通过可培养方法进行藻类计数

1. 称取10 g土壤样品，该土壤应为从田间采集后保持湿润状态，或已添加水分并保持湿润2-3天。注意土壤应保持湿润但不可饱和。
2. 将10 g土壤加入95 mL改良布里斯托尔溶液中，制备10倍梯度稀释液（图1）。配制改良布里斯托尔溶液的方法：将以下成分溶解于1,000 mL水中：0.25 g NaNO₃、0.025 g CaCl₂、0.075 g MgSO^-₄ · 7H₂O、0.075 g K₂HPO₄、0.018 g KH₂PO₄、0.025 g NaCl 和 0.5 mg FeCl₃。
3. 通过将1 mL悬浮液A加入9 mL布里斯托尔溶液中继续进行稀释，并依次进行后续连续稀释。
4. 分别取稀释度为10^-2至10^-6的各稀释液1 mL，接种至每组5个重复的、各含9 mL改良布里斯托尔溶液的试管中（表1）。
5. 将封口的试管置于有阳光照射的环境中，培养最长4周。
6. 每隔7天观察一次试管中的藻类生长情况。出现藻类生长的试管呈现绿色。

图1. 如何制备10倍梯度稀释系列。

试管	稀释度
B	10-2
C	10-3
D	10-4
E	10-5
F	10-6

表1. 试管及稀释度。