Question 1

什么是采用细胞转移，为什么它在研究中被使用？

Accepted Answer

采用性细胞转移是一种将细胞引入生物体以研究生物机制或治疗疾病的方法。它使研究人员能够检查特定的免疫细胞功能，研究造血，并测试新的治疗方法，如癌症治疗，其中患者的T细胞被提取，修改以识别肿瘤，并返回以对抗癌症。动物模型允许对转移细胞的行为和功效进行详细研究。

Question 2

为什么在采用性转移研究中使用CD45.1 Rag gamma-c 基因敲除小鼠？

Accepted Answer

CD45.1 Rag gamma-c 敲除小鼠缺乏正常淋巴细胞发育所必需的基本细胞因子受体，导致免疫系统受损，没有自然杀伤细胞、T细胞或B细胞。这些免疫缺陷小鼠作为采用性转移的理想受体，因为它们允许研究人员研究供体免疫细胞如何在淋巴细胞缺乏的宿主中建立和功能。

Question 3

如何从供体组织中分离和纯化脾细胞？

Accepted Answer

使用细胞过滤器和活塞将脾脏分离，使细胞释放到悬浮液中。使用氯化铵钾溶液裂解不需要的红细胞，然后通过离心分离白细胞和碎片。最终纯化的脾细胞使用特拉蓝染色计数并调节到所需浓度，然后转移到受体小鼠中。

Question 4

流式细胞术在确认采用性转移成功中的作用是什么？

Accepted Answer

使用荧光-激活的细胞排序（FACS）的流式细胞术通过检测宿主脾脏中的供体细胞来确认转移的成功。针对供体标记如CD45.2的标记抗体可以将转移的细胞与宿主细胞区分开来。该技术允许研究人员识别特定的淋巴细胞群，如CD4 T细胞，并验证它们在受体小鼠中的存在和分布。

Question 5

细胞悬液在静脉注射到受体小鼠之前如何制备？

Accepted Answer

细胞悬液通过两个连续的洗涤步骤在磷酸盐缓冲盐水中进行离心并重新悬浮。最终的沉淀物在200微升的磷酸盐缓冲盐水中重新悬浮。使用带有29号针头的0.5毫升注射器，将200微升的这种纯化细胞悬液静脉注射到受体小鼠的眶后血窦中。

Question 6

FACS分析揭示了转移的淋巴细胞与宿主淋巴细胞之间的什么区别？

Accepted Answer

FACS分析使用点图区分CD45.2阳性转移细胞和CD45.1阳性宿主细胞。转移的细胞仅出现在转移的小鼠样本中，而不在仅接受磷酸盐缓冲盐水的对照小鼠中。进一步分析可以识别特定的转移的淋巴细胞亚群，如CD4 T细胞，展示了成功的移植和供体细胞在宿主内的表型。

Question 7

在进行采用性细胞转移之前，必须考虑哪些兼容性因素？

Accepted Answer

宿主和供体的相容性对于确保细胞被采用而不被排斥至关重要。在该协议中，CD45.2供体脾细胞被转移到CD45.1 Rag gamma-c受体小鼠体内，从而能够区分供体和宿主细胞。这种遗传上的区别使研究人员能够追踪转移的细胞并评估它们在免疫缺陷宿主环境中的整合、存活和功能。

过继性细胞转移：将供体小鼠脾细胞导入受体小鼠并通过流式细胞术评估转移效果 - 评估测验