Name: 从小鼠神经组织产生单细胞悬浮液 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-07T19:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: 学习使用gentleMACS解离器从小鼠脑组织制备单细胞悬液的方法，该方案通过优化酶解和机械解离参数，在保持细胞活力与表面抗原完整性的同时，实现神经组织的有效解离，适用于神经科学和细胞生物学研究。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

为了在无菌条件下操作，建议在层流罩内完成所有步骤。
1. 材料
<ul>
<li>神经组织解离试剂盒（P）（组分：溶液1、2、3和4，储存缓冲液）</li>
<li>预分离滤器</li>
<li>（可选）髓鞘去除磁珠</li>
<li>β-巯基乙醇</li>
<li>gentleMACS 组织解离仪</li>
<li>C 管</li>
<li>MACSmix 试管旋转混合器</li>
<li>HBSS（无钙镁）</li>
<li>HBSS（含钙镁）</li>
</ul>
<ol>
<li>在开始实验方案之前，配制以下溶液：<ol>
<li>不含二价阳离子 Ca2+ 或 Mg2+ 的 Hanks 平衡盐溶液（HBSS (w/o)）</li>
<li>标准 Hanks 平衡盐溶液，即含有 Ca2+ 和 Mg2+ 的溶液（HBSS (w)）</li>
</ol></li>
<li>根据后续应用中目标抗原表位的不同，选择使用基于木瓜蛋白酶的神经组织解离试剂盒（P）或基于胰蛋白酶的神经组织解离试剂盒（T）。</li>
<li>从神经组织解离试剂盒中配制以下溶液：<ol>
<li>溶液 2：加入 β-巯基乙醇至终浓度为 0.067 mM</li>
<li>溶液 4：将粉末溶解于 0.7 ml 储存缓冲液（试剂盒提供），轻轻混匀（勿涡旋震荡）</li>
<li>酶混合液 1：用移液器将 1.9 mL 溶液 2 和 50 μl 溶液 1（均来自试剂盒）加入 C 管中，在 37 °C 孵育 10–15 分钟。此体积足以解离 400 mg 脑组织。</li>
</ol></li>
</ol>
2. 解离神经组织
<ol>
<li>将脑组织放入含有 1 ml HBSS（无钙镁）的离心管中称重</li>
<li>将小鼠脑组织转移至 C 管中，加入 1950 μL 预热的酶混合液 1。（注意：本方案适用于 ≤ 400 mg 的组织，但溶液用量可按比例调整，最多可处理每根 C 管 1600 mg 脑组织）</li>
<li>将 C 管安装至 gentleMACS 组织解离器，运行程序“m_brain_01”。</li>
<li>在 37 °C 条件下，以 4 rpm（使用 MACSmix 管式旋转仪）旋转孵育 15 分钟。</li>
<li>将 C 管安装至 gentleMACS 组织解离器，运行程序“m_brain_02”。</li>
<li>在解离步骤期间，每 400 mg 组织准备 30 μl 酶混合液 2，通过轻柔混匀 20 μl 溶液 3 和 10 μl 溶液 4 制备。</li>
<li>通过隔膜密封盖将酶混合液 2 加入 C 管中，轻轻混匀，避免涡旋。</li>
<li>将 C 管置于培养箱中，37 °C 旋转孵育 10 分钟。</li>
<li>将 C 管安装至 gentleMACS 组织解离器，运行程序“m_brain_03”。</li>
<li>将 C 管置于培养箱中，37 °C 旋转孵育 10 分钟。</li>
<li>短暂离心，使样品沉降至管底。</li>
</ol>
3. 过滤
<ol>
<li>选择一个孔径足够大的滤器，以允许目标细胞通过。例如，浦肯野细胞体积过大，无法通过 30 μm 滤器，但 Prominin-1+ 细胞可以。</li>
<li>使用合适的 1000 μl 移液器通过C管的隔膜密封盖吸取细胞，并将其加入置于 15 ml 收集管上的预分离滤器中。（注意：对于较大的样本量，请使用 50 ml 收集管）。</li>
<li>用 10 ml HBSS (w) 清洗滤器。</li>
<li>将滤过的细胞在室温下以 300 × g 离心 10 分钟。</li>
<li>将上清液重悬于您所选择的培养基或缓冲液中，用于后续实验。</li>
<li>为去除髓鞘碎片，使用髓鞘去除磁珠（Myelin Removal Beads）。</li>
</ol>
4. 代表性结果：请参见图1-3
<img src="/files/ftp_upload/1267/Fig_1.png" alt="流式细胞术散点图，碘化丙啶 vs. FL-2，细胞活力，97% 活细胞，3% 死细胞。" data-altupdatedat="1761735611000" data-alt="fig 1"> 图 1 使用 gentleMACS 解离仪进行脑组织解离后，流式细胞术分析显示细胞活力达 97%。
<img src="/files/ftp_upload/1267/1267fig2.png" alt="在显微镜下观察到的微生物菌落生长，显示细胞培养的增殖情况。" data-altupdatedat="1761735611000" data-alt="图 2"> 图 2 使用抗Prominin-1 MicroBeads进行磁性细胞分选后，在添加MACS Supplement B27 PLUS的MACS® NeuroMedium中培养7天后的神经球形成情况的光学显微镜图像。细胞来源于CD1小鼠脑组织（P3），使用神经组织解离试剂盒（P）制备。
<img src="/files/ftp_upload/1267/1267fig4.jpg" alt="Prominin-1+ 细胞分离流式细胞术散点图；数据分析，去髓鞘效果。" data-altupdatedat="1761735611000" data-alt="fig 3.5"> 图 3 单细胞悬液中的髓鞘碎片会显著影响细胞分离效果，使用髓鞘去除磁珠去除髓鞘碎片可提高细胞分选效率。采用抗 Prominin-1 微珠进行 MACS 分选时，使用神经组织解离试剂盒（P）解离 P22 小鼠脑组织。单细胞悬液中的细胞直接用于分选，或经髓鞘去除磁珠处理以去除髓鞘成分。比较经与未经髓鞘去除处理的样本分选结果表明，预先去除髓鞘的样本具有更高的纯度。

