Drosophila 雄性附属腺解剖：一种分离次级细胞的方法

- 下方 a 解剖 显微镜 和 在 血清 补充 培养基， 移除 的 生殖 道 从 每个 果蝇 与 镊子 首先， 移除 部件 的 的 消化的 道 那 可能 有 伴随 的 生殖的 道 至 分离 的 附属部件 腺体 和 射精的 导管， 移除 的 睾丸， 的 射精的 灯泡， 和 的 使君子 洗涤 的 组织 用于 一 到 二 分钟 在 PBS 至 移除 的 血清 然后， 转移 它 到 解离 溶液

至 暴露 的 细胞 内部 的 腺体 到 的 解离 溶液， 保持 的 中心 的 每个 腺体 与 镊子 和 切片 通过 的 腺体 与 a 配对 的 锋利的 镊子 移除 的 近端 部分 的 的 腺体 和 的 射精的 导管 到 离开 后方 的 远端 结束 的 的 腺体 含有 的 罕见 次要的 细胞 种群 负责任的 用于 分泌 蛋白质 参与 在 交配。 最后， 转移 的 附属 腺体 提示 到 a 微 离心机 管 在 制备 用于 消化 在 的 随后 方案 我们 将 解剖 的 附属结构 腺体 到 分离 次要的 细胞 用于 转录组 分析。

- 之前 开始 的 步骤， 切割 和 火焰 圆形， 宽视野 200 微升 提示 用于 操作 的 腺体, 和 通过 的 尖端 开启 的 多个 1000 微升 提示 接近 a 火焰 用于 较少 比 一 第二 到 狭窄 的 开口 然后， 分选 的 修饰的 提示 从 较窄的 到 更宽的 基于 开启 他们的 速度 的 吸取 对于 附属装置 腺体 解剖 位置 20 到 25 雄性 果蝇 在 a 玻璃 培养皿 在 冰 和 使用 镊子 和 a 解剖 显微镜 到 移除 的 生殖 道 的 一 雄性 果蝇

清晰 的 附属物 腺体 配对 从 全部 的 的 其他 组织, 包括 的 睾丸 和 射精的 灯泡， 和 转移 的 附属结构 腺体 到 a 玻璃 培养皿 含有 血清 补充 培养基 在 室 温度 当 20 对 的 附属器官 腺体 有 已经 收集 洗涤 的 腺体 在 a 培养皿 的 PBS 用于 一 到 二 分钟 在 室 温度 在 的 结束 的 的 洗涤， 转移 的 腺体 到 新鲜的 制备完成 解离 溶液， 和 使用 锋利的 镊子 在……下方 a 解剖 显微镜 到 牢固地 捏取 的 中段 的 a 腺状的 叶

使用 a 第二 配对 的 镊子 切割 的 组织 与 的 锋利的 尖端 到 分离 的 近端 区域 的 的 附属结构 腺体 和 的 射精的 导管 从 的 部分 的 的 腺体 含有 次要的 细胞 然后， 使用 a 预润湿 火焰 圆形的 宽视野 200 微升 移液器 尖端 到 转移 的 腺体 到 a 1.5 毫升 管