0 次观看 • 3:23 分钟 • April 30th, 2023
- 准备 锥形的 注射 针 由 拉 薄壁的 玻璃 毛细血管 使用 a 针 拉制仪 保持 a 针 下 a 显微镜 和 中断 的 尖端, 制作 当然 那 的 开启 是 仅 大 足够 到 刺穿 的 成年 果蝇 角质层 无 损伤 它 更多 比 必要时。 测量 的 注射 体积 由 加载中 你的 针 与 a 无菌的 染料 和 盐 缓冲液 溶液 和 然后 排出 它 到……上 a 滴 的 矿物质 油 开启 a 阶段 微米器 使用 的 比例尺 在 的 微米器 到 测量 的 直径 的 的 排出 液滴, 哪个 能 是 使用 到 计算 的 体积 分装, 和 校准 你的 注射器 设置 相应地。
加载 的 针 与 你的 注射 溶液 和 安装 它 到……上 一个 注射 喷嘴 麻醉 你的 果蝇 与 CO2 和 排列 他们 开启 a CO₂ 果蝇 垫 那 将 保持 他们 麻醉。 一旦 的 果蝇 是 在 的 正确 方向 用于 你的 实验, 继续 与 的 注射 在 的 示例 方案, 我们 将 注射 成年 果蝇 与 荧光素标记的 颗粒 用于 在 体内 成像
- 之后 拉 薄壁的 玻璃 毛细血管 与 a 针 拉制仪, 使用 a 微米计 到 保持 的 针 下 a 显微镜 和 使用 数量 五 细尖 不锈钢 钢 镊子 到 中断 的 尖端 到 a 100 微米计 尖端 直径 至 测量 的 体积 的 液体 那 将 是 注射 进入 每个 果蝇, 加载 a 毛细管 针 与 无菌的 5% 食物 染色 在 PBS 和 排出 的 液体 到……上 a 滴 的 矿物质 油 在 a 0.01 毫米 载物台 微米计
分配 10 微升 的 1.6 毫克 每 毫升 颗粒 到……上 a 小 方形 的 帕拉膜 和 拉 的 液体 进入 的 针 安装 的 针 进入 的 注射器 喷嘴 和 线 的 麻醉的 果蝇 沿着 他们的 指定的 面积 开启 的 果蝇 垫片 腹侧 侧面 向上, 与 的 头部 定向的 朝向 的 前部 的 的 垫板 放置 的 小瓶 在 相应的 区域 在 的 实验台 和 注射 的 果蝇 在 的 上部 角落 的 的 腹部 与 五 100 毫秒 泵 的 液体 到 递送 关于 10 纳升 的 颗粒 总计。 转移 每个 果蝇 进入 的 适当的 小瓶 作为 它 是 注射, 注意 的 时间 在 的 小瓶
接下来, 加载 a 新 针 与 0.4% 锥虫 蓝色 溶液 和 设置 的 气动的 注射器 到 门控 到 允许 a 恒定的 流 的 空气 到 推 的 液体 出 的 的 针 30 分钟 之后 的 初始 注射, 注射 每个 果蝇 腹部 与 锥虫 蓝色 直到 的 腹部 是 完整 和 膨胀的 安装 的 果蝇 在 显微镜 载玻片 与 电的 胶带 腹侧 侧面 下调 推动 的 翅 到 的 侧面 的 的 果蝇 到 固定 他们 到 的 胶带 然后 轻柔地 推 的 头部 进入 的 胶带 到 确保 那 的 果蝇 将 不 移动。
本文详细介绍了一种对成年果蝇注射荧光素标记微粒以进行活体成像的实验方案。该方法包括制备锥形注射针以及麻醉果蝇,以便实现精确注射。
在模式生物中精确递送化合物有助于治疗靶点的机制性风险评估,并支持早期阶段的检测方法开发。该方法提供了一种可扩展的技术途径,用于将标记化合物或生物制剂引入成年果蝇,从而促进表型筛选和靶点验证工作流程。通过标准化注射体积并最大限度减少组织损伤,该方法提高了发现生物学研究流程的可重复性。
该方法适用于从靶点假设验证到先导化合物鉴定的发现连续过程,特别是在需要在体内可视化化合物定位或靶点调节时。
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最后更新:29 八月 2026