5.12: 麻醉诱导与维护

正确选择手术麻醉药和其他可能的疼痛程序必须由兽医确定。这是基于许多方面, 包括程序的范围和持续时间, 物种和应变, 年龄, 和生理状况的动物.

麻醉剂可作为剂或注射。手术麻醉可以使用注射和吸入麻醉剂的组合来完成。 ²

1。吸入麻醉诱导

吸入麻醉包括异氟醚、七氟醚和地氟醚, 其中最常用的是异氟醚。这些麻醉药使用更频繁, 因为, 与他们, 它是更容易控制麻醉深度。使用吸入麻醉剂进行麻醉的诱导可以用装有精密汽化器的钟罩或感应室来完成.

1. 响铃 jar
   1. 设备: 带有陶瓷或塑料穿孔平台、棉球、液体麻醉剂 (异氟醚、七氟醚或地氟醚) 的钟罐或干燥罐, 以及通风到室外的油烟罩。
   2. 准备
      1. 在引擎盖下使用响铃 jar, 而不是在工作台上, 以避免人员暴露在麻醉气体中.
      2. 用底部的平台组装钟罩, 在 jar 的底部和平台之间创建一个空间。这是必要的, 以防止动物接触到液体麻醉剂.
      3. 戴腈手套或其他防渗手套, 用麻醉剂浸透棉球.
      4. 将棉球放在铃铛罐子的平台下.
      5. 将盖子固定在钟罩上以防止麻醉蒸气的逸出.
   3. 感应
      1. 将该动物的盖子滑向一侧, 将其置于响铃罐中.
      2. 一旦动物在罐子里, 就必须观察它的活动和呼吸以确定麻醉的深度.
      3. 该动物暴露于麻醉剂中, 使其生效.
      4. 一旦动物被完全麻醉, 将盖子滑向一侧, 留出足够的空间以允许引入一只手。抓住麻醉动物的尾巴、颈背或身体, 轻轻地将其从钟罐中取出.
2. 精度气化
   精度气化可用于感应腔或口罩。麻醉机应在每个手术前检查。适当的麻醉应增加, 如果水平低。清理系统应检查, 以确保废气完全清除。对于被动式废气麻醉系统, 应权衡清理罐, 以确定其是否仍然有效。一般来说, 在起始重量超过50克的重量是一个点, 在这个时候, 罐是用。
   1. 设备
      1. 感应室、精密汽化器、废气清除装置 (被动或主动) 和液体麻醉剂 (由使用的汽化器类型确定的异氟醚、七氟醚或地氟醚).
   2. 准备
      1. 装配感应腔, 使输入来自汽化器, 输出到废气清除系统。
   3. 感应
      1. 将动物放入感应室。一些商会有一个滑动盖, 和其他有一个铰链盖闩锁.
      2. 一旦动物在室内, 氧气流就开始, 精确的汽化器在3-4 的感应水平上被打开, 用于异氟醚。较低的麻醉分娩水平将导致更长的诱导时间.
      3. 该动物暴露于麻醉剂中, 使其生效.
      4. 一旦动物完全麻醉, 在取出动物之前用氧气冲洗房间, 以防止人员接触麻醉气体。如果感应室被放在通风柜里, 在开口前用氧气冲洗是不必要的.
      5. 抓住麻醉动物的尾巴、颈背或身体, 然后轻轻地将其从枪膛中取出.
3. 面罩
   1. 设备包括啮齿动物鼻锥或面罩、精密汽化器、废气清除装置 (被动或主动) 和液体麻醉剂 (异氟醚、七氟醚或地氟醚, 由类型使用的汽化器).
   2. 准备
      1. 组装鼻锥或面罩, 这样输入是从蒸发器, 输出是对废气清除系统.
      2. 啮齿类麻醉机通常有一个开关, 将麻醉蒸气从感应室输送到啮齿动物的鼻锥或面罩。确保这是正确设置鼻锥麻醉分娩.
   3. 感应
      1. 由于麻醉气体有难闻的气味, 许多动物会反对被蒙面诱导。首选的方法是使用的感应框, 其次是维修与鼻锥。一旦动物和 #39 的鼻子或脸是安全的面具, 氧气流开始和精密汽化器打开在感应水平5的异氟醚。较低的麻醉分娩水平将导致更长的诱导时间和增加挣扎的动物.
      2. 这是当务之急, 动物的呼吸监测, 因为太坚定的掌握在诱导可能导致窒息.
      3. 一旦动物开始放松, 鼻子或脸部就可以在鼻锥或面罩上进行调整, 一旦完全放松, 麻醉药品的交付就会降到 1.5-0.5 的水平.

