5.9: 药物注射 IV

1. 心内注射

1. 地标和定位: 将鼠标或鼠置于右侧侧卧床 (左侧朝上) 或背卧床, 并识别地标。
   1. 将心脏的位置与肘部的点和胸骨的左侧大致水平.
   2. 在肘点处的肋骨之间插入针.
   3. 在背部卧床的动物中, 将针头插入与表平行的胸部.
   4. 在侧卧床的动物中, 将针插入垂直于表的胸部.
2. 文章的注入
   1. 确保在将针头插入心脏后, 针的移动极少, 以防止肌肉被撕裂并导致心包囊出血, 因为这会影响心脏功能.
   2. 吸入注射器以确定适当的放置位置。注射器的中心经常有一闪血.
   3. 握住注射器, 以便在针头定位在心脏后, 不将手放在注射器上进行注射.
   4. 以缓慢而稳定的方式注入文章.
   5. 缓慢取出针头以减少出血.
   6. 感染呼吸窘迫、癫痫、青紫、长期共济失调或其他与注射创伤有关的后遗症的小鼠必须由兽医工作人员评估, 并根据他们的建议进行安乐死.

图1。小鼠心内注射.

2. 静脉注射利用逆行眶丛

1. 注入地标和定位
   1. 将动物放在侧面卧床的平坦表面上.
   2. 将针插入45和 #176 的眼睛内侧眼角; 角对鼻子.
   3. 针的深度必须足够穿透结膜组织, 并在眼球轨道后面和眼丛中前进。当放置针时, 它不应该碰到轨道后面的骨头.
   4. 将食指放在头部顶端, 拇指放在下巴上.
   5. 轻轻地向后和向下拉以收紧皮肤并凸出眼球.
   6. 注意不要将压力施加在气管上, 并限制气流.
2. 注入
   1. 将针放在眼睛后面, 而不是 intra-ocularly.
   2. 确保针的运动一旦插入到后轨道丛中, 或者血管会破裂造成出血, 并使药物流失到眼球后面的组织中。握住注射器, 这样, 一旦针被定位在后轨道丛中, 手就不会在注射器上重新定位.
   3. 不要用注射器吸气, 因为你会将血管折叠起来.
   4. 以缓慢而稳定的方式注入文章.
   5. 取出针头并将光压施加到眼睛以控制出血并提供止血.
   6. 经验丰富、结膜炎或其他与注射创伤有关的后遗症的小鼠必须由兽医工作人员评估, 并根据其建议进行治疗或安乐死

图2。小鼠眼眶内注射.

3. 脚注射液

1. 为了克制, 将动物放在一只后腿隔离的管束中, 并通过抓住窒息的皮肤来伸展。
2. 用水或酒精擦拭脚, 以便在注射之前清除碎片.
3. 在注射部位的后足中心形成一个小气泡。为了避免血管的长度运行的脚, 注入刚刚从中线平行的血管.

图3。小鼠和大鼠脚注射液.

心内、眼眶后和脚垫是生物医学研究人员用于需要通过这些非典型途径递送化合物的实验的一些专业注射方法。

心内注射将化合物输送到左心室，使物质直接进入动脉循环。眼眶逆向路线是尾静脉注射的替代方法，用于将化合物输送到静脉循环中。脚垫注射涉及将物品皮下注射到动物的后足。本视频将说明这些特殊注射技术的注意事项、程序和应用。

让我们从一些背景信息和在开始这些管理程序之前应该考虑的事项开始。

心内给药通常是通过使用超声波将针头引导到心脏的正确位置来完成的。然而，如果使用适当的标志正确执行，则可以在不使用超声可视化的情况下进行给药。请注意，该程序需要使用全身麻醉剂，并且每只动物只允许注射一次用于生存程序。通常使用 27-30 号针头进行这种注射，小鼠和大鼠的最大给药量分别为 100 和 300 微升。

对于通过眼眶后途径进行静脉注射，应该对眼眶静脉结构有一定的了解。小鼠有一个窦，其中几条静脉（即眶上静脉、鼻背静脉、下睑静脉和颞浅静脉）汇合。而在大鼠中，存在多个静脉的网络或神经丛。注射直接进入鼻窦或神经丛。与心内麻醉一样，该程序也需要使用全身麻醉，并且建议每只眼睛每天只注射一次，每只眼睛总共注射两次以进行生存手术。与所有注射一样，应选择最小尺寸的针头 - 通常为 27-30 号 - 建议的最大体积为 150 ？L 每只眼睛。

尽管存在争议，但一些研究仍然需要使用脚垫注射，通常与炎症和肿瘤生长有关。请注意，注射只能用一只脚进行，不能用双侧进行。一旦出现明显的肿胀，就应该每天进行脚垫测量。建议使用 29-30 号针头进行注射，建议的最大体积为 50 °L。注射后，必须密切监测所有动物的疼痛迹象、食物消耗水平和正常行走。通常，当病变或肿瘤干扰动物行走或接触食物和水的能力时，必须对动物实施安乐死。

现在让我们学习注射程序，从心内注射开始。我们将在小鼠中演示该过程，但大鼠的标志和协议相似。

第一步是准备注射器。召回 29 号针头和 1 cc 注射器适用于小鼠。心内注射的最大体积为 100 μL。抽取溶液时，在柱塞和注射材料之间留出少量空气。这是为了让血液在放入心脏时进入注射器。