<ol><li>Hardt, O., Scholz, C., Küsters, D., Yanagawa, Y., Pennartz, S., Cremer, H., Bosio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+analysis+defines+differences+between+region-specific+GABAergic+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Gene expression analysis defines differences between region-specific GABAergic neurons.</a> Mol Cell Neurosci. 39, 418-428 (2008).</li>
<li>Lee, J. K., McCoy, M. K., Harms, A. S., Ruhn, K. A., Gold, S. J., Tansey, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulator+of+G-protein+signaling+10+promotes+dopaminergic+neuron+survival+via+regulation+of+the+microglial+inflammatory+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Regulator of G-protein signaling 10 promotes dopaminergic neuron survival via regulation of the microglial inflammatory response.</a> J Neurosci. 28, 8517-8528 (2008).</li>
<li>Környei, Z., Gócza, E., Rühl, R., Orsolits, B., Vörös, E., Szabó, B., Vágovits, B., Madarász, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astroglia-derived+retinoic+acid+is+a+key+factor+in+glia-induced+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Astroglia-derived retinoic acid is a key factor in glia-induced neurogenesis.</a> FASEB J. 21, 2496-2509 (2007).</li>
<li>Meylan, F., Davidson, T. S., Kahle, E., Kinder, M., Acharya, K., Jankovic, D., Bundoc, V., Hodges, M., Shevach, E. M., Keane-Myers, A., Wang, E. C., Siegel, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+TNF-family+receptor+DR3+is+essential+for+diverse+T+cell-mediated+inflammatory+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">The TNF-family receptor DR3 is essential for diverse T cell-mediated inflammatory diseases.</a> Immunity. 29, 79-89 (2008).</li>
<li>Skog, J., Würdinger, T., van Rijn, S., Meijer, D. H., Gainche, L., Sena-Esteves, M., Curry, W. T. Jr, Carter, B. S., Krichevsky, A. M., Breakefield, X. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+microvesicles+transport+RNA+and+proteins+that+promote+tumour+growth+and+provide+diagnostic+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma microvesicles transport RNA and proteins that promote tumour growth and provide diagnostic biomarkers.</a> Nat Cell Biol. 10, 1470-1476 (2008).</li>
</ol>

作者为德国 Miltenyi Biotec GmbH 公司的员工。

gentleMACS 组织解离仪可在封闭系统中实现神经组织单细胞悬液的标准化制备。神经组织解离试剂盒经过优化，可保留用于后续应用（如免疫染色和免疫磁珠细胞分选）所需的抗原表位1-5。本实验方案展示了使用 gentleMACS 组织解离仪和神经组织解离试剂盒（P）对小鼠脑组织进行温和酶解解离，获得细胞活力达 97%。每 100 mg 神经组织可获得 5×106 至 1×107 个细胞，具体数量取决于组织来源动物的年龄。目标 Prominin-1+ 细胞使用抗 Prominin-1 微珠进行分离，随后进行培养。当处理来自出生后 &gt;P7 小鼠的神经组织时，联合使用髓鞘去除微珠可进一步提高分离效率。

