免疫学

来源：Perchet Thibaut1,2,3，Meunier Sylvain1,2,3，Sophie Novault4，Rachel Golub1,2,3 1 淋巴细胞生成单位，免疫学系，法国巴黎巴斯德研究所 2 法国巴黎INSERM U1223 3 巴黎狄德罗大学，索邦巴黎西岱大学，巴斯德细胞，法国巴黎 4 流式细胞术平台，细胞术与生物标志物UtechS，转化科学中心，法国巴黎巴斯德研究所 免疫系统的主要功能是保护机体免受病原微生物和其他入侵者的侵害。白细胞，即白血球，是免疫系统中的关键参与者。当发生感染时，它们会被激活并启动免疫应答。根据不同的生物学、物理学和/或功能学参数（例如细胞大小、颗粒度和分泌特性），白细胞可被划分为多种亚群（例如髓系细胞、淋巴细胞、树突状细胞）。对白细胞进行表征的一种方法是通过其表面蛋白，这些蛋白主要是受体。每种白细胞群体表达特定组合的受体（例如细胞毒性受体、活化受体、迁移受体），从而可在群体中进一步定义亚群。由于免疫系统包含多种多样的细胞群体，因此对其加以表征对于阐明它们在免疫应答中的作用至关重要。 流式细胞术（FC 或...

来源：Meunier Sylvain1,2,3，Perchet Thibaut1,2,3，Sophie Novault4，Rachel Golub1,2,3 1 淋巴细胞生成研究组，免疫学系，法国巴黎巴斯德研究所 2 法国国家健康与医学研究院（INSERM）U1223，法国巴黎 3 巴黎狄德罗大学，索邦巴黎西岱大学，巴斯德研究单元，法国巴黎 4 流式细胞术平台，细胞术与生物标志物技术服务中心（UtechS），转化科学中心，法国巴黎巴斯德研究所 抵御病原体依赖于免疫系统的监视。该系统结构复杂，包含多种细胞类型，每种细胞具有特定功能。这种复杂的组成使得免疫系统能够应对多种多样的病原体和损伤。适应性免疫可针对特定病原体产生特异性反应。负责此类免疫的大多数细胞是淋巴细胞（B细胞和T细胞）。通常，B细胞应对细胞外感染（如细菌感染），而T细胞应对细胞内感染（如病毒感染）。淋巴细胞群体中不同类型的细胞可通过其表达的细胞表面蛋白组合和/或分泌的细胞因子谱进行表征。 磁性分选技术利用细胞的磁性特性以及一种或多种细胞表面蛋白的表达，实现对目标细胞群体的富集（1,...

来源：Whitney Swanson1,2，Frances V. Sjaastad2,3 和 Thomas S. Griffith1,2,3,4 1 明尼苏达大学泌尿科，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 2 明尼苏达大学免疫学中心，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 3 明尼苏达大学微生物学、免疫学与癌症生物学研究生项目，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 4 明尼苏达大学马森癌症中心，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国

来源：Tonya J. Webb1 1 马里兰大学医学院微生物学与免疫学系及Marlene和Stewart Greenebaum综合癌症中心，美国马里兰州巴尔的摩市 21201 ELISPOT 是一种标准化且可重复的检测方法，用于检测细胞免疫应答。该检测利用基于酶联免疫吸附试验（ELISA）的方法来检测单个细胞的免疫反应，这些反应可通过斑点可视化，因此得名 ELISPOT。ELISPOT 于 1983 年由 Czerkinsky 首次描述，作为一种计数产生抗原特异性免疫球蛋白的 B 细胞杂交瘤数量的方法（1）。同一研究团队进一步开发了该检测方法，用于测量产生细胞因子的 T 淋巴细胞的频率。如今，ELISPOT 已成为临床试验和疫苗候选物中评估抗原特异性 T 细胞免疫的金标准。例如，在接种疫苗后或感染期间，浆细胞和记忆 B 细胞会分泌提供保护作用的抗体。通常，这些 B 细胞反应通过测定血清中抗原特异性抗体的滴度来评估。然而，这种分析方法（通常通过 ELISA 测定）可能无法涵盖记忆 B 细胞，而这些细胞即使在血清抗体水平不可检测的情况下也可能存在。此外，已有充分证据表明，循环中的记忆...

