Drosophila 护理细胞的显微注射：一种细胞内递送方法

- 放置 a 盖玻片 与 解剖分离的 卵 腔室 到……上 的 显微镜 阶段 定位 一个 卵 腔室 的 的 适当的 发育的 载物台 和 方向 用于 显微注射 中段 到 晚期 卵 腔室 有 a 大 可见的 卵母细胞 卵黄， 和 那些 在 的 正确 取向 是 与 他们的 前后 轴 垂直的 到 的 方向 的 注射

黑腹果蝇 神经 细胞 是 a 组 的 15 细胞 内部 的 卵 腔室 负责任的 用于 沉积 母系的 衍生的 营养物质 和 生物分子 进入 的 开发中 卵母细胞 设置 向上 的 显微注射仪 系统 到 的 适当的 注射 和 补偿 压力 到 确保 一致的 注射 体积 和 向外 流 仔细地 带来 a 此前 加载 毛细管 针 进入 的 领域 的 查看 因此 那 的 细胞 和 针 是 在 的 相同 局部的 平面

确保 那 那里 是 无 空气 被困住的 在 的 尖端 的 的 毛细管 和 那 那里 是 a 连续的 流 的 的 溶液 然后 调节 的 Z轴位置 的 的 目的 到 焦点 开启 的 膜 分离 的 卵泡 细胞 从 的 护士 细胞 插入 的 针 进入 a 护士 细胞 和 执行 的 注射

的 随后 实验方案 展示 显微注射 果蝇 护士 细胞 与 荧光的 寡核苷酸 探针， 称为 分子 信标， 对抗 母系 贡献 mRNA 转录本 用于 活体 细胞 成像

- 对于 分子 信标 显微注射 选择 的 40x 油 目的 和 安装 a 覆盖 滑动 与 的 解剖分离的 卵 腔室 到……上 的 显微镜 阶段 定位 一个 卵 腔室 在 的 中 到 晚期 发育的 载物台 那 是 正确地 定向的 用于 显微注射 然后 设置 向上 a 显微注射仪 与 的 适当的 注射 和 补偿 压力。

使用 的 显微操作仪 操纵杆 轻柔地 较低 a 针 已加载 与 一 微升 的 分子 信标 溶液 进入 的 油 滴 带来 的 提示 进入 焦点 朝向 的 外周 的 的 领域 的 视图 执行 a 清洁 功能 到 移除 的 空气 从 的 针 尖端 和 到 确保 那 那里 是 流 从 的 针， 和 带来 的 针 到 的 首页 位置

聚焦 开启 的 卵 腔室 至 是 显微注射 和 带来 的 针 返回 进入 焦点 接近 的 边缘 的 的 卵 室 执行 a 精细 调整 的 这 Z轴位置 的 的 目的 如此 那 的 膜 分离 的 卵泡 细胞 从 的 护士 细胞 是 在 焦点 插入 的 针 进入 a 护士 细胞 用于 注射 的 的 分子 信标 超过 a 周期 的 二 到 五 秒

- 至 确保 可重复的 显微注射 成功 焦点 仔细地 在 的 膜 分离 的 卵泡 细胞 和 的 护士 细胞 那 将 是 注射， 而 带来 的 尖端 的 的 针 进入 焦点 与 的 显微操作仪

- 当 全部 的 的 分子 信标 有 已经 注射 轻柔地 移除 的 针 和 收回 它 到 的 首页 位置 改变 的 目的 到 的 期望的 放大倍数 用于 图像 采集 然后 焦点 开启 的 卵 腔室 在……下方 的 新 目的 和 开始 的 图像 采集