2。注射用麻醉药诱导麻醉

注射麻醉剂主要是氯胺酮和镇静剂或肌肉剂的混合物.

常见的组合为: 1) 啮齿动物鸡尾酒, 由氯胺酮 (100 毫克/毫升)、嗪 (20 毫克/毫升)、乙酰 (10 毫克/毫升) 和无菌盐水 (0.9% 氯化钠) 组成;2) 氯胺酮/嗪 2:1, 由氯胺酮 (100 毫克/毫升)、嗪 (20 毫克/毫升) 和无菌盐水 (0.9% 氯化钠) 组成;和 3) 氯胺酮/嗪鼠混合, 其中包括氯胺酮 (100 毫克/毫升), 嗪 (20 毫克/毫升), 和无菌生理盐水 (0.9% 氯化钠). 和 #160; 当使用氯胺酮/嗪组合, 促进只应该做与氯胺酮, 而不是嗪, 由于半衰期这些药. 和 #160; #160;

将氯胺酮与镇静剂和/或肌肉松弛的结合, 需要准备作为一个股票的解决方案, 从中可以抽取个人剂量。试剂必须精确测量, 用无菌生理盐水稀释, 以确保适当的剂量被管理的动物。由于氯胺酮是一种受控物质, 因此, 从瓶子中所使用的数量必须在 a 和 #34 上注明; 受控的药物记录和 #34; 和混合物必须有个人和 #34; 受控物质日志. #34; 当准备混合物时, 慢慢地加入氯胺酮瓶子, 因为它倾向于泡沫, 如果注入的力量。一种无菌塞20毫升瓶用于混合物。瓶子必须正确标明化合物的名称, 日期混合, 到期日期, 氯胺酮批号 (因为它是一个受控物质), 和建议的剂量。到期日可由配料的日期确定, 以最快的时间届满 (取决于设施/状态的规则/准则)。为了准确记录氯胺酮, 必须权衡空瓶和填充瓶。然后, 重量必须记录在标签上的混合物和单独的控制物质的记录表, 为每个瓶子准备。将氯胺酮混合物储存在黑暗、温度控制的区域以保持效力.

