安装成体果蝇大脑:一种为共聚焦成像准备载玻片的方法

- 在带正电的显微镜载玻片上，粘贴两个盖玻片，它们之间有足够的距离，为安装果蝇大脑创造一个空间。在立体显微镜下，将封固介质中的大脑移液到该空间。组织的负电荷将帮助大脑粘附在载玻片表面的正电荷上。

去除多余的安装介质，以允许大脑以网格状精确定位在载玻片上，触角叶朝上，然后通过粘贴第三个盖玻片来桥接两个盖玻片以覆盖大脑。

要填充空腔，请将封固剂一次一滴放入空腔边缘，并使其通过毛细管运动扩散，以免干扰大脑。

用指甲油密封腔体，并在零下 20 摄氏度的黑暗中储存，以保持染色组织的荧光。

在示例协议中，我们将安装果蝇大脑，用于免疫染色神经元的共聚焦成像。

- 要安装大脑，请构建一个桥式滑梯。将两个基盖在带正电的载玻片上相距约 1 厘米的位置。确保带正电的一面朝上。然后用指甲油将盖玻片粘在载玻片上，让抛光剂完全干燥后再继续。

接下来，将载玻片置于立体显微镜下，将培养基中的大脑移液到盖玻片之间的空间中。请务必调整照明以改善大脑的可视化。

接下来，从载玻片中吸出额外的封固剂，小心避开大脑。然后，吸走剩余的多余封固剂。这将使大脑能够更精确地定位。现在，使用镊子将大脑定向成网格状，触角叶朝上。

然后，将盖玻片放在大脑上，并使用指甲油密封附着在基盖玻片上的顶盖玻片的边缘。

现在，用新的封片剂逐滴加载中心腔，通过毛细管作用将介质吸入盖玻片下方。填充空腔后，使用透明指甲油将其完全密封。