包埋成年 Drosophila 头部于石蜡中:为组织学制备组织样本

0 次观看 • 3:08 分钟 • April 30th, 2023

- 至 固定 果蝇 用于 石蜡 包埋, 仔细地 推 麻醉的 果蝇 通过 的 间隙 的 a 果蝇 衣领 因此 他们的 头部 是 均匀地 定位 开启 顶部 的 的 设备 而 仍然 已附上 到 的 休息 的 这 身体 对于 组织 固定 位置 的 颈圈 在 卡诺氏液 溶液 卡诺氏液 是 a 变性 固定 试剂 由……组成 的 乙醇, 氯仿, 和 乙酸 酸

至 准备 的 样本 用于 石蜡 浸润, 脱水 的 组织 由 转移 的 衣领 通过 分级的 浓度 的 乙醇 然后, 转移 的 衣领 到 甲基 苯甲酸盐, 一个 有机的 溶剂 接下来, 位置 它 在 a 甲基 苯甲酸酯 和 熔化的 石蜡 溶液 而 加热的 到 确保 的 石蜡 保持 熔化。 继续 到 一个 详细描述 系列 的 洗涤 步骤 与 预热的 石蜡 单独地 到 移除 的 甲基 苯甲酸盐

接下来, 迅速 将 包埋 套环 放入 一 模具中 并 倒入 熔化的 石蜡 以 完全 覆盖 它。 待 石蜡 完全 凝固后, 从 模具 中 取出 蜡 块 并 用 一 片 刀片 修去 多余 的 石蜡。 折断 掉 包埋 套环 , 使 一排 已 包埋的 头部 保留在 石蜡 块 中。 在 本 示例 方案中, 我们 将 看到 该 操作 被 用于 分析 神经 退行性 表型。

- 至 开始, 首先, 使用 镊子 到 线 的 受试者 果蝇 由 的 颈部 进入 的 颈圈 对齐 全部 的 头部 在 的 相同 方向 和 确保 无 损伤 发生 至 的 头部 或 眼睛 包含 无眼 正弦 oculis 果蝇 在 随机 已知 位置 因此 那 的 顺序 的 的 果蝇 能 是 易于 已鉴定 在 的 切片 此外, 如果 的 果蝇 菌株 的 兴趣 具有 光 或 白色 眼睛, 线 红眼 果蝇 在 间隔 沿 的 条带 至 确保 充足 色素 是 当前 到 染色 的 载玻片

记录 的 顺序 的 的 果蝇 一起 与 的 衣领 数量 如果 更多 比 一 是 使用。 一旦 a 衣领 是 完成, 位置 它 进入 卡诺氏液 溶液 用于 3.5 到 4 小时 执行 a 系列 的 乙醇 甲基 苯甲酸盐, 和 石蜡 洗涤 到 准备 的 果蝇 组织 用于 包埋 接下来, 位置 的 颈圈 进入 a 橡胶 冰 立方体 托盘 一 每 部分

轻柔地 倒入 熔融的 石蜡 结束 的 颈圈 避免 空气 气泡 和 允许 它 至 硬化 过夜。 移除 的 石蜡 块 含有 的 颈圈 从 的 托盘 分离 的 石蜡 阻断 从 的 衣领 使用 a 剃刀 刀片, 轻柔地 断裂 关闭 的 衣领 该 细胞器 将 保持 在 的 衣领 而 的 头部 将 保持 在 的 石蜡 阻断

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