏兹达克实验室	RRID: SCR_010500	光谱数据库；该数据库不提供固定的年度版本号；数据下载于2023年
甲醇（LC-MS级）	北京益利精细化工有限公司	67-56-1	提取溶剂
微型离心管（1.5 mL）	康宁生命科学（吴江）有限公司	MCT-150-C	样品处理
切片机	Leica	DSC1	组织切片
中性树脂	Solarbio	G8590	载玻片封片
氮吹仪/气源	Organomation	N-EVAP	样品干燥
眼用软膏	Aladdin	08-03-8009	麻醉期间的眼部保护
石蜡	Solarbio	YA0010	组织包埋
4% 多聚甲醛	Solarbio	P1110	组织固定
磷酸盐缓冲液	杜有由	DYP1021	组织洗涤
磷钼酸	Solarbio	G1340	Masson染色
聚维酮–碘	Solarbio	IP3800	外科消毒
ProteoWizard 软件	ProteoWizard 基金会	—	版本 3.0.19254
R 软件	R 基金会	—	版本 4.2.2
旋转蒸发仪	青岛精诚仪器仪表有限公司	JC-2LZF	减压浓缩煎煮液
丝线缝合线（2-0）	弗尔安	NL30RH26A-76	主动脉缩窄
小型动物呼吸机	CWE 公司，美国	SAR-1000	机械通气
斯普拉格–Dawley大鼠（雄性，8周龄）	SPF Bio Co., Ltd.	—	RGD_70508；许可证号 SCXK(京)2024-0001
STRING 数据库	STRING 联盟	—	蛋白质相互作用分析；2026年1月访问
支持向量回归归一化软件包/脚本	MetNormalizer	—	信号漂移校正；v1.3.02
TCMSP数据库	TCMSP	—	化合物与靶点检索；2026年1月访问
UniProt数据库	UniProt 联盟	—	基因符号标准化
超声耦合剂	MAGNAFLUX	25-912	超声心动图
超纯水	实验室制备的	—	流动相溶剂
涡旋混合器	Yalin	VM-ST	样品混匀
水浴锅	Julabo	PURA22	切片在45℃下漂浮 °C
Weishengxin 平台	魏圣心	—	靶向交叉分析；访问于2026年1月
XCMS 软件	R 基金会	—	版本 3.16.1
二甲苯	Aladdin	X775162	脱蜡