土壤中蚯蚓种群的分析

1. 芥末浓缩液的制备

1. 打开天平，将称量皿放在天平上，然后将天平归零。
2. 称取 38.1 g 研磨好的芥末粉至称量皿中，并转移至带盖的塑料容器中。
3. 用量筒量取 100 mL 自来水，加入装有芥末的塑料容器中。
4. 盖紧容器盖子，剧烈摇晃，直至芥末完全从容器底部脱离并溶解于自来水中。
5. 让溶液静置 24 小时，以实现芥末中辣椒素的最大程度提取。
6. 将两个 8 L 的运水桶各装入约一半体积的自来水（每个运水桶约 4 L）。
7. 多次摇晃芥末浓缩液使其混合均匀，然后将芥末浓缩液转移至运水桶中。
8. 从运水桶中倒回少量溶液至浓缩液容器中，剧烈摇晃，再倒回运水桶中，以确保所有浓缩液均转移至稀释液中。
9. 密封运水桶盖子，确保盖子上的阀门处于“关闭”位置，倒置运水桶三次，使溶液充分混匀。

2. 蚯蚓的提取

1. 为每个采集点标记三个样品杯。
2. 携带一个样方、已标记并带盖的采样杯，以及装有稀释芥末溶液的供水容器，前往采样地点。
3. 到达采样点后，尽可能清除灌木、落叶或覆盖物，充分暴露地面。
4. 将样方随机放置在清理后的地面上。
5. 将供水容器倒置再混合三次。
6. 将供水容器瓶盖上的阀门转至“开启”位置，向样方内倾倒约三分之一（1.3 L）的稀释芥末溶液，重点集中在样方区域的中心。若土壤已饱和且溶液积聚，应停止倾倒，待积聚的溶液渗入土壤后再继续倾倒。
7. 在接下来的五分钟内密切观察样方区域是否有蚯蚓出现，包括样方边缘正下方的区域。
8. 使用镊子采集在样方区域内出现的所有蚯蚓，在蚯蚓完全钻出地面后将其转移至第一个样品杯中。五分钟后盖上样品杯盖子，随后前往下一个采样点。
9. 对所有采样点重复上述采集步骤，每个采集点进行三次重复（共6个重复）。

3. 比较不同采集地点之间的蚯蚓种群密度

1. 统计每个样本采集的蚯蚓数量，并计算每个采集地点的平均值和标准差。
2. 为比较不同采集地点的蚯蚓密度，根据平均值绘制柱状图，并利用标准差在图中添加误差线。