游泳诱导麻痹（SWIP）实验：一种定量分析秀丽隐杆线虫（C. elegans）多巴胺介导运动能力的方法

- 至 执行 的 游泳-i诱导的 瘫痪 或 SWIP 检测 转移 L4 分期 C. elegans 幼虫 到 a 玻璃 斑点 培养皿 已填满 与 液体 识别 L4 雌雄同体生物 由 的 存在 的 的 开发中 外阴 A 半月形形状 贴片 在 的 中点 的 的 身体， 和 a 鞭毛状的 尾部

为了 评估 多巴胺介导的 游泳行为，记录 线虫 的 运动 特征 ，即 C 形 身体 弯曲 和 剧烈 扭动 。通常 情况下 ，多巴胺能 神经元 将 多巴胺 释放 到 突触间隙 ， 随后 多巴胺 与 靶细胞上 的 多巴胺 受体 结合 。

一旦 的 消息 是 通过 开启， 多巴胺 是 释放 从 的 受体， 和 未结合的 神经递质 能 是 取样 向上 由 的 多巴胺能 神经元 通过 专业的 转运蛋白 蛋白质 和 重复使用。

在 幼虫 与 改变的 多巴胺 信号转导， 导致 由 失活 突变 在 的 多巴胺 转运蛋白 或 药物 处理 那 增加 多巴胺 释放， 多巴胺 积累 在 的 突触 裂隙 过量 多巴胺 结束 刺激 的 多巴胺 受体 干扰 与 的 运动 程序 和 离开 的 幼虫 瘫痪 幼虫 那 是 无法 至 移动 将 水槽 到 的 底部 的 的 平板

在 本 示例 方案中，将 展示 经 安非他明 处理的 秀丽隐杆线虫 中 手动 与 自动 SWIP 检测 C. elegans 的 详细 操作步骤。

- 对于 手动 评估 的 SWIP 添加 40 微升 的 对照 溶液 与 或 无 0.5 毫摩尔 苯丙胺 进入 a 玻璃 斑点 平板 下 a 体视显微镜， 挑选 8 至 10 晚期 L4 阶段 线虫 与 一个 睫毛 挑选， 和 浸没 的 挑选 在 的 良好 含有 这 溶液 直到 的 线虫 移动 关闭 的 挑选 和 游泳 进入 的 溶液

开始 的 计时器。 注意 的 数量 的 线虫 释放 进入 的 嗯， 和 观察 和 记录 的 数量 的 线虫 表现出 SWIP 在 每个 分钟 标记 用于 a 总计 的 10 分钟

在 的 结束 的 的 步骤, 复制 的 原始 数据 进入 a 电子表格 和 计算 的 百分比 的 线虫 瘫痪的 由 分裂 的 数量 的 线虫 瘫痪的 在 每个 分钟 由 的 总计 数量 的 线虫 测试 贯穿始终 的 检测 和 增殖 由 100. 复制 的 百分比 数值 进入 任何 绘图 和 统计学的 软件 和 绘图 的 数据 与 百分比 数值 的 SWIP 开启 的 y轴 和 时间 在 的 x轴 使用 的 xy 图 格式。

统计学 分析 在……之中 的 对照 和 苯丙胺处理的 组 和 的 时间 的 治疗 能 是 执行。 对于 例如， 由 使用 二 方法 方差分析 和 事后检验 分析。

对于 自动化的 分析 的 游泳 诱导的 瘫痪 设置 向上 的 相机 蠕虫 追踪器 软件， 和 脚本 到 运行 的 追踪 软件 分析。 以及 使用 一个 睫毛 挑选 到 位置 a 单个 晚期 L4 蠕虫 进入 a 玻璃 斑点 培养皿 作为 显示 较早时。

然后， 记录 游泳 视频 的 一 蠕虫 在 a 时间 和 使用 的 蠕虫 追踪器 软件 到 计算 的 频率 的 身体 弯曲。 随后 的 脚本 提供 与 的 追踪 软件 到 获得 的 蠕虫 摆动 频率 和 到 生成 热 地图 从 的 蠕虫 剧烈摆动 数据