免疫学

资料来源:佩尔切特·蒂鲍特1，2，3，穆尼尔·西尔万1，2，3，苏菲·诺沃4，雷切尔·戈卢布1，2，31法国巴黎巴斯德研究所免疫学系淋巴病系2 INSERM U1223， 巴黎， 法国3巴黎迪德罗大学，索邦巴黎城，大提琴巴斯德，巴黎，法国4流式细胞测定，细胞学和生物标志物 UtechS，转化科学中心，巴斯德研究所，法国巴黎 免疫系统的整体功能是保护身体免受传染性生物和其他入侵者的攻击。白血球，或白细胞，是免疫系统的关键角色。感染后，它们被激活并启动免疫反应。白细胞可以分为不同的亚群（例如，骨髓细胞、淋巴细胞、树突状细胞），根据不同的参数，可以是生物、物理和/或功能（例如，大小、粒度和分泌）。描述白细胞的一个方法是通过其表面蛋白，主要是受体。每个白细胞群表示受体（例如细胞毒性、活化、迁移受体）的特定组合，这些受体可以定义种群中的子集。由于免疫系统包含广泛的细胞群，因此必须描述它们，以破译它们参与免疫反应。

资料来源: 穆尼尔·西尔万1，2，3，佩尔切特·蒂鲍特1，2，3，苏菲·诺沃4，雷切尔·戈卢布1，2，31法国巴黎巴斯德研究所免疫学系淋巴病系2 INSERM U1223， 巴黎， 法国3巴黎迪德罗大学，索邦巴黎城，大提琴巴斯德，巴黎，法国4流式细胞测定，细胞学和生物标志物 UtechS，转化科学中心，巴斯德研究所，法国巴黎 预防病原体取决于免疫系统的监测。该系统很复杂，包括许多细胞类型，每种类型都有特定的功能。这种复杂的组成能够对大量病原体和损伤进行免疫反应。适应性免疫允许对特定病原体作出特定反应。负责这种免疫的大多数细胞是淋巴细胞（B细胞和T细胞）。通常，B细胞对细胞外感染（如细菌感染）作出反应，T细胞对细胞内感染（如病毒感染）作出反应。淋巴细胞群中不同类型的细胞可以通过它们表达的细胞表面蛋白和/或分泌细胞因子的面板的组合来表示。

资料来源:惠特尼·斯旺森1，2，弗朗西斯·萨亚斯塔德2，3和托马斯·格里菲斯1，2，3，41明尼苏达大学泌尿科，明尼阿波利斯，MN 554552明尼苏达大学明尼阿波利斯分校免疫学中心，MN 554553明尼苏达大学明尼阿波利斯分校微生物学、免疫学和癌症生物学研究生课程，MN 554554共济会癌症中心，明尼苏达大学明尼阿波利斯分校，MN 55455 酶相关免疫吸附测定 （ELISA） 通常用于测量生物样品中抗原、抗体、肽、蛋白质、激素或其他生物分子的存在和/或浓度。它极其敏感，能够检测低抗原浓度。ELISA 的敏感性归因于其检测单个抗原-抗体复合物 （1） 之间的相互作用的能力。此外，加入酶结合的抗原特异性抗体，可以将无色基质转化为色化或荧光产物，由板读取器检测并轻松定量。与已知感兴趣的抗原的定子量生成值相比，可以确定实验样品中相同抗原的浓度。不同的ELISA方案已经适应了测量各种实验样品中的抗原浓度，但它们都具有相同的基本概念（2）。选择 ELISA 的类型执行，间接，三明治，或竞争，取决于许多因素，包括要测试的样品的复杂性和可用的抗原特异性抗体。间接 ELISA...

资料来源:托尼娅·韦伯11马里兰大学医学院微生物学和免疫学系，马里兰州巴尔的摩的马琳和斯图尔特·格林鲍姆综合癌症中心 21201 ELISPOT...

