2009年9月29日
由于缺乏易于获取且合适的病灶,受训人员练习细针穿刺活检(FNAB)相对具有挑战性。制备动静脉(AV)模型病灶用于练习FNAB操作并掌握熟练技术相对简便。
为制备模拟病灶,裁剪一块六英寸乘六英寸的硬纸板作为基板。在基板上覆盖一层半英寸厚的密封胶。然后取一段长两英寸半的香蕉,轻轻按入密封胶中。
将香蕉作为模拟病灶核心,完全嵌入填缝剂中,避免裹入气泡。用一块塑料薄膜覆盖核心,并将其塑造成光滑的隆起形状。待填缝剂变硬并固化后,将其置于温暖处使支架完全固化。
撕下保鲜膜,练习细针穿刺(FNA)技术,从香蕉中心获取样本,并练习涂片制备。我是来自威斯康星医学院病理科细胞病理学 division 的 Vino 博士。我是同部门的细胞病理学专科培训医师 George Varszegi 博士。
今天我们将演示一种制备模拟病灶的方法,该方法使用易于获取且简单的工具和材料,用于练习FNAV操作技术的熟练度。我们通常采用此技术向细胞病理学专科培训医师和病理科住院医师介绍最终的细针抽吸活检操作流程。在后续培训过程中,这些专科医师和住院医师将在导师的监督下,通过对临床可触及的病灶进行细针抽吸操作,进一步提高其操作技能。
那么,让我们开始吧。在计划进行细针抽吸活检(FNAB)练习的前一到两天,准备好模拟病灶。开始之前,在实验台上准备好一块纸板、一支填缝枪、一根未去皮的香蕉和保鲜膜。
制备模拟病灶的第一步是裁剪一块六英寸乘六英寸的纸板,用作基板。接下来,切取一段长约两英寸的香蕉,作为模拟病灶的核心。在准备好模拟病灶核心后,使用填缝枪将约半英寸厚的填缝剂均匀涂抹在基板上。
轻轻将模拟病灶核心按入湿润的填缝胶中。然后在模拟病灶核心上添加更多填缝胶,使其完全嵌入。佩戴手套操作时,注意避免在填缝胶中混入气泡。
用手将填缝剂涂抹在模拟病灶核心周围,确保其被完全包覆。接着用一块6英寸×6英寸的塑料保鲜膜覆盖土堆状填缝剂,并将其塑造成光滑的凸面形状。将填缝剂土堆置于温暖处,使其固化时间比所用品牌填缝剂建议的固化时间再延长6至8小时。
密封胶在接触空气后会固化。可将密封胶堆放在高于60华氏度的室温下静置,或在37摄氏度下孵育以加速固化过程。固化后,密封胶变硬,可轻松剥离塑料薄膜。
此时,FNA模拟病灶已准备就绪,可用于练习FNA操作。在完成模拟病灶的制备并使其充分固化后,即可用于细针穿刺活检(FNAB)操作的练习。此处我们使用的是带功能阀门的组织采集器,但简而言之,也可使用任何其他FNA系统。
THFB 由一根用于穿刺标本的针头、一个用于收集抽吸物的针座、一个用于控制装置内部压力的注射器以及一个用于连接和断开针座与注射器的阀门组成。首先准备 FNA 组件,此时应关闭连接针座与注射器的阀门。然后拉出注射器活塞,以在注射器筒内形成负压。
然后将针头尖端插入病灶。打开阀门,使针座与注射器筒内的负压相连。负压将病灶内的物质吸入针头,并进入针座。
在病灶内前后移动针头,以抽吸具有代表性的细胞成分样本。通过从不同方向将针头插入病灶,保持负压并采集病灶不同区域的样本。完成采样后,旋转阀门以断开注射器筒内的负压,并通过打开阀门使压力与外部环境平衡。
接下来,旋转阀门以断开与外部环境和注射器筒的连接。在阀门关闭的情况下,将针头从病灶中取出。保持阀门关闭可使针座端维持轻微的负压,防止标本通过毛细作用回流至病灶内。
类似于移液现象,您的组织样本现在已安全地保留在针头内。当您将针头从穿刺部位拔出后,应将抽吸物直接涂抹在玻片上,以制备直接涂片。一旦将一滴抽吸物排至玻片上,可根据抽吸物的性质采用多种方式将其推片展开,我们通常采用此处所示的方法,用两张玻片之间推片的方式均匀涂布样本。
如果实际标本混有血液,可在放置第二张载玻片之前倾斜玻片以去除多余的血液。如果穿刺物主要为不含微小组织碎片的悬液(例如来自淋巴增殖性病变),可采用“肋样涂片法”,即用一张玻片的边缘在另一张玻片上制作类似肋骨排列的多条涂片;也可采用“推片法”,即用一张玻片在另一张玻片上推制成单层薄膜。制备好涂片后,可通过多种方法进行后续处理和固定。
对于不同的染色方法,最佳做法是在一到两分钟内将所有涂片迅速风干。较厚或较湿的涂片可通过在空气中左右移动载玻片来加快干燥,或更优地使用吹风机或手持电池供电的便携式风扇加速干燥。使用风扇时需小心,避免产生气溶胶,特别是对于预期可能感染的病灶,在涂片干燥后应根据实验需求进行相应的染色处理。
此处我们演示使用D快速染色法对空气干燥的涂片进行染色,D快速染色是罗马诺夫斯基类染色法中的一种,适用于特定染色时间。请遵循制造商的说明。我们发现,空气干燥可显著提高染色清晰度,如本例中经巴氏染色的涂片所示。
对这些初步染色结果的分析将决定是否需要进行其他检测,例如选择性细胞块电镜检查、微生物培养或其他检测。成功完成模拟病灶穿刺后,即可正确吸取病灶材料,本例中为香蕉的糊状植物性物质。该材料可涂抹于玻片上,用于练习涂片和染色操作。
我们刚刚向您展示了如何制备模拟病灶以练习细针抽吸活检(FNAB)的操作技能。在进行该实验时,需要牢记:应在技能考核前至少36小时制备模拟病灶,因为填缝胶需要一定时间才能完全固化。另一个关键点是在执行FNAV操作过程中,必须按照正确的顺序应用和释放负压,以获得最佳的抽吸物样本。
以上就是全部内容。感谢观看,祝您练习顺利,非常感谢!
本文讨论了用于练习细针穿刺活检(FNAB)的模拟病灶制备方法,该方法对受训人员至关重要。所述方法简便易行,且使用材料易于获取。
该方法提供了一种低成本、可重复的模拟模型,用于细针穿刺活检(FNAB)培训,填补了病理学学员在临床前技能培养方面的重要空白。通过支持组织抽吸、涂片制备和染色流程的反复练习,该模型有助于学员早期建立诊断性细胞病理学所需的技能。在接触临床病灶之前,该模型可提高培训准备度,减少学员操作的差异性,并支持跨机构的标准化技能评估。
该方法通过在接触临床前疾病模型之前对人员进行病灶取样技术培训,将其整合到早期发现工作流程中,从而确保下游分析获得可靠的样本。