来源：Michael S. Lee1 和 Tonya J. Webb1 1 马里兰大学医学院微生物学与免疫学系及Marlene和Stewart Greenebaum综合癌症中心，美国马里兰州巴尔的摩 21201 免疫组织化学（IHC）和免疫细胞化学（ICC）是利用抗体来可视化特定抗原表达及其定位的技术。IHC 的首次公开发表应用是在 1941 年，当时 Albert Coons 使用该技术检测感染了Pneumococcus的小鼠组织切片中肺炎球菌抗原的存在（1）。免疫组织化学这一名称来源于词根“immuno-”（指抗体）和“histo-”（指 IHC 中使用的组织切片）。而免疫细胞化学中的词根“cyto-”则突出了 ICC 与 IHC 之间的关键区别：IHC 使用完整的组织切片，而 ICC 使用从组织中分离的细胞或体外培养的细胞。由于所用样本不同，IHC 与 ICC 在样本制备技术上有所差异，但除此之外，两者的实验步骤完全相同，因此这两个术语经常被互换使用。

来源：Frances V. Sjaastad1,2，Whitney Swanson2,3 和 Thomas S. Griffith1,2,3,4 1 微生物学、免疫学与癌症生物学研究生项目，明尼苏达大学，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 2 免疫学中心，明尼苏达大学，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 3 泌尿外科系，明尼苏达大学，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 4 马森癌症中心，明尼苏达大学，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 多克隆抗体是指针对同一抗原的不同抗原决定簇或多种抗原的多种抗体的混合物（1）。尽管多克隆抗体是识别生物分子的有力工具，但其存在一个重要局限性——无法区分具有共同抗原决定簇的抗原。例如，当使用牛血清白蛋白免疫动物时，具有不同表面免疫球蛋白的B细胞会针对牛血清白蛋白上的不同抗原决定簇产生应答，结果在抗血清中形成多种抗体的混合物。由于牛血清白蛋白在蛋白质进化保守区域与人血清白蛋白共享某些表位，因此这种抗牛血清白蛋白的抗血清也会与人血清白蛋白发生反应。因此，该抗血清无法用于区分牛和人血清白蛋白。

来源：Thomas Chaffee1，Thomas S. Griffith2,3,4 和 Kathryn L. Schwertfeger1,3,4 1 明尼苏达大学实验室医学与病理学系，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455 2 明尼苏达大学泌尿外科系，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455 3 明尼苏达大学马森癌症中心，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455 4 明尼苏达大学免疫学中心，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455 组织切片的病理学分析可用于更好地理解正常组织结构，并有助于阐明疾病的发生机制。来自患者或实验性体内模型的组织活检样本通常通过福尔马林或甲醛固定并包埋于石蜡中进行保存。这种方法可实现组织的长期储存，并便于切片处理。使用切片机将组织切成薄片（5...

来源：Dominique R. Bollino1，Eric A. Legenzov2，Tonya J. Webb1 1 马里兰大学医学院微生物学与免疫学系及Marlene和Stewart Greenebaum综合癌症中心，美国马里兰州巴尔的摩市 21201 2 马里兰大学医学院生物医学工程与技术中心，美国马里兰州巴尔的摩市 21201 共聚焦荧光显微镜是一种成像技术，与传统的“宽场”落射荧光显微镜相比，能够提供更高的光学分辨率。共聚焦显微镜通过“激光扫描”实现更优的x-y平面光学分辨率——通常采用一组电压控制的反射镜（即检流计或“galvo”反射镜），将激光依次照射到样品的每一个像素点上。更重要的是，共聚焦显微镜利用针孔滤除来自非焦平面（即当前扫描z平面以外）的离焦光线，从而显著提高z轴方向的分辨率，使探测器仅采集特定z平面的信号。由于共聚焦显微技术可实现较高的z轴分辨率，因此能够采集一系列z平面（也称为z层栈）的图像，并通过软件重建出三维图像。

