2009年5月15日
CODA 8通道高通量无创血压系统可同时测量多达8只小鼠或大鼠的血压。该尾套系统采用容积压力记录法(VPR),通过测定尾部血容量来测量血压。
“coda”一词在意大利语中意为“尾部”。Coda无创血压系统借助一种专门的容积压力记录传感器,通过测量放置在动物尾部时尾部血容量的变化,实现对啮齿类动物的血压测量。本视频演示了如何设置该系统、准备动物,并同时对八只动物进行血压测量。
您好,我是 Anju Bala Krishnan,来自肯塔基大学列克星敦分校心血管研究中心 Alan Dougherty 实验室。今天我们将向您展示一种使用容积压力记录尾套法测量小鼠血压的实验操作。在我们的实验室中,该方法用于心血管系统的研究。
那么,让我们开始吧。设置CODA系统时,选择实验室中室温稳定在20摄氏度或以上的区域。避免靠近空调出风口的位置,以免动物暴露于高分贝噪音或异味中,从而引起刺激或应激反应。
动物气味可能包括您所使用的任何浓烈香水。打开Coda控制器,然后开启加热平台,将其设置为三档。如果室温高于25摄氏度,则从一档或二档开始。
首先执行控制器诊断测试,打开 Coda 软件。通过点击选择 Coda 设备,然后点击测试所选设备。
选择要测试的袖带和通道,然后点击测试。控制器诊断测试完成后,关闭设备测试窗口。选择要使用的控制器代码,然后点击。
使用这些设备来设置软件。选择工具以管理人员。然后,点击研究人员一。
如需更改名称,请点击后续行以添加其他研究人员,然后点击保存数据。点击技术人员标签页以修改或添加技术人员。
然后,点击“标本”标签,为动物命名以便于识别,并选择动物类型。接着点击保存数据。最后,点击“动物”标签。
如需更改动物类型和敏感性,请点击保存数据,然后关闭。要开始新实验,请选择文件 新建实验。输入实验名称,选择主要研究人员,并选择开始日期。
单击下一步。下一步是输入基本的实验会话信息。首先输入会话名称,将适应周期设置为5;如果不需要包含适应周期,则设置为0。
设置组数为多组时,组间间隔时间为30秒。每组循环次数为20次,循环间间隔时间为5秒。然后点击下一步。
开始样本选择时,从样本池中选择样本并将其分配至第一个可用通道。然后点击下一步以设置会话参数。将最大阻塞压力设置为 250 毫米。
汞柱放气时间降至20秒。对于小鼠,最小体积设为15 µL,显示样式设为每张图表一个通道。您还可以添加其他研究人员和技术人员。
然后点击下一步。查看会话脚本并点击下一步。在完成接下来所述的动物准备步骤之前,请勿选择“完成”。
现在可以取出动物,并将其放置在尾动脉血压系统的旁边。在将动物放入固定器之前,注意观察每只动物的大小与所选固定器尺寸的对应关系。动物应能自由地进入固定器。
用手抓住每只动物的尾巴,将其轻轻放入固定装置的后部,固定装置的后部朝向鼻罩的开口端。通过旋转后部舱门上的螺丝,小心地将后部舱门固定到固定装置上。在固定后部舱门时,注意不要夹到动物的尾巴或其他任何身体部位。
下一张幻灯片。将鼻锥朝向后部舱门,以限制动物的活动。
鼻锥应置于限制动物转身的位置。将动物放入固定装置后,把固定装置放置在加热平台上。在指定位置,让动物至少适应固定装置五分钟。
不要触摸或抓握动物。动物在固定器内时,过多接触可能会刺激动物,且切勿将动物单独留在固定器中无人看管。为正确安放阻断式尾套,应将尾巴穿过阻断套环,并将套环尽可能贴近尾根部,但不得用力强行放置。
随后,将尾部穿过 VPR 传感器套管,将其放置在阻断套管前方两毫米以内。将管路固定在支架后上方的凹槽内。通过充气阻断尾部套管以阻碍尾部的血液流动。
缓慢放气解除阻塞袖带,VPR 尾套内置的特制传感器可测量血液回流至尾巴时的血流生理特征。VPR 传感器袖带可测量因血流引起的动脉脉动所导致的尾巴肿胀。收缩压在尾巴肿胀首次出现时自动测定。
当尾部肿胀速率停止增加时,舒张压将自动计算得出。将所有动物放入固定装置并套上尾部袖带后,至少让它们适应五分钟以达到热平衡。记录动物的体温。
使用红外温度计时,动物的体温通常应介于 32 至 35 摄氏度之间。现在动物已准备就绪,我们可以开始实验。点击“完成”以开始实验。
红线代表阻塞袖带和VPR传感器袖带的放气过程。蓝线代表尾巴中血容量的变化。蓝线的第一个拐点,即变化速率最小值,对应于收缩压。
蓝色曲线的第二个拐点,即变化速率的最大值,用于确定实验结束时的舒张压。立即从袖带和固定装置中取出动物。此时会显示一个简单的会话总结报告。
实验中收集的数据以 Excel 文件格式保存。可在 Excel 文件中通过多种方式处理数据。常见的做法包括计算平均值和标准差,以及删除测量值。
如果标准差大于30。此外,可查看被拒绝的循环,且整个数据库可轻松导出至Excel。请参考书面实验方案和用户手册。
有关更多信息,我刚刚向您展示了如何使用容积压力记录法非侵入性地测量小鼠血压。最重要的是,遵循本操作流程以减少动物应激,从而获得准确且一致的测量结果。就此结束。
感谢观看,祝您的实验取得圆满成功。
CODA 8通道高通量无创血压系统可同时对多达八只啮齿类动物进行血压测量。该系统采用尾套法结合容积压力记录(VPR)技术,通过监测尾部血容量的变化,准确评估血压。
利用容积压力记录法(Volume Pressure Recording, VPR)对小鼠进行无创、高通量的血压测量,可实现对临床前模型中心血管表型的可靠分析以及血流动力学终点的定量评估。该技术通过在遗传多样性小鼠群体或药物处理群体中提供可重复的多参数数据,支持早期药物发现、靶点验证和转化医学研究。CODA系统的可扩展性和标准化特性有助于在心血管药物研发中进行项目层面的决策制定以及跨研究间的比较。
VPR 尾套法通过实现从早期靶点验证到先导化合物优化及临床前药效研究的标准化、非侵入性心血管表型分析,融入了从发现到临床前研究的连续过程。