大会，加载和分析超速离心机样品池对齐

大家好，我是 Andrea Balbo。我在美国国立卫生研究院的 Peter Shucks 小组工作。在本视频中，我们将向您展示分析型超速离心机样品池的组装、加载和转子对准程序。

让我们开始吧。收集。以下是分析超速离心机样品池的组件堆叠在样品池外壳内的是一个 12 毫米的双扇形木炭场，epon 中心件将夹在两个窗口组件之间。每个车窗组件由车窗垫圈、车窗衬垫和固定在车窗支架内的车窗组成。

然后，这些部件将滑入样品池外壳内，方法是将它们的键槽与外壳筒内的钥匙、外壳垫圈对齐，然后用螺丝环以 120 到 140 英寸磅的扭矩压力关闭样品池。将样品加载到参考样品中后，两个外壳塞垫圈和一个外壳塞密封样品池的装载孔，以避免在实验过程中出现扫描伪影、泄漏和破损，所有组件都必须清洁、干燥、无灰尘、无灰尘，并处于最佳状态，经常检查，必要时更换。您还需要以下物品：分析型超速离心机、钛合金四孔转子、实验室天平、带可读刻度盘和扭矩支架的扭矩扳手、平衡重和平衡重、一把平头螺丝刀、一对镊子、一个装有长锥形移液器吸头的 200 微升移液器、对准工具和旋涂润滑剂。

我们通过将两个窗口组件放在一起来开始样品池构建。首先在车窗支架的底部放置一个车窗垫圈。接下来，将窗衬（有时称为窗垫）放置在窗架内，使衬垫的开口与窗座的键槽相对，呈一个小角度。

然后将窗口放入支架中，将窗口上的划线标记与窗口支架的键槽对齐。轻轻按下窗口两侧的最边缘。为了确保样品池的正确密封和准确扭动，我们在螺环中轻轻涂上外壳垫圈。

使用 spin coat 润滑剂，在拇指和食指之间涂抹非常少量的 spin coat。在螺环螺纹上涂上一层薄薄的、不可见的旋涂膜。同样，涂覆外壳垫圈。

擦去任何可见的润滑剂。开始样品池组装。通过将键槽与外壳钥匙对齐，将一个窗口组件朝上滑入单元外壳中。

将中心件键槽与外壳钥匙对齐，让它轻轻落在外壳内的窗户组件顶部。切勿使用任何类型的工具将中心件推入电池外壳。这可能会对中心件造成永久性损坏，从而导致泄漏储存实验。

转动第二个窗口组件，使窗口面向中心并远离您。将键槽与外壳键对齐，然后将其向下滑动到中心件的顶部。将外壳垫圈放在顶部。

然后拧一个螺丝环，以便可以看到 out 字样。使用你的手指。然后用对位工具，用手拧紧螺丝环。

有时，中心件不容易滑入外壳筒中。您可以先对齐它，然后将第二个窗口组合件放在它上面。通过对窗户组件施加轻微的向下压力。

您可以同时将两者滑入单元外壳中。这样，我们避免了直接按压中心。现在是查看牢房是否有灰尘、棉绒和指纹的好时机。

您还会注意到牛顿环表明中心件和窗户之间仍有空气。在拧起螺丝环并且可以看到单词 out 后，这些会消失。将样品池一直向下放入样品池内。

扭矩支架的扭矩夹头。通过在扭矩支架手柄上施加恒定压力将电池固定到位。在一个连续的动作中，将螺丝环拧紧到 120 到 140 英寸磅之间。

松开扭矩支架手柄，小心地取出样品池。我们通常将 400 微升的体积加载到 12 毫米中心件的每个扇区中。使用 200 μL 移液器将样品池放置在顶部，使加载孔位于顶部，并且螺环上的单词 out 可见。

通过加载孔将移液器吸头向下滑入左侧中心区域，然后缓慢分配 200 μL 参比溶液。使用相同的移液器吸头和相同的技术，小心而缓慢地重复一次，总共 400 μL。用 400 微升样品溶液填充右侧中心扇区。

必须尽可能匹配参比溶液和样品溶液的体积。将移液器吸头牢固地安装在移液器上，缓慢加载和分配溶液，避免加载气泡，并对两种溶液使用相同的移液器吸头。所有这些都有助于保持体积相等以密封细胞。

将两个红色外壳塞垫圈紧贴每个装载孔中，确保它们小心地放置在中心件和铝制外壳之间。用壳塞盖住每个装载孔，然后用小平头螺丝刀手动拧紧。在加载转子之前，确保平衡轮和与平衡轮相对的单元的重量相差在 0.5 克以内。

从零的余额开始。首先，称量位于平衡对面位置的样品池。撕碎天平以减去样品池重量。

然后称量平衡。在这里，我们发现平衡比样品池轻 4.193 克。选择一个 4 克的平衡重，并将其拧入平衡重的连接孔中，确保它不会从顶部突出。

重新调整平衡器以确保最终重量在 0.5 克以内。使用四孔转子，将平衡轴置于位置 4 中，以便看到白色箭头并指向离心力的方向。使用对准工具，确保它一直位于转子内部。

将天平样品池放置在壳体塞朝向转子中心的位置，并且可以看到螺环上的"out"字样。同样，使用对准工具，确保它一直向下位于转子内部。从转子下方看。

对齐内部。划线，用平衡上的划线标记标记最靠近转子中心的标记 使用对准工具。以同样的方式，将样品池对齐在位置 2。

所有细胞对齐后，转子即可放入离心腔中。