资料来源:迈克尔·李1和托尼娅·韦伯11马里兰大学医学院微生物学和免疫学系，马里兰州巴尔的摩的马琳和斯图尔特·格林鲍姆综合癌症中心 21201 免疫组织化学 （IHC） 和免疫细胞化学 （ICC） 是使用抗体可视化特定抗原的表达和定位的技术。IHC的首次使用是在1941年，当时阿尔伯特·库因斯利用这项技术来可视化感染肺炎球菌（1）的小鼠在组织部分中存在肺炎球菌抗原。名称，免疫组织化学，是从根"免疫-"，指抗体，和"组织-"，参照IHC中使用的组织部分。免疫细胞化学中根的"细胞-"突出了ICC和IHC之间的关键区别。IHC使用整个组织的各个部分，而ICC使用从组织分离或培养的细胞。所用样品的差异意味着样品制备在技术上因IHC和ICC而异，但除此之外，ICC和IHC的协议是相同的，人们会发现这些术语是可互换使用的。

资料来源:弗朗西斯·萨亚斯塔德1，2，惠特尼·斯旺森2，3和托马斯·格里菲斯1，2，3，41明尼苏达大学明尼阿波利斯分校微生物学、免疫学和癌症生物学研究生课程，MN 554552明尼苏达大学明尼阿波利斯分校免疫学中心，MN 554553明尼苏达大学泌尿科，明尼阿波利斯，MN 554554共济会癌症中心，明尼苏达大学明尼阿波利斯分校，MN 55455 多边克隆抗体被定义为针对抗原或多种抗原的不同抗原决定子（1）的抗体的集合。虽然多克隆抗体是识别生物分子的有力工具，但有一个重要的局限性 - 它们无法区分具有抗原决定因素的抗原。例如，当牛血清白蛋白用于给动物接种疫苗时，具有不同表面Ig的B细胞对牛血清白蛋白上不同的抗原决定因素有反应。结果是抗血清中的抗体混合物。由于牛血清白蛋白与人类血清白蛋白在进化保存区域与人血清白蛋白共享一些表皮，这种抗牛血清白蛋白抗血清也会与人血清白蛋白发生反应。因此，这种抗血清对区分牛和人血清白蛋白没有用处。

资料来源:托马斯·查菲1，托马斯·格里菲斯2，3，4，凯瑟琳·施韦特费格1，3，41明尼苏达大学明尼阿波利斯分校实验室医学和病理学系，MN 554552明尼苏达大学泌尿科，明尼阿波利斯，MN 554553共济会癌症中心，明尼苏达大学明尼阿波利斯分校，MN 554554明尼苏达大学明尼阿波利斯分校免疫学中心，MN 55455 组织部分的病理分析可用于更好地了解正常组织结构，并有助于我们了解疾病机制。组织活检，无论是从患者还是从实验性体内模型，通常通过固定在甲醛或甲醛和嵌入石蜡中来保存。这允许长期存储和组织被分割。使用微缩图，将组织切成薄（5 μm）部分，并且这些截面粘附在玻璃玻片上。组织部分可以沾染抗体，从而检测组织部分的特定蛋白质。与荧光素（也称为氟铬）结合的抗体染色 - 当激光激发时以特定波长发出光的化合物 - 称为免疫荧光。检测部分内蛋白质的能力可以提供信息，如细胞类型异质性在组织内，激活特定信号通路，和生物标志物的表达。根据所使用的荧光光和可用于分析的显微镜类型，可以使用多种颜色，从而可以多路分析目标。

资料来源:多米尼克·博利诺1，埃里克·勒贡佐夫2，托尼娅·韦伯11马里兰大学医学院微生物学和免疫学系，马里兰州巴尔的摩的马琳和斯图尔特·格林鲍姆综合癌症中心 212012马里兰大学医学院生物医学工程与技术中心，巴尔的摩，马里兰州 21201 与传统的"广域"显光显微镜相比，共聚焦荧光显微镜是一种成像技术，能够提高光学分辨率。共聚焦显微镜能够通过"激光扫描"实现更好的 x-y 光学分辨率， 通常是一组电压控制的反射镜（电流计或"galvo"反射镜）， 一次将激光照明定向到试样的每个像素。更重要的是，共聚焦显微镜通过使用针孔去除来自未位于被扫描的 z 平面位置的聚焦光，从而达到卓越的 z 轴向分辨率，从而使探测器能够从指定的 z 平面收集数据。由于共聚焦显微镜可实现高 z 分辨率，因此可以从一系列 z 平面（也称为 z 堆栈）中收集图像，并通过软件构建 3D 图像。 在讨论共聚焦显微镜的机制之前，考虑样品如何与光相互作用是很重要的。光由光子、电磁能量包组成。冲击生物样品的光子可以通过四种方式之一与构成样品的分子相互作用:1）光子不相互作用，通过样品;2） 光子反射/散射;3）...

