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方法文章

蛋白质的电泳分离

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DOI:

10.3791/758

2008年6月12日

本文内容

摘要

在本视频中,我们演示了一种利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行蛋白质电泳分离的方法。

摘要

电泳可用于分离复杂的蛋白质混合物(例如来自细胞、亚细胞组分、层析柱组分或免疫沉淀物的蛋白质),研究亚基组成,并验证蛋白质样品的均一性。此外,电泳也可用于纯化蛋白质,以供后续应用。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,蛋白质在电场作用下通过聚丙烯酰胺凝胶矩阵中的孔隙迁移;孔隙大小随丙烯酰胺浓度的增加而减小。蛋白质的迁移速率取决于孔隙大小以及蛋白质所带电荷、分子大小和形状。本单元介绍在变性条件下(即在十二烷基硫酸钠(SDS)存在下)进行不连续凝胶电泳的标准Laemmli方法。

方案

该实验方法的完整文字方案可在《分子生物学实验指南》中获取。

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作者无任何利益冲突需要披露。

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标签

蛋白质电泳SDS-PAGE凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶蛋白质分离Laemmli 法样品制备缓冲液配制凝胶聚合电源