<table><tbody><tr><td>C管</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-093-237</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_763_gentleMACS_Dissociator.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_763_gentleMACS_Dissociator.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>gentleMACS&amp;#8482; 起始试剂盒</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-093-235</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_763_gentleMACS_Dissociator.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_763_gentleMACS_Dissociator.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>MACSmix&amp;#8482; 管式旋转仪</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-090-753</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_34_251_MACSmix_Tube_Rotator.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_34_251_MACSmix_Tube_Rotator.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>神经组织解离试剂盒（P）</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-092-628</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_712_656_Neural_Tissue_Dissociation_Kits.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_712_656_Neural_Tissue_Dissociation_Kits.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>预分离滤器</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-041-407</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_34_247_Pre_Separation_Filters.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_34_247_Pre_Separation_Filters.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>抗-Prominin-1 微珠</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-092-333</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_654_524_Anti_Prominin_1_MicroBeads.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_654_524_Anti_Prominin_1_MicroBeads.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>抗-Prominin-1-APC</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-092-335</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_525_Anti_Prominin_1.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_525_Anti_Prominin_1.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>髓鞘去除磁珠</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-094-544</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_712_688_Myelin_Removal_Beads.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_712_688_Myelin_Removal_Beads.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>Art 1000 加长型移液器吸头 </td><td>分子生物产品</td><td>货号 2079</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.mbpinc.com/ASP/products.aspx?query_TipID=61&quot;&gt;http://www.mbpinc.com/ASP/products.aspx?query_TipID=61&lt;/a&gt;&lt;br/&gt;&lt;a href=&quot;http://www.mbpinc.com/html/products/art/display.html&quot;&gt;http://www.mbpinc.com/html/products/art/display.html&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>神经组织解离试剂盒（T）</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-093-231</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_712_656_Neural_Tissue_Dissociation_Kits.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_712_656_Neural_Tissue_Dissociation_Kits.aspx&lt;/a&gt;</td></tr><tr><td>碘化丙啶溶液</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>货号 130-093-233</td><td>&lt;a href=&quot;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_337_744_Propidium_Iodide_Solution.aspx&quot;&gt;http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_337_744_Propidium_Iodide_Solution.aspx&lt;/a&gt;</td></tr></tbody></table>

从小鼠神经组织制备单细胞悬液

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

在神经系统中，已描述了数百种神经元和胶质细胞类型。大脑或脊髓中的每一种特定细胞类型都具有一组独特的细胞表面分子，即分子决定簇，可用于识别和表征该细胞类型。目前，可靠的细胞鉴定与分离技术需要制备单细胞悬液，同时尽量减少细胞死亡并保护特征性表面蛋白的完整性。gentleMACS解离仪与基于胰蛋白酶或木瓜蛋白酶的解离试剂盒联合使用时，能够高效且温和地解离脑组织，同时保护抗原表位并减少细胞损失。通过使用C管和经过优化的预设gentleMACS程序，可实现单细胞悬液的标准化制备。制备完成后，单细胞悬液可进一步使用偶联单克隆抗体（如识别神经前体细胞的Anti-Prominin-1 MicroBeads）进行处理，或利用髓鞘去除磁珠（Myelin Removal Beads）进行纯化。

从特定组织类型中解离细胞需要优化组织解离的参数，以获得大量具有活性且可培养的细胞。Miltenyi gentleMACS 解离仪通过一种简单且实用的方案优化了这一过程。本文介绍了该设备在神经组织中的应用。

