个别细胞散为主细胞学标本的细胞块的制备

Shidham准备从单独分散的细胞和小细胞群体的细胞学标本AV标记的细胞块的方法。

细胞块制备首先将浓缩的标本细胞转移到固定在较大管内的平底玻璃管中。然后通过离心将细胞分层在底部，然后加入 AV 标记物和熔融的 HistoGel。向载玻管中添加温水可确保 HistoGel 保持液态。

随后的离心将 AV 标志物推过凝胶，并将细胞浓缩成靠近细胞块切割表面的层。固化后，可以去除凝胶按钮并进行处理以进行石蜡包埋。您好，我是来自威斯康星州密尔沃基市威斯康星医学院病理学系细胞学科的 George Varszegi 博士。

我是 Vsam 博士，也来自威斯康星州密尔沃基医学院病理学系细胞病理学系。今天，我们想向您展示一种从细胞学制备细胞块的程序，其中大部分是单独分散的细胞。我们使用该程序来研究细胞块切片中这些单独分散的细胞中细胞的免疫特征，并用于评估这些切片上的特殊染色剂。

那么让我们开始吧。要开始此过程，将约 0.5 毫升优选浓缩的样品转移到直径为 15 毫米的 45 毫米长的平底玻璃管中。接下来，将玻璃管放入一个大的平底塑料载体管中，并在室温下以 1800 Gs 离心 5 分钟。

离心后，从塑料载管中取出平底玻璃管，倒出 super natan。注意不要打扰底部平坦的细胞沉淀层。Johnny Vena 或 AV 标记上的暗信标作为路标添加到单元格中。

细胞包埋后，AV 标记物用于识别细胞在石蜡块内的浓度水平。使用特殊的移液器将先前制备的 AV 标记物平面立方体添加到管中的细胞中。现在开始添加凝胶的过程，通过在微波炉中以中等功率将其熔化 10 秒来液化等分试样的组织凝胶或 HG，或按照制造商的说明进行作。

将 0.5 毫升熔融 HG 添加到含有沉淀细胞的试管中。快速混合并重新盖管。立即将约 2.5 毫升 45 摄氏度的温水加入载体塑料管中。

然后插入包含细胞、AV 标记和 HistoGel 的 CAPAs 管。快速工作并使用温水可防止凝胶在后续步骤中凝固。接下来离心以将 AV 标记物推过凝胶并将细胞浓缩成更接近最终石蜡包埋细胞块的切割表面的层。

使用旋转杯，而不是固定角杯，使细胞垂直于玻璃管的平底浓缩，并在室温下以 1800 Gs 离心 5 分钟。离心完成后，轻轻地从离心机中垂直取出试管，注意不要打扰底部细胞的薄沉淀层。使用镊子垂直取出较小的玻璃管，而不会干扰标本细胞的沉积层。

最后，将小玻璃管垂直冷藏 15 分钟，以冷却和固化凝胶。15 分钟后，继续从玻璃管中取出含有细胞的凝胶，以去除固化的 HG 圆盘，该圆盘底部包含一层浓缩标本以及深色 AV 标记。使用连接到装满 23% 福尔米菌素的注射器的 10 号针头。

首先将针头沿凝固的 HG 盘外围的管侧插入。继续沿管子的侧面旋转针头，同时慢慢将福尔明溶液推入注射器。观察 HG 按钮与玻璃管平底的分离情况。

通过将细胞块放入标记的细胞盒中并将其提交进行组织处理以制备石蜡包埋的细胞块，将包含深色信标 AV 标记物和浓缩标本的分离凝胶按钮称为细胞块整理。嵌入细胞块后，继续切割标本以开始切割嵌入石蜡的细胞块的圆盘，通过粗切将石蜡包埋的细胞块安装在切片机上，以平整石蜡块的表面并暴露细胞块的圆盘，直到深色 AV 标记暴露并清晰可见。一旦深色 AV 标记暴露出来，切下 3 到 4 微米厚的切片。

这些切片包含来自原始标本的浓缩细胞。将每个切片收集在载玻片上以进行进一步染色，然后进行显微镜检查。在低放大倍率下，我们看到在标本中加入 AV 墨水香蕉皮标记物对这些 h 和 e 染色切片细胞性的影响。

在左图中可以看到，该标记允许监控截面切割深度，以获得具有良好蜂窝度的水平。AV 标记还允许不同细胞的方向，特别是使用该标记的其他载玻片上的不同序列切片中跟踪切片。没有切割深度，就无法监控。

在细胞结构很少的切片平面上收集组织样本。样品中存在的细胞化程度在高放大倍率下更加明显，使用 AV 标记物可以很容易地监测切割深度，并且可以轻松避免获得细胞性差的样品。我们已经向您展示了一种从标本中制备细胞块的方法，其中包含松散分散的片段和细胞。

我们在细胞块处理过程中添加的深色 AV 标记有助于我们选择细胞浓度最高的这些切片。它还使我们能够在载玻片上正确定位这些切片。当细胞沿着溢流玻璃管（即切割表面）对齐时，HistoGel 必须处于熔融阶段。

然而，该程序可以通过相关修改修改为其他方法，包括凝血酶、纤维蛋白原等冷方法。就是这样。感谢您的观看，祝您的手术好运。

谢谢。