JoVE 实验百科全书
生物学
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- 至 开始, 位置 一个 麻醉的 鱼 腹侧 侧面 向上 进入 a 裂隙 在 a 湿润 海绵 插入 的 阳性 电极 进入 的 鱼的 中线 在 的 水平 的 这 球状的 动脉硬化。 接下来, 插入 的 阴性 电极 以下 的 心室 和 0.5 到 1 毫米 到 的 左侧 的 的 中线 到 创建 a 双极 铅 跨越 哪个 差异 在 电的 潜能 可以 是 测量。 最后, 插入 的 参考文献 电极 接近 的 肛门 区域 至 地面 的 电的 信号
开始 记录, 和 之后 a 短 时间 审稿 的 痕量 到 确保 那个 四 标准 是 met 全部 波 形成 必须 是 可见的 和 不同的 从 每个 其他。 这 P 波 哪个 表示 心房 去极化, 必须 是 阳性 The 净 总和 的 的 Q, R, 和 S 波浪, 哪一个 代表 心室 去极化 必须 是 阳性 以及 最后, 的 T 波 哪一个 代表 心房 复极化, 必须 是 阳性 如果 的 标准 是 不 met, 调节 的 电极 直到 a 适当的 痕量 是 记录。
之后 记录, 清醒 的 鱼 由 浸没 它 在 含氧的 水 和 喷射 水 结束 的 鳃 直到 的 鳃 或 的 鱼 开始 到 移动 定期地。 在 的 例如, 我们 将 执行 表面 心电图 开启 一个 成年 斑马鱼
- 开启 的 天 的 的 实验, 转运 的 斑马鱼 从 的 水族箱 到 的 实验室 至 设置 向上 的 在 体内 心电图 记录 系统, 连接 的 必需的 片段 的 设备 和 插入 的 三 颜色编码的 不锈钢 钢 电极 的 的 心电图 铅 进入 的 三 颜色匹配的 获取 门户 的 的 放大器。 对于 诱导 的 水平 4 麻醉 浸入 一个 成年 斑马鱼 在 a 培养皿 含有 a 溶液 的 麻醉剂 在 的 最低 预设的 浓度 已批准 由 的 机构的 动物 护理 和 使用 委员会
一旦 的 斑马鱼 具有 维持 水平 用于 麻醉 用于 三 秒, 使用 a 配对 的 钝端 镊子 到 立即 转移 的 鱼 到……上 a 潮湿的 海绵 与 a 裂隙 腹侧 表面 上 用于 放置 的 的 三 心电图 电极 轻柔地 插入 的 阳性 电极 在 的 腹侧 中线 在 的 水平 的 这 球状的 动脉硬化 1 到 2 毫米 上方 一个 虚构的 线 连接 的 二 较低 边缘 的 的 鳃盖
位置 的 阴性 电极 尾侧 和 0.5 到 1 毫米 左侧 侧向地 到 的 阳性 电极 在 a 距离 更大 比 的 最大 顶端-基底 长度 的 的 成年 斑马鱼 心室 然后, 位置 的 参考文献 电极 尾侧 接近 的 肛门 区域 对于 心电图 记录, 开始 的 系统 和 开放 的 心电图 数据 采集 程序 选择 的 期望的 设置 从 的 下拉菜单 菜单 用于 范围, 低 传代 和 高 通过。
按压 开始 到 启动 连续的 无缝 心电图 记录 在 a 取样 速率 的 1 千赫兹 为了 优化 铅 定位 用于 最大 信号 到 噪声 比率, 按压 停止 到 停止 的 记录 和 审稿 的 痕量 很快 之后 的 非常 首先 记录 尝试 用于 每个 心脏 如果 的 心电图 是 预期 到 是 正常 确认 那 全部 心电图 波 形态 是 不同的 和 易于 可见的 和 那 的 P 波 净 QRS 复合物, 和 T 波 是 全部 阳性
- 这个 单个 大多数 关键的 步骤 是 铅 定位 至 最大化 的 信号 到 噪声 比率。 应用 全部四个 验证 标准 之后 的 非常 第一 心电图 记录 尝试 用于 每个 鱼 到 获得 正确 反馈。
- 如果 a 正常 心电图 是 预期的 重新定位 的 电极 作为 必要 直到 全部 的 这些 四 验证 标准 是 满意。 如果 a 正常 T 波 是 预期 但 的 T 波 是 太 小, 重新定位 的 电极 到 最大化 的 T 波 振幅 简历 的 心电图 记录 之后 优化 的 铅 定位 保存 的 心电图 扫描 用于 随后的 分析。
在 的 结束 的 的 心电图 记录 会话, 仔细地 移除 的 电极 无 损伤 的 鱼 在 存活率 研究 转移 的 鱼 到 新鲜的, 含氧的 鱼 水 自由 的 tricaine 请 注意 那 在 这 视频 到 促进 读者 观察 的 的 鱼 恢复 从 麻醉 氧合 是 已停止。
至 促进 恢复 从 的 麻醉 在 存活率 研究, 使用 a 巴斯德 移液器 到 剧烈地 喷射 水 结束 的 鳃 直到 的 鱼 恢复 常规 鳃 运动 或 游泳。 然后 监测 的 鱼 用于 完整 恢复 从 麻醉 之前 返回 的 鱼 到 的 水族箱 的 鱼 是 被认为 完全 回收的 从 麻醉 当 它 能 游泳 直立 用于 在 最少 5 秒