在神经系统中，已描述了数百种神经元和胶质细胞类型。大脑或脊髓中的每一种特定细胞类型都具有……

在神经系统内，已描述了数百种神经元和胶质细胞类型。大脑或脊髓中的每一种特定细胞类型都具有一组独特的细胞表面分子或分子决定簇，可通过这些分子对其进行鉴定和表征。目前，可靠的细胞鉴定与分离技术需要在制备单细胞悬液的同时，尽量减少细胞死亡并保护特征性表面蛋白不被破坏。gentle max 解离器与胰蛋白酶或 pepane 基解离试剂盒联合使用时，能够高效且温和地解离脑组织，同时最大限度减少细胞损失并保护抗原表位。获得单细胞悬液后，可使用单克隆偶联微珠（如 anti prominent one 微珠）进行处理，以识别神经前体细胞，或进一步利用髓鞘去除微珠进行纯化。您好，我叫Sandra PeNAT，是位于德国巴格贝格的Mil Biotech公司神经科学产品线的项目经理。今天我将向您展示如何使用Genix解离仪从鼠脑组织中制备单细胞悬液。Genix解离仪是一种可在封闭无菌环境中解离多种组织类型的设备，因此无需繁琐的人工机械解离。现在我们开始操作。根据后续应用中目标抗原表位的不同，选择使用基于木瓜蛋白酶的神经组织解离试剂盒或基于胰蛋白酶的神经组织解离试剂盒。在今天的实验中，我们优先选用神经组织解离试剂盒P，以便使用抗突出一型磁珠分离出突出一阳性细胞。突出一蛋白对pepane和胰蛋白酶均不敏感，因此在此情况下，神经组织解离试剂盒P是更优的选择。在开始实验方案前，必须为该试剂盒准备好所需的试剂和溶液。准备您自备的不含钙离子和镁离子的Hank's平衡盐溶液（HBSS）、含钙和镁离子的HBSS，以及β-巯基乙醇。首先配制溶液2、溶液4，随后配制酶混合液1。第一步，将β-巯基乙醇加入溶液2中，使其终浓度为0.067毫摩尔（millimolar）。该溶液在 4 °C 下保存时可保持稳定长达一个月。接下来，溶解冻干粉和标有“溶液”的小瓶中的内容物。四、加入 0.7 mL 储存缓冲液，轻轻混匀，切勿涡旋振荡。现在准备酶混合液一，用移液器将1900微升溶液二和50微升溶液一加入C管中。此溶液足以解离400毫克组织，因此如果需要解离更多组织，则需额外配制酶混合液一。每个C管最多可处理1600毫克脑组织。将C管中的酶混合液在37摄氏度下孵育10至15分钟。开始解离时，用移液器将1毫升不含钙离子和镁离子的HBSS加入管中。将管子放在天平上，加入脑组织并记录其质量。这个P4小鼠的大脑重量约为0.2克。成年小鼠的大脑重量约为0.4克。对于所有重量小于400毫克的组织样本，我们今天使用的溶液体积是足够的。如果组织重量超过400毫克，则需按比例增加所有试剂的体积，单个C管最多可处理1600毫克组织。将小鼠脑组织转移至已准备好的C管中，C管内含1,950微升预热的酶液。混合一次，并 tightly 密封管盖。现在将C管倒置放入Gen Max解离仪中，并确保组织位于定子区域。选择程序MCO brain O one并运行该程序。这是解离过程中需运行的三个程序中的第一个，待程序结束后继续后续操作。移除 C 管，将样品在 37 摄氏度下孵育 15 分钟，并保持缓慢连续旋转。使用最大混匀管旋转仪时，设备的运行模式对应 4 转/分钟。第一次孵育结束后，将管子倒置放回解离装置，并运行程序 M brain O2。在下一次结合过程中，按每 400 毫克组织加入 30 微升酶混合液二的比例进行准备，即向 10 微升溶液四中加入 20 微升溶液三。当第二次结合反应循环结束时，通过管盖中心隔膜密封的开口，直接向C管中加入30微升的酶混合液二。为确保无菌，轻轻倒置C管以混匀，切勿涡旋震荡。然后将C管放回max mix管式旋转仪中，在37摄氏度下以每分钟四转的速度孵育10分钟。然后将CTU第三次也是最后一次放回轻柔的最大解离装置中，运行程序M brain oh three。当第三个程序完成后，将C管置于旋转器上，在37摄氏度下再孵育10分钟。现在短暂离心样品，以将细胞收集到管底。现在我们准备对细胞进行过滤。根据目标细胞类型的大小选择合适的细胞筛。如果要收集的细胞直径大于30微米，例如kinji细胞，则筛孔的尺寸必须足够大，以允许直径为该尺寸的细胞通过。对于明显单个阳性细胞，可使用30微米滤膜。使用能够穿过C管管帽隔膜密封开口的1000微升移液器吸头，从C管中取出已解离的组织。将细胞悬液加入置于15毫升收集管上的预分离滤膜中。对于较大的样本量，可能需要使用50毫升的离心管。让细胞悬液通过滤膜，然后加入10毫升含钙和镁离子的HBSS溶液洗涤滤膜。当处理的组织量超过400毫克时，可使用最多30毫升含钙和镁离子的HBSS溶液洗涤滤膜。随后在室温下以300 ×g离心10分钟，使收集管中的细胞形成沉淀，彻底吸除上清液，并将细胞沉淀重悬于所选的缓冲液或培养基中。此时，可选择性地去除任何髓鞘碎片，因其可能影响细胞分离和抗体染色效果。为了去除髓鞘碎片，我们建议使用髓鞘去除磁珠。否则，细胞即可用于后续实验。该点图基于碘化丙啶染色结果，表明来自家鼠拉伤组织的单细胞悬液中，有97%的细胞具有活性，类似于本视频中制备的悬液。这些细胞可进一步使用抗主要微珠进行纯化，以获得神经前体细胞。当在添加了B 27 Plus的Max Neuro培养基中培养时，这些细胞可在点图中形成神经球。使用髓鞘去除微珠处理悬液的优势得以显现：在从单细胞悬液中去除髓鞘后，通过Max分选可获得显著更高比例的表达主要神经前体细胞。我刚刚向您展示了如何使用Genix解离试剂和神经组织解离试剂盒从小鼠脑组织制备单细胞悬液。在进行此操作时，重要的是要根据所选的神经组织解离试剂盒（T型或P型）正确配制所有溶液。请参考NDK应用说明或数据表。采用该方法，可在无菌条件下以节省时间且标准化的方式处理胚胎组织以及D期组织切片或完整脑组织。感谢观看，祝您的实验顺利。