首先，使用吸入剂或注射麻醉剂麻醉动物。在本系列的另一个视频中查看维持全身麻醉的注意事项。接下来，将动物置于绝缘平台上的背卧位。然后，将前肢用胶带粘在平台上，并在臀部上方的腹部水平放置一条胶带。这是为了进一步稳定动物并避免插入针头后的任何移动。接下来，用棉签用 70% 的酒精润湿动物的胸部。

要确定注射部位，首先找到剑突和胸骨柄。然后，找到两个特征点之间的中点。该点左侧 1-2 毫米处，是进针标志。使用棉签涂抹器，涂抹聚维酮碘以标记针头插入部位。

注射时，将针头垂直于桌子，并将其插入约 2 毫米的深度。然后，对柱塞施加非常轻微的背压。鲜红色的含氧血液应进入注射器针座，这确认了正确的放置。将注射器放在同一位置，并在 30 到 60 秒内缓慢而稳定地注射材料。快速注射可导致细胞聚集和动脉堵塞，由于物质温度明显低于体温而对系统造成冲击，或心室扩张和心律中断。

一旦材料清除了注射器，缓慢而小心地取出针头，不要有任何横向移动，因为这会损害心肌。然后立即从前腿和腹部解开胶带，将动物俯卧放在干净的笼子里，笼子里有足够深的垫料作为绝缘层。请注意，该回收笼的一半位于加热源上，而被麻醉的动物位于笼子的加热侧。这可以防止体温过低，并且当动物从麻醉中恢复时，它将能够根据需要从加热的一侧移开。

接下来，让我们学习利用大鼠眶后神经丛进行静脉注射的方法。同样，我们将在小鼠上演示该过程，但地标和大鼠的协议相似。

将适当的针头连接到选定的注射器上，并填充注射材料。请记住，通常会使用 27-30 号针头和尽可能小的注射器，最大体积为 150 微升。

要开始该程序，首先麻醉动物。然后，将其以侧卧位放在平坦的表面上。现在将食指放在头顶上，将拇指放在下巴上，然后轻轻地向后和向下拉。这是为了收紧皮肤并突出眼球。注意不要对气管施加压力并限制气流。如果计划多次注射，请使用局部眼科麻醉剂，如丁卡因或丙丙卡因。

将针头插入眼睛的内眦，呈 45？与鼻子成角度。深度必须足以穿透结膜组织并进入眼眶和鼻窦。它不应遇到眼眶后部的骨头。为避免血管破裂，请确保针头在插入后保持最小的移动。不要抽吸，因为这会使血管塌陷。以缓慢而稳定的方式注入文章。然后，轻轻抽出针头并对眼睛施加轻微压力以控制出血并提供止血。

最后，让我们回顾一下小鼠和大鼠的脚垫注射方法。首先，连接适当的针头并用正确的体积填充注射器。该程序可以在有意识的动物中完成。

将动物放在约束管中，一只后脚隔离并通过抓住窒息上方的皮肤来伸展。注射前用水或酒精擦拭脚部以去除碎屑。为了避免沿着脚部延伸的血管，注射标志位于中心，但刚好在中线附近，更靠近脚趾。

将针头斜面向上放在注射部位，使其指向脚跟。缓慢而稳定地注射物品，以避免足部组织快速膨胀。当注射材料填充皮下空间时，这将导致脚垫肿胀。在小动物的脚上，注射引起的肿胀可以延伸到脚后跟，而在较大的动物中，它会更局部。

注射后，每天观察动物，如果存在持续肿胀或由于实验方案而出现病变或肿瘤，则使用卡尺进行脚垫测量。该仪器以毫米为单位测量足部厚度，有助于定量肿胀。

现在让我们讨论一些利用心内、眼眶后和足垫注射的示例实验。

心内给药的众多应用之一是开发癌症转移的动物模型。在这里，研究人员使用这种途径注射具有骨定植倾向的肿瘤细胞。在接下来的几天里，他们使用 X 射线和荧光成像技术研究了骨骼中的肿瘤生长情况。在另一项研究中，使用眼眶后途径注射标记中性粒细胞的特异性抗体。然后，在活体成像的帮助下，科学家们能够追踪标记细胞的迁移模式。

最后，研究人员经常使用脚垫注射来分析炎症反应。在这个实验中，研究人员从人类血液样本中分离出外周血单核细胞，将它们与不同的测试抗原混合，然后将溶液注射到动物的脚垫中。最后，他们进行了足部测量以量化由不同抗原引起的肿胀反应。

您刚刚观看了 JoVE 关于常用和专业化合物给药技术的最后一部分。

回顾一下，在第一部分中，我们回顾了最常见的肠外给药途径。在第二章中，我们讨论了肠内和局部手术。第三部分涉及第一组非典型手术，如新生儿皮内、鼻内和颅内。最后，我们在这里讨论了生物医学研究人员在实验室中用于特定目的的另外三种途径。

看完这个系列，你应该对不同的给药技术有更好的了解，你还应该了解与这些化合物给药方案相关的一般和具体注意事项。一如既往，感谢您的观看！