资料来源:苏珊娜·希斯勒1，托尼娅·韦伯11马里兰大学巴尔的摩分校微生物学和免疫学系，MD 21201 免疫沉淀（IP，也称为"下拉"测定）是一种广泛使用的技术，在各种领域都有应用。它于1984年首次构思，1988年经过提炼（1，2）。IP 的基本目标是使用针对该蛋白质的抗体对特定蛋白质进行纯化和分离。"免疫"一词是指使用抗体，而"沉淀"一词是指从溶液中拉出特定物质。目标蛋白可能是内源性或重组蛋白。大多数重组蛋白都有一个表位标记（即myc或标志）附着在它们上，以简化随后的纯化。通常，优化重组蛋白 IP 更容易，因为针对重组表位标记的抗体非常强和有效。针对内源性蛋白质的抗体具有极其可变的疗效 - 使得优化这些 IP 更加困难。免疫沉淀后的一个必要步骤是纯化验证。分离的蛋白质使用SDS-PAGE解决，随后由西方血带探查纯度（图1）。一个重要的控制是在西方印块期间使用不同的抗体来验证正确蛋白质的提取。IP 与后续技术的结合是一种强大的分析工具。纯化后的目标可能是通过NMR、质谱和体外测定对蛋白质本身进行表征，或分析蛋白质的相互作用伙伴（即蛋白质、DNA、RNA）（3、4、5）。

资料来源:佩尔切特·蒂鲍特1，2，3，穆尼尔·西尔万1，2，3，苏菲·诺沃4，雷切尔·戈卢布1，2，31淋巴病系，法国巴黎巴斯德研究所免疫学系2 INSERM U1223， 巴黎， 法国3巴黎迪德罗大学，索邦巴黎城，大提琴巴斯德，巴黎，法国4流式细胞测定，细胞学和生物标志物 UtechS，转化科学中心，巴斯德研究所，法国巴黎 细胞周期是一个普遍的生命过程。在细胞周期中，细胞经历几次修改，以分成两个子细胞。这种机制发生在生物体的整个生命中，以响应其需求。细胞分裂和胚胎发育从单细胞酶中产生完整的生物体。在成年期间，细胞周期是许多关键生物过程的核心，如组织修复。 细胞分裂机制是严格控制的事件，细胞在最终分裂前进行逐步修改。尚未处于循环中的细胞被描述为处于 Gap 0 （G0） 阶段。在此阶段，细胞被认为是静止的。当细胞开始循环时，四个不同的相位被识别:间隙1（G1），合成（S），间隙2（G2）和米托西斯（M）。G1相是细胞DNA合成所需资源的检查点。然后，S 相发生，DNA 复制开始，然后是G2相间，另一个检查点控制细胞分裂所需的所有元素。最后，细胞进入米细胞，并分裂成两个子细胞。

资料来源: 穆尼尔·西尔万1，2，3，佩尔切特·蒂鲍特1，2，3，苏菲·诺沃4，雷切尔·戈卢布1，2，31法国巴黎巴斯德研究所免疫学系淋巴病系2 INSERM U1223， 巴黎， 法国3巴黎迪德罗大学，索邦巴黎城，大提琴巴斯德，巴黎，法国4流式细胞测定，细胞学和生物标志物 UtechS，转化科学中心，巴斯德研究所，法国巴黎 采用细胞转移是一种将细胞引入患者或研究生物体以治疗疾病或研究生物过程（如造血细胞）的方法。收养转让的目的多种多样;它可用于基础生物学以及医学（1，2）。在小鼠模型中，可以研究转移细胞的迁移和分布，然后跟踪系统（细胞表面标记、CFSE染色等）。在小鼠模型的癌症研究中，特定细胞群的转移可用作肿瘤的实验治疗。这项技术的另一个例子是通过将骨髓细胞转移到辐照小鼠或患有严重免疫缺陷表型的小鼠，从而产生嵌合小鼠。例如，此小鼠模型可用于评估基因删除对特定细胞群的影响。骨借用细胞的转移也用于人体医疗。当患者在癌症治疗时被照射时，骨髓的接受转移允许免疫系统重组。

资料来源:弗朗西斯·萨亚斯塔德1，2，惠特尼·斯旺森2，3和托马斯·格里菲斯1，2，3，41明尼苏达大学明尼阿波利斯分校微生物学、免疫学和癌症生物学研究生课程，MN 554552明尼苏达大学明尼阿波利斯分校免疫学中心，MN 554553明尼苏达大学泌尿科，明尼阿波利斯，MN 554554共济会癌症中心，明尼苏达大学明尼阿波利斯分校，MN 55455