将原位注射到乳腺脂肪垫中:在小鼠中确定乳腺癌

首先，在培养物中建立所需的乳腺癌细胞系。手术前一天，剃掉小鼠的腹部，用脱毛膏去除皮毛，露出腹股沟。手术当天，收集细胞，麻醉小鼠并确认对脚趾捏没有反应。使用镊子捏住周围的皮肤，形成一个隆起的隧道。

然后，用注射器收集的细胞刺穿皮肤。针头应沿着隧道，直到尖端靠近。轻轻地将针尖向上移动到正下方的乳腺脂肪垫中。取下镊子，用针头形成一个皮肤帐篷，然后慢慢注射细胞。

最后，缩回注射器，注意不要打扰周围的圆形凸起。注射的细胞和随后的肿瘤表达荧光素酶，可以使用生物发光成像进行追踪。在示例方案中，我们将展示小鼠原位乳腺癌的建立。手术前一天，手动约束受体小鼠，将动物腹部的一面向上翻转到第四个周围要剃光的毛皮。

用一层薄薄的脱毛膏擦拭毛皮。30 到 60 秒后，用蒸馏水去除乳霜。并用柔软的纸巾擦干鼠标。手术当天，在冰上的无菌微量离心管中将小鼠乳腺癌细胞悬液稀释至每毫升 PBS 浓度的 2 x 10 至第 5 个细胞。

每次注射前，装入一个配备 .45 x 16 针头的 1 毫升注射器，每只小鼠 50 微升细胞。并确认每只镇静动物对脚趾捏无反应。在动物的眼睛上涂抹药膏，用镊子在第一只老鼠的第四个周围的皮肤上搭帐篷，为注射器创造一个隧道。

握住注射器，斜面朝上，在距离5 到 10 毫升的地方皮下进入皮肤，沿着隧道直到针尖几乎到达。- 使用镊子在第一个周围的皮肤上搭帐篷，为注射器创造一个隧道。针头应进入镊子尖端之间，并应向上滑起，而不是压入组织。小心地将针尖向上移动到乳腺脂肪垫中，直到斜面位于下方。

并松开皮肤帐篷，让癌细胞缓慢注射。- 插入后，小心地将针尖向上移动到乳腺脂肪垫中，直到斜面位于下方，并且您感到阻力，以确保将细胞输送到正确的位置。注射完所有细胞后，将针头稍微转向一侧并慢慢缩回注射器。用棉签对针头伤口施加压力 10 到 20 秒，以确保没有液体渗出。

注射的应显示为透明的白色扁平球体，位于中心