1. 制备啮齿动物鸡尾酒
   1. 麻醉液制备设备包括3毫升注射器、12毫升注射器、22克 x 1 和 #34; 针头、1.8 毫升氯胺酮注射剂100毫克/毫升, 1.8 cc 的嗪注射20毫克/毫升, 0.6 cc 的乙酰注射10毫克/毫升, 15.8 毫升无菌生理盐水注射, 和麻醉标签.
   2. 抽取15.8 毫升无菌盐水, 并将其注入瓶中。使用12毫升注射器和3毫升注射器, 并消除气泡的准确测量.
   3. 将氯胺酮、嗪和乙酰添加到瓶子中.
2. 啮齿动物鸡尾酒的感应
   1. 一般来说, 鼠类鸡尾酒用于小鼠麻醉。由于成年大鼠对鼠类鸡尾酒的反应不同, 它最好在5周龄大鼠中使用。啮齿类鸡尾酒可以与吸入麻醉一起使用, 特别是在大鼠体内.
   2. 啮齿类动物鸡尾酒通常根据重量给老鼠, 使用以下演算: (BW x 10)-50 = 升啮齿目动物鸡尾酒被给。这将根据应变、年龄和健康状况而有所不同.
   3. 此解决方案仅提供腹腔。如果注射注, 在组织中会有严重的反应.
3. 准备氯胺酮/嗪 2:1
   1. 准备麻醉液的设备包括3毫升注射器, 22 克 x 1 和 #34; 针头, 10 毫升氯胺酮注射100毫克/毫升, 5 cc 的嗪注射20毫克/毫升, 无菌塞20毫升瓶和麻醉标签.
   2. 将氯胺酮和嗪添加到瓶子中.
4. 感应
   1. 氯胺酮/嗪2:1 用于大鼠的麻醉, 并可与吸入麻醉结合使用。
   2. 氯胺酮/嗪2:1 通常是从0.3 毫升的剂量开始, 并增加了0.02 毫升与随后的麻醉事件。这将根据应变、年龄和健康状况而有所不同.
   3. 氯胺酮/嗪2:1 只给予注.
5. 准备氯胺酮/嗪鼠标混合
   1. 氯胺酮/嗪小鼠混合麻醉液的配制设备包括3毫升注射器、22克 x 1 和 #34; 针头、3.6 毫升氯胺酮注射液100毫克/毫升, 0.4 cc嗪注射20毫克/毫升, 16 毫升无菌生理盐水 (0.9% NaCl), 无菌塞 20 ml 瓶, 和麻醉标签.
   2. 将氯胺酮和嗪添加到瓶子中, 使9:1 的氯胺酮溶液嗪.
   3. 将盐水添加到瓶子中, 导致1:4 的氯胺酮/嗪9:1 的混合物变成盐水.
6. 氯胺酮/嗪鼠标混合的感应
   1. 氯胺酮/嗪小鼠混合也可与吸入麻醉结合使用。
   2. 氯胺酮/嗪小鼠混合一般给予小鼠根据重量, 使用以下计算: (BW x 10)-50 = 升氯胺酮/嗪鼠标混合给出。这将根据应变、年龄和健康状况而有所不同.
   3. 氯胺酮/嗪鼠混合可以给腹腔.

3。麻醉评估

麻醉深度可以通过测试对各种刺激的反应来评估。自愿运动将由身体的身体刺激产生。有关用于麻醉深度评估的物理方法的列表, 请参见表 1.

表 1. 用于评估麻醉深度的物理刺激方法。 ²

生理指标, 如心率、呼吸率、血压、粘膜颜色、毛细血管充盈时间也应使用。虽然一般的观察可以用来检测动物的呼吸率的变化, 利用心率, 或血压进行深度评估, 需要专门的设备。如果有心电图, 心率和心跳的强度可以测量。为了测量血压, 有各种各样的装置安装在尾部甚至整个身体。如表1所述的物理刺激将导致所有这些参数中的三增加.

粘膜, 眼睛, 耳朵, 嘴巴, 鼻子, 肛门的颜色, 和-在较小程度上-观察爪子和尾巴的变化。区域应该是粉红色的, 表示充分的呼吸作用和心脏功能。当动物移动到阶段 IV 麻醉, 呼吸停止, 导致青紫-由蓝色或灰色表明-对黏膜和周围的皮肤.

毛细管重填时间定义为颜色返回到外部毛细管床的时间量, 因为在该区域施加压力后, 它已经被漂白。在麻醉动物的牙龈、耳廓或指甲床上按压涂抹棒或手指。脱皮区域返回粉红色的秒数不应该更多。1-2 秒延长的再填充时间表明心脏收缩的心率或强度降低, 表明动物可能是太深麻醉和接近死亡.

重要的是要利用几个不同的参数来评估麻醉深度。使用相同的脚趾或耳朵反复捏将敏的区域, 和反应将被压抑, 而不是给一个准确的评估麻醉深度。使用备用站点进行脚趾和耳箍评估。麻醉深度应每10-30 分钟在整个手术中重新评估。 ²

研究表明, 在麻醉动物中有心肺的变化。当麻醉与注射药物, 动物体验稳定的呼吸率;然而, 它们显示出心脏输出的变异性。对注射麻醉剂的反应在不同菌株之间有很大的差异, 因此很难对其剂量进行标准化。 ⁷ 吸入剂倾向于降低呼吸速率, 但对心血管系统的影响较小。由于吸入麻醉的剂量很容易在整个过程中进行调整, 因此通常是首选方法.

