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免疫印迹分析

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DOI:

10.3791/759

2008年6月20日

本文内容

摘要

免疫印迹(Western印迹)是一种快速且灵敏的检测和表征蛋白质的方法,其原理是利用抗原与抗体结合的特异性。本视频提供了蛋白质分离、将蛋白质转印至膜上、免疫杂交以及使用显色或化学发光底物进行检测的实验方案。

摘要

免疫印迹(western blotting)是一种快速且灵敏的检测与表征蛋白质的方法,其原理基于抗原-抗体识别的特异性。该方法包括通过凝胶电泳对蛋白质、糖蛋白或脂多糖进行溶解和电泳分离,随后将其定量转移并不可逆地结合至硝酸纤维素膜、PVDF膜或尼龙膜上。免疫印迹技术可用于鉴定多克隆或单克隆抗体所识别的特定抗原,具有高度灵敏性(可检测低至1 ng的抗原)。本单元提供了蛋白质分离、蛋白质转膜、免疫杂交以及利用显色或化学发光底物进行检测的详细实验方案。 关键词:免疫印迹,western blotting,蛋白质检测,抗原-抗体反应,凝胶电泳,转膜,免疫杂交,显色底物,化学发光底物

方案

该实验方法的完整文字方案可在《分子生物学实验指南》中获取

披露

作者无任何利益冲突需要披露。

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标签

蛋白质分离凝胶电泳膜转移抗体探针显色底物化学发光检测蛋白质印迹硝酸纤维素膜聚偏二氟乙烯膜