来源：Susannah C. Shissler1，Tonya J. Webb1 1 马里兰大学微生物学与免疫学系，美国马里兰州巴尔的摩市，21201 免疫沉淀（IP，也称为“下拉”实验）是一种广泛应用的技术，适用于多个研究领域。该技术最初构想于1984年，并于1988年得到优化（1, 2）。免疫沉淀的基本目标是利用针对特定蛋白质的抗体对其进行纯化和分离。“免疫”一词指使用抗体，“沉淀”则指从溶液中“拉下”特定物质。目标蛋白可以是内源性蛋白或重组蛋白。大多数重组蛋白带有表位标签（如myc或flag），以便于后续纯化。通常，重组蛋白的免疫沉淀更易于优化，因为针对重组表位标签的抗体具有很强的结合能力和高效性。而针对内源性蛋白的抗体效果差异极大，因此这类免疫沉淀的优化难度更高。免疫沉淀后的一个必要步骤是纯化结果的验证。分离得到的蛋白可通过SDS-PAGE进行分离，再通过蛋白质印迹（Western blot）检测其纯度（图1）。一个重要对照是在Western...

来源：Perchet Thibaut1,2,3，Meunier Sylvain1,2,3，Sophie Novault4，Rachel Golub1,2,3 1 淋巴细胞生成研究组，免疫学系，法国巴黎巴斯德研究所 2 法国国家健康与医学研究院（INSERM）U1223，法国巴黎 3 巴黎狄德罗大学，索邦巴黎西岱大学，巴斯德细胞，法国巴黎 4 流式细胞术平台，细胞计量与生物标志物技术中心（UtechS），转化科学中心，法国巴黎巴斯德研究所 细胞周期是生命的一种普遍过程。在细胞周期中，细胞经历一系列变化，最终分裂为两个子细胞。这一机制会根据生物体的需求，在其整个生命周期中持续发生。通过细胞分裂和胚胎发育，单细胞的受精卵可发育成完整的生物体。在成年阶段，细胞周期在许多关键生物学过程中发挥核心作用，例如组织修复。 细胞分裂的机制是受到严密调控的过程，细胞在最终分裂前会经历一系列有序的改变。尚未进入细胞周期的细胞被称为处于间隙期0（G0）阶段，此阶段的细胞被认为是静止的。当细胞开始进入周期时，可识别出四个明确的阶段：间隙期1（G1）、合成期（S）、间隙期2（G2）和有丝分裂期（M）。G1...

来源：Meunier Sylvain1,2,3，Perchet Thibaut1,2,3，Sophie Novault4，Rachel Golub1,2,3 1 淋巴细胞生成研究组，免疫学系，法国巴黎巴斯德研究所 2 法国国家健康与医学研究院（INSERM）U1223，法国巴黎 3 巴黎狄德罗大学，索邦巴黎西岱大学，巴斯德细胞单元，法国巴黎 4 流式细胞术平台，细胞术与生物标志物技术服务中心（UtechS），转化科学中心，法国巴黎巴斯德研究所 过继性细胞转移是一种将细胞引入患者或研究用生物体的方法，用于治疗疾病或研究生物学过程（如造血作用）。过继性转移的目的多种多样，既可用于基础生物学研究，也可用于医学科学领域（1,...

来源：Frances V. Sjaastad1,2，Whitney Swanson2,3 和 Thomas S. Griffith1,2,3,4 1 明尼苏达大学微生物学、免疫学与癌症生物学研究生项目，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 2 明尼苏达大学免疫学中心，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 3 明尼苏达大学泌尿外科系，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国 4 明尼苏达大学共济会癌症中心，明尼阿波利斯，明尼苏达州 55455，美国