麻醉诱导和维持是接受任何形式外科手术的实验动物兽医护理的一个组成部分。麻醉的目标是充分固定动物并减轻所有疼痛感。除了诱导之外，还需要精确和持续的监测，以在整个手术过程中安全地保持正确的麻醉深度。

在本视频中，我们将首先简要讨论啮齿动物麻醉的水平以及应该达到什么阶段。接下来，我们将回顾不同的诱导和维持方法，确保动物始终处于所需麻醉阶段的各种方法，最后是一些涉及为不同目的使用不同麻醉剂的真实世界实验。

让我们从讨论级别开始。麻醉有四个阶段，第三阶段或手术阶段有四个平面。

在第一阶段，动物变得迷失方向。第二阶段的特点是呼吸频率不规则和扶正反射丧失。在第三阶段的 1 平面中，睑反射和吞咽反射消失。在平面 2 期间，喉反射和角膜反射丢失。到目前为止，麻醉剂尚未引起健忘症或镇痛。

正是在第三平面，健忘症和镇痛从部分发展到完全，动物被完全麻醉以进行外科手术。平面 3 也以肋间肌麻痹为标志，这导致膈肌呼吸，即浅呼吸。在第四平面，动物服用过量，可以迅速进入第四阶段，肋间肌和横膈膜完全瘫痪，这可能导致呼吸停止，最终导致死亡。

麻醉剂有吸入剂或注射剂两种形式，兽医必须决定使用什么来执行手术。这种选择基于许多方面，包括：手术的范围和持续时间、物种和品系、年龄以及动物的生理状况。

常用的吸入麻醉剂类别包括异氟烷、七氟烷和地氟烷等化合物。这些化合物可以轻松控制麻醉深度。设备中有一些选项可供选择来管理吸入麻醉剂。

其中一种选择是钟罩，它应该在引擎盖下使用，而不是在工作台上使用，以避免人员接触麻醉气体。将罐子与陶瓷或塑料穿孔平台组装在一起，在罐子底部和平台之间留出空间。接下来，戴上不透水的手套，用麻醉剂浸透棉球，并将其放在平台下方，使其位于罐子底部。然后立即盖紧盖子以防止麻醉蒸气逸出。要放置动物，请将盖子滑到一侧，引入动物并立即固定。之后，观察活动和呼吸以确定麻醉深度，并将动物暴露于吸入剂中以产生效果。请注意，该平台用作屏障，防止动物直接接触液体麻醉剂。

钟罩的替代方案是与连接到氧气罐的精密蒸发器机结合使用的感应室。第一步是确保蒸发器中装满适量的液体麻醉剂。接下来，检查废气清除系统。如果是常用的被动系统，则称量罐以确定它是否仍然有效。通常，比起始重量增加 50 克就是罐子的用完点。下一步是组装感应室。确保输入来自蒸发器，输出到废气清除系统。

首先，将动物放入感应室并盖紧盖子。一旦动物进入腔室，首先以每分钟 1 升的速率启动氧气流，然后将异氟醚的精密蒸发器设置调整到 3-4% 的诱导水平。像钟罩一样，将动物暴露在麻醉剂中以产生效果。动物完全麻醉后，在轻轻取出动物之前，通过关闭异氟醚用氧气冲洗腔室。这是为了防止人员接触麻醉气体。

另一种麻醉诱导方法是通过鼻锥或面罩也连接到精密蒸发器。然而，由于麻醉气体有难闻的气味，动物可能会反对戴口罩进行诱导。此外，由于抓得太紧，也有导致窒息的风险。因此，首选方法是使用感应盒或钟罩诱导麻醉，然后用鼻锥进行维护。通常情况下，组件是这样的，锥体和感应室都连接到同一个蒸发器，中间有一个切换开关，以将麻醉蒸汽输送从感应室切换到鼻锥，反之亦然。在腔室中麻醉动物后，将其面部固定在鼻锥中，然后切换管道上的拨动开关，将气流重定向到鼻锥。监测呼吸，在确认动物放松后，将麻醉剂降低到 0.5 - 1.5% 的维持水平。此外，将眼药膏涂抹在眼睛上以防止角膜干燥。

