化学干燥法：扫描电子显微镜（SEM）生物样品制备

- 至 开始， 开始 由 脱水 和 干燥 a 固定的 样本 到 减少 样本 畸变 导致 由 的 去除 的 气体 和 液体 水 在 的 降低的 操作 压力 的 常规的 扫描 电子 显微镜, 扫描电子显微镜（SEM）

为了 脱水 的 样本, 洗涤 它 与 增加 浓度 的 乙醇 在 水 直到 100% 乙醇 是 达到。 然后 重复 这个 过程 与 a 化学 干燥 试剂 在 乙醇 直到 的 样本 是 洗涤 与 纯 干燥 试剂 转移 的 样本 和 干燥 试剂 至 一个 蒸发 培养皿 封面 它 与 最小 额外的 干燥 试剂 和 让 它 干燥 在 a 烟雾 罩壳 过夜。

接下来， 安装 的 制备 样本 在 的 顶部 的 a 显微镜 存根 使用 碳 粘合剂 胶带 最后， 应用 银 涂料 到 的 边缘 的 的 存根， 然后 从 的 边缘 的 的 存根 到 每个 的 的 样本， 到 减少 的 积聚 的 过量 电子， 哪个 可以 结果 在 不良的 图像 伪影。

在 这 实验， 果实 果蝇， 果蝇 黑腹果蝇， 是 制备 用于 扫描电子显微镜 分析 使用 的 干燥 试剂 HMDS

- 至 准备 果蝇 黑腹果蝇， 浸入 麻醉的 果蝇 在 1 毫升 的 固定剂 用于 2 小时 在 4 度 摄氏度 制作 当然 他们 是 完全地 浸没

使用一个 玻璃 移液器 到 移除 的 固定剂 洗涤 的 固定的 黑腹果蝇 样本 在 a 1.5 毫升 微型离心机 管 三 次 与 1毫升 的 0.1 摩尔 磷酸盐 缓冲液 pH 7.2 在 室 温度 用于 10 分钟 使用 a 玻璃 移液器 到 移除 每个 洗涤 是 仔细的 不 到 移除 的 样本

然后 脱水 的 样本 在 a 微型离心机 管， 在 a 体积 的 1 毫升 使用 a 梯度的 乙醇 系列 用于 10 分钟 每个。 使用 a 玻璃 移液器 到 移除 每个 洗涤 是 仔细的 不 到 移除 的 样品 保持 的 样本 在 的 1.5 毫升 微型离心机 管 与 仅 足够 100% 乙醇 到 盖子 它。

为了 执行 化学 干燥 的 的 果蝇 使用 HMDS， 首先， 替换 的 100% 乙醇 溶液 与 a 1 到 2 溶液 的 HMDS 和 100% 乙醇 用于 20 分钟 然后 替换 的 溶液 与 a 2 到 1 溶液 的 HMDS 和 100% 乙醇 用于 20 分钟 最后， 替换 这 溶液 与 100% HMDS 用于 20 分钟 和 然后 重复 的 过程 一次。

转移 的 样本, 哪个 是 在 a 1.5 毫升 微型离心机 管 和 HMDS, 进入 a 一次性 铝 称重 培养皿 替换 这 100% HMDS 与 仅 足够 新鲜 100% HMDS 到 盖子 的 样品 放置 的 样本 在……之内 的 铝 培养皿 直接地 在 a 化学 烟雾 通风橱 至 干燥 与 a 松散 盖子 如此 作为 a 盒 到 防止 碎片 从 下落 在 的 样本, 和 允许 它 到 干燥 用于 12 到 24 小时

为了 安装 果蝇 标记 的 底部 的 铝 封片 存根。 使用 精确度 镊子 到 位置 的 干燥的 果蝇 在 的 期望的 位置 在 a 碳 粘合剂 标签 固定 到 的 顶部 的 a 存根 下 a 解剖 显微镜 应用 银 导电的 粘合剂 左右 的 外侧 边缘 的 的 stubbs

使用 a 牙签 到 连接 的 银 涂料 到 的 果蝇， 确保 电导率 制作 当然 那 的 涂料 不 触碰 的 期望的 成像 区域。 放置 的 存根 在 a 存根 支架 盒子 并且 然后 位置 的 开放 存根 支架 盒子 在 a 干燥器 和 允许 的 银 涂料 到 干燥 用于 在 最少 三 小时