generation-of-single-cell-suspensions-from-mouse-neural-tissue

Research

科研

JoVE Journal

Biology

生物学

从小鼠神经组织产生单细胞悬浮液

本视频介绍了从胚胎小鼠发育中的大脑皮层分离神经前体细胞的方法。展示了从子宫中取出胚胎、解剖皮层组织以及消化分离出的大脑皮层的操作过程。...

小鼠神经干细胞前体的培养

本文介绍了一种从废弃的人类胎儿皮质组织中分离和培养神经干细胞的简单且可靠的方法。来源于已知人类神经系统疾病的人源组织培养物可用于病理性的细胞与分子过程的表征，并可作为评估药理学疗效的平台。...

从废弃的人类胎儿皮质组织中生成神经干细胞

本视频展示了一种从出生后小鼠小脑中分离干细胞并将其分化为神经细胞的方法。利用抗体包被的磁珠从分离的细胞悬液中纯化干细胞，并进行培养以形成神经球。随后将神经球维持在分化培养基中，以诱导生成神经细胞。...

从小鼠出生后小脑中分离干细胞并诱导其分化为神经细胞

本视频演示了一种通过结合自动化的机械解离和多种酶混合物以辅助酶消化的方法，从小鼠脑海马区获得高活性单细胞悬液的实验方案。...

从小鼠海马组织获取单细胞悬液

该视频展示了从小鼠脑组织制备免疫细胞单细胞悬液的过程。首先通过酶消化法将细胞从脑组织中释放出来，随后利用密度梯度离心法根据细胞密度分离免疫细胞，从而获得单细胞悬液。...

制备小鼠脑组织中免疫细胞的单细胞悬液

本文详细描述了一种从单只成年小鼠的脑室下区和齿状回同时生成神经前体细胞培养物的实验方案，该培养物可采用贴壁单层培养或神经球培养的形式。...

一只小鼠，两种培养：从单只小鼠的两个神经发生区分离与培养成年神经干细胞

建立成体神经干细胞（aNSCs）的培养体系，有助于研究并应用aNSCs进行治疗。胼胝体下区（SCZ）最近被确认为成年小鼠中一种新的成神经细胞形成区域。本文介绍了SCZ来源的aNSCs的分离、扩增和分化方法。...

从小鼠胼胝下区分离和培养成年神经干细胞

本文介绍一种从E13小鼠胚胎神经节隆起中分离神经干细胞的新型显微手术技术。...

小鼠胚胎神经干细胞的分离与培养

本文介绍了一种核转染系统，旨在提高从成年小鼠脑室下区分离获得的扩增神经干细胞（NSCs）的基因递送效率。研究结果表明，该方法显著改善了神经干细胞的基因调控效果，优于传统转染方案，并提高了细胞存活率。...

从小鼠成年脑室下区分离、扩增及核转染神经干细胞

为了研究脑部疾病中的免疫反应，一种常用的方法是分析免疫细胞的变化。本文提供了两种简单且有效的方案，用于从小鼠脑组织和颅骨骨髓中分离免疫细胞。...

从小鼠脑和颅骨中分离免疫细胞

学习使用gentleMACS解离器从小鼠脑组织制备单细胞悬液的方法，该方案通过优化酶解和机械解离参数，在保持细胞活力与表面抗原完整性的同时，实现神经组织的有效解离，适用于神经科学和细胞生物学研究。

从小鼠神经组织制备单细胞悬液

探索更多视频