对于注射麻醉剂，氯胺酮和其他镇静剂或肌肉松弛剂的混合物，包括甲苯噻嗪和/或乙酰丙嗪。使用这些化合物可以制备不同的组合。有关常用比率，请参见下面的文本。请注意，氯胺酮是一种受控物质，因此必须在受控药物日志上注明使用量，并且混合物必须有其各自的受控物质日志。根据动物的物种、年龄和健康状况，选择麻醉剂的混合物和剂量，并且可以腹膜内或肌肉注射溶液。通常，注射麻醉药和吸入麻醉药联合使用，以实现手术麻醉。

既然您知道如何诱导麻醉，那么让我们了解麻醉深度评估，每 10-30 分钟监测一次以确保动物在手术过程中不会受到伤害非常重要。有几种方法可以在啮齿动物中执行此作。

一种常用的方法是捏脚趾。伸展动物的腿并隔离脚趾之间的蹼。然后用指甲或无创伤镊子用力捏住该区域。阳性反射表现为腿部缩回或脚后缩。另一种方法是在尾巴尖端进行尾巴捏合。积极反应表现为抽搐或尾巴运动。你也可以捏住耳廓的尖端，如果有头部晃动或胡须向前移动，那么动物不在麻醉的手术平面上。

要检查麻醉深度，还可以触摸内眦或内眼角以引起睑反射——表现为对触摸眼睑的反应而眨眼。即使眼睑、胡须移动或呼吸明显增加，动物也不在麻醉的手术平面内。

最后，可以通过戴手套的手指或棉签涂抹器触摸角膜来检查角膜反射。眨眼表示肯定的响应。

在站点之间交替以评估麻醉深度很重要。使用相同的脚趾或耳朵反复捏会使该区域脱敏，反应会受到抑制，并且不会准确评估麻醉深度。

除了这些物理刺激评估方法外，还应监测生理指标，包括心率、呼吸频率、血压、粘膜颜色和毛细血管再充盈时间。虽然一般观察有助于检测呼吸频率的变化，但要利用心率进行深度评估，可以使用心电图仪等专业设备。为了测量血压，有多种设备可以安装在尾巴甚至整个身体上。粘膜、眼睛、耳朵、嘴、鼻子、肛门、爪子和尾巴的颜色也可以指示麻醉深度。这些区域应该是粉红色的，表明呼吸和心率充足。

要检查毛细血管再充盈时间，请按压麻醉动物的耳廓，并计算漂白区域恢复粉红色所需的秒数。这不应超过 1 到 2 秒。延长的再充盈时间表明心率或心脏收缩强度降低，表明动物可能被深度麻醉并濒临死亡。将动物从麻醉中取出后，除非在饲养区持续监测它们，否则在麻醉中恢复之前不应将它们送回饲养设施。

现在我们已经了解了啮齿动物麻醉诱导和维持的原理和程序，让我们看看麻醉剂在当今生物医学研究中的一些常见应用。

啮齿动物麻醉最常见的用途可能是手术前和手术期间。例如，这里的研究人员想开发一个由大脑凝块形成引起的中风模型。为了实现这一目标，他们在小鼠体内诱导麻醉，然后在头盖骨上钻孔以创建一个薄窗口。当动物仍处于镇静状态时，这些科学家将一种光敏染料注射到循环中。接下来，他们在激光的帮助下通过钻孔的颅骨诱导光活化，从而在颅血管系统中形成凝块。

另一个需要啮齿动物麻醉的情况是进行生理分析。例如，科学家经常在麻醉动物身上使用心电图电极来监测心脏活动。或者他们使用超声探头来确定横膈膜的运动频率，以更准确地量化呼吸频率。

最后，在进行子宫内存活实验时必须使用麻醉。例如，在子宫内电穿孔 -- 一种麻醉怀孕女性的方法，切开一个切口以暴露发育中的胚胎，并使用电极诱导胚胎细胞摄取注射的遗传物质。

您刚刚观看了 JoVE 关于麻醉管理和维护的视频。由于啮齿动物麻醉有助于执行如此广泛的生物实验，因此每个科学家都必须具备在整个实验过程中诱导和保持正确麻醉深度的技能。一如既往，感谢您的观看！