果蝇鸡蛋收集和去绒毛膜:一种去除最外层鸡蛋层的方法

0 次观看3:26 分钟 • April 30th, 2023

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- 让果蝇在装有琼脂的培养皿上过夜,琼脂辅以葡萄汁,使卵可视化,并涂有酵母以促进果蝇交配和产卵。要取出鸡蛋,请在盘中加入蒸馏水,然后用画笔轻轻擦拭表面。然后将混合物倒入放置在塑料衬套中的尼龙网中以收集鸡蛋。将鸡蛋浸泡在两轮 7% 的漂白剂中,以去除胚胎中的绒毛膜或保护外层。这个过程称为去绒毛膜化。

鸡蛋现在粘在衬套的侧面。用水清洗 3 次以去除漂白剂。最后,使用画笔将鸡蛋从衬套转移到样品瓶中,以继续显影或立即用于实验。在示例方案中,我们将在无菌条件下收集和去绒毛膜果卵,以饲养具有特定微生物群的果蝇。

- 将尼龙网放入塑料衬套中,准备收集鸡蛋的筛子。如果第二天将使用相同的果蝇,请立即将它们转移到装有新鲜发酵葡萄汁琼脂板的新笼子中。前一个笼子里的葡萄汁盘里装着果蝇蛋。用干净的画笔去除死苍蝇,注意不要打碎琼脂。用蒸馏水冲洗琼脂板,轻轻刷洗琼脂表面的鸡蛋,然后将浆液倒在网眼上以收集鸡蛋。

用 70% 乙醇对生物安全柜进行消毒,然后打开紫外线灯。用 70% 乙醇喷洒所有非生物用品,并立即将它们放入生物安全柜中,然后用紫外线消毒。

- 在生物安全柜内工作或向生物安全柜中添加或移除新材料时,确保采用良好的无菌技术至关重要。

- 将装有鸡蛋的衬套转移到 120 毫升样品杯中,然后将 90 毫升 0.6% 次氯酸钠溶液或 7% 漂白剂缓慢倒入衬套中,就在边缘下方。使用镊子定期在溶液中上下移动衬套以重新悬浮鸡蛋。将衬套直接转移到预装有 90 毫升漂白剂的第二个样品杯中。

在第二次漂白处理结束时,鸡蛋应开始粘附在衬套的侧面。丢弃漂白剂并用无菌水彻底冲洗衬套。同样,在每次洗涤过程中,使用镊子将鸡蛋重悬数次。在第三次洗涤结束时,大多数鸡蛋应该附着在衬套的侧面。

使用无菌画笔,将鸡蛋从衬套侧面转移到无菌饮食中。松开盖子,让氧气进入试管。转移的鸡蛋将在饮食表面可见。

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最